湖南省科技计划项目(2008FJ3205)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 分子信标检测限制性内切酶活性的新型荧光分析方法
- 2009年
- 利用分子信标被切割后荧光信号的变化,发展了一种简便的检测限制性内切酶活性的新型荧光分析方法.以限制性内切酶XspⅠ为例,将其识别位点嵌入具有茎环结构的分子信标探针(Molecular Beacon,MB)的环状部分,利用这种分子信标在溶液中形成的瞬时二聚体结构,实现了限制性内切酶对分子信标的切割.在优化的条件下,反应初速度与酶的浓度成正比,线性范围为0.05～50U/mL,检测限为0.05U/mL.通过改变分子信标环部的识别位点的序列,还可以检测其他限制性内切酶如AluⅠ的活性.
- 霍希琴颜鸿飞李军周兴旺李伟羊小海
- 关键词：分子信标荧光分析限制性内切酶
- 阳离子荧光共轭聚合物结合纳米颗粒用于DNA检测
- 2009年
- 利用纳米颗粒对目标DNA的富集、分离作用以及阳离子荧光共轭聚合物良好的荧光特性,建立了一种特异性检测DNA的新方法。首先将标记有猝灭基团的DNA捕获探针修饰到纳米颗粒上,捕获互补的DNA分子;然后加入S1核酸酶,除去未捕获到互补DNA的捕获探针;最后用DNaseⅠ将颗粒上的双链切断,使猝灭基团从纳米颗粒上解离下来,与阳离子荧光共轭聚合物结合并猝灭其荧光。结果表明,目标核酸的浓度与该聚合物的荧光猝灭程度正相关,且具有良好的特异性,线性响应范围为5.0～40nmol/L;检出限为3.7nmol/L(S/N=3)。
- 霍希琴王胜锋王青羊小海崔亮
- 关键词：脱氧核糖核酸核酸酶
