北京市科技计划项目(H060920051230)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：崔磊曹谊林刘广鹏尹宏宇孙剑更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院上海组织工程研究与开发中心北京协和医学院更多>>
- 发文基金：北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Percoll法分离犬骨髓单个核细胞与体外成骨诱导培养的实验研究被引量：8
- 2007年
- 目的建立犬骨髓单个核细胞(Bone marrow mononuclear cells,BMNCs)的分离培养、体外扩增和成骨诱导方法,为骨缺损的修复提供理想的骨组织工程种子细胞。方法用1.063g/ml percoll液分离2.5ml Beagle犬骨髓,利用细胞贴壁筛选法进行分离、培养、扩增和成骨诱导。结果采用1.063g/ml percoll液可获得纯度较高的BMNCs,接种细胞生长良好,平均倍增周期为1d,经成骨诱导培养后可定向分化为成骨细胞。结论采用1.063g/ml percoll液能够较好的进行Beagle犬BMNCs的分离培养和体外扩增,分离得到的细胞具备骨髓基质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的特性。
- 尹宏宇刘广鹏崔磊曹谊林吕长胜
- 关键词：单个核细胞骨髓细胞培养
- 玻璃化冻存骨髓基质干细胞的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的:骨髓基质干细胞(BMSCs)是构建组织工程化骨主要的种子细胞,实现BMSCs的深低温保存对骨组织工程具有重要意义。目前,玻璃化冻存是最有发展前景的冻存方法,因此希望通过改进玻璃化液和预处理条件来提高BMSCs的玻璃化冻存效果。方法:采用不同组成及浓度的玻璃化液在不同的预处理条件下对第2(P2)代成骨诱导的犬骨髓基质干细胞(cBMSCs)进行玻璃化冻存实验,通过复苏后的细胞存活率来选择一种理想的玻璃化液及适合的预处理条件,并在此基础上再与常规冻存的实验结果进行比较,同时考虑冻存过程对细胞成骨活性的影响。结果:将VS226作为玻璃化液,在0℃/5min的预处理条件下玻璃化冻存P2代成骨诱导的cBMSCs,与常规冻存后的细胞存活率相比无统计学差异,且冻存过程对此细胞的成骨能力没有影响。结论:采用VS226来玻璃化冻存BMSCs,可实现为骨组织工程提供大量种子细胞的目的。
- 尹宏宇孙剑刘广鹏崔磊曹谊林
- 关键词：深低温保存玻璃化冻存骨组织工程骨髓基质干细胞
- 大鼠颅骨缺损模型在骨组织工程中的应用被引量：4
- 2009年
- 目前，颅、颌面骨缺损的修复对于整形外科和口腔颌面外科的治疗仍是挑战。用于修复骨缺损的骨移植材料若想应用于临床，必须要具备可充分提高体内骨愈合能力的组织学证据，而通过不同方法将不同的骨移植材料进行动物实验不失为一种行之有效的检测方法。但如果在实验动物模型的选择上缺乏一致性，则很难客观地比较各种移植物之间的修复效果，只有采用标准动物模型才能有效地对其效果进行评估。
- 尹宏宇崔磊曹谊林
- 关键词：骨缺损模型骨组织工程实验动物模型骨移植材料口腔颌面外科
- 深低温保存组织工程化骨的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的:深低温保存是组织工程化骨(TEB)实现大规模临床应用的必要保证。深低温保存方法分慢速冻存和玻璃化冻存。目前,玻璃化冻存是最有发展前景的冻存方法,并被认为更适用于TEB的深低温保存。因此,希望通过改进玻璃化液来提高TEB的玻璃化冻存效果。方法:通过检测第2(P2)代成骨诱导的犬骨髓基质干细胞(cBMSCs)在部分脱钙骨(pDBM)上的粘附率和生长曲线来获得适宜的细胞接种密度和体外培养时间,将在此基础上构建的TEB进行深低温保存。由TEB冻存后的细胞活性来选择一种理想的玻璃化液,并将其用于玻璃化冻存和慢速冻存TEB的对比实验研究。结果:P2代成骨诱导的cBMSCs在pDBM上适宜的细胞接种密度是50×106/ml,最佳的体外培养时间是8天。VS442作为玻璃化液用于TEB的深低温保存。尽管玻璃化冻存TEB的细胞存活率仅为46.2%±7.2%,低于慢速冻存的77.4%±5.1%,但经过体外培养11天后的细胞活性超过了后者,可基本恢复到冻存前的水平。结论:VS442是玻璃化冻存TEB理想的玻璃化液。尽管实验采用的慢速冻存方法可简单有效的保存TEB,但对于TEB而言,玻璃化冻存还是更具有发展潜力的深低温保存方法。
- 尹宏宇崔磊刘广鹏曹谊林
- 关键词：深低温保存玻璃化冻存组织工程化骨
