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哈尔滨市重点科技攻关计划项目(2004AA3CS176-1)
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2007
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悬浮培养昆虫细胞表达重组HPV16 L1蛋白
2007年
目的用悬浮培养昆虫细胞方式表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白,为获得病毒样颗粒(VLPs)及进一步深入研究疫苗和诊断试剂盒打基础。方法优化昆虫细胞Si9的悬浮培养条件;优化扩增病毒和蛋白的条件;空斑试验测定病毒滴度;SDS—PAGE和Western Blot分析目的蛋白的表达情况;透射电镜观察细胞内HPV16 L1蛋白形成的VLPs。结果优化后,悬浮培养昆虫细胞初始接种密度为5×10^5 cell/ml,以MOI(Multiplicity of Infection)=10接种重组病毒rBacV/HPVl6L1,72~84h收获细胞沉淀为最佳。经透射电镜观察,在重组病毒感染的昆虫细胞内,存在HPV16L1蛋白形成的VLPs。结论优化了细胞悬浮培养、病毒扩增和蛋白表达的条件;电镜观察在重组病毒rBacV/HPV16L1感染的昆虫细胞中,HPV16L1蛋白可形成VLPs。
韩聪
王燕
商庆龙
魏兰兰
陈思佳
关键词:
乳头状瘤病毒
细胞
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