广东省自然科学基金(8151012001000002)
- 作品数：7 被引量：33H指数：5
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- Toll样受体-2在早产大鼠坏死性小肠结肠炎中的表达及谷氨酰胺对其的影响被引量：6
- 2011年
- 目的 探讨坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEC）早产大鼠肠道组织中Toll样受体-2（Toll—likereceptor-2，TLR-2）和半胱氨酸蛋白酶～3（caspase-3）的表达及谷氨酰胺（glutamine，Gln）对其表达的影响及对NEC肠道损伤的保护作用。方法60只早产新生大鼠按随机数字表法分为模型组、Gln干预组和对照组，每组20只。模型组和Gln干预组早产新生大鼠采用代乳品人工喂养＋缺氧冷刺激建立NEC模型，Gin干预组同时在配方乳中加入Gin0．3g／kg；对照组未进行任何干预。所有早产大鼠生后第3天处死后取肠道组织，HE染色观察病理改变，对回肠进行病理评分，并采用免疫组织化学方法检测空肠、回肠和结肠caspase-3、TLR-2蛋白的表达，采用荧光定量聚合酶链反应技术检测空肠、回肠及结肠TLR-2mRNA的表达。结果模型组、Gln干预组和对照组回肠损伤病理评分分别为（3．10±0．99）分、（2．40±0．69）分及（0．30±0．48）分；回肠组织TLR-2蛋白的表达分别为2．53±0．94、2．15±0．82及1．57±0．62；caspase-3蛋白的表达分别为2．83土0．45、2．70±0．04及0．91±0．29；模型组TLR-2tuRNA的含量为Gin干预组的1．46倍，为对照组的2．10倍。与对照组相比，模型组的肠道损伤病理评分、caspase-3蛋白、TLR-2蛋白和TLR-2mRNA的表达均增加（P均〈0．01）；与模型组相比，Gln干预组的肠道损伤病理评分、caspase-3蛋白、TLR-2蛋白和TLR-2mRNA的表达均有下降（P〈0．05）。TLR-2mRNA和caspase-3蛋白的表达呈正相关（r=0．71，P〈0．01），与肠组织损伤病理评分也呈正相关（r=0．69，P〈0．01）；caspase-3与肠组织损伤病理评分呈正相关（r=0．81，P〈0．01）。结论TLR-2可能参与了NEC的发病。降低TLR-2的表达，抑制肠黏膜细胞的凋亡，可能是Gln保护NEC早产大鼠肠道的机制之一。
- 李薇郑晓辉周伟荣箫黄龙光
- 关键词：谷氨酰胺TOLL样受体2细胞凋亡早产
- 谷氨酰胺对坏死性小肠结肠炎新生大鼠Toll样受体4的调控被引量：6
- 2011年
- 目的研究坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠肠道组织中Toll样受体4(TLR-4)和caspase-3的表达情况,探讨谷氨酰胺(Gln)对NEC肠道保护作用的可能机制。方法 60只早产新生大鼠随机分为模型组、Gln组和对照组(n=20)。代乳品人工喂养+缺氧+冷刺激建立NEC模型,Gln组采用代乳品+Gln(0.3 g/kg)人工喂养,同时给予缺氧冷刺激,对照组未进行任何干预,第3天处死后取出肠道,苏木素-伊红染色后对回肠进行病理评分,免疫组织化学检测空肠、回肠及结肠caspase-3、TLR-4蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测空肠、回肠及结肠TLR-4 mRNA的表达。结果与对照组相比,模型组的病理评分、caspase-3、TLR-4蛋白和TLR-4 mRNA的表达均增加(P<0.01);与模型组相比,Gln组的各项指标均有所下降(P<0.05)。结论 TLR-4可能参与了NEC的发病机制,降低TLR-4的表达,抑制肠黏膜细胞的凋亡可能是Gln保护NEC新生大鼠肠道的机制之一。
- 李薇郑晓辉周伟荣箫黄龙光
- 关键词：坏死性小肠结肠炎谷氨酰胺TOLL样受体4凋亡新生大鼠
- 谷氨酰胺对坏死性小肠结肠炎新生大鼠的保护作用被引量：5
- 2010年
- 目的观察坏死性小肠结肠炎(NEC)新生鼠肠道组织中Caspase-3和ki67的表达情况,探讨谷氨酰胺(Gln)对NEC新生鼠肠道的保护作用及可能机制。方法 30只早产鼠(21d)及30只足月新生鼠分别分为早产模型组、早产Gln干预组、早产对照组、足月模型组、足月Gln干预组和足月对照组。代乳品人工喂养+缺氧+冷刺激建立NEC模型,Gln干预组采用代乳品+Gln人工喂养,同时予缺氧冷刺激;对照组置于(代)母鼠身旁喂养,不进行任何干预。第3天处死后取出大鼠肠道,HE染色后对其回肠进行病理评分,免疫组织化学检测其空肠、回肠及结肠Caspase-3和ki67的表达。采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果与对照组比较,模型组空肠、回肠及结肠病理评分、Caspase-3和ki67的表达均增加(Pa<0.01);与模型组比较,Gln干预组上述指标的改变得到显著改善(Pa<0.05);早产鼠模型组、Gln干预组及对照组空肠、回肠、结肠病理评分、Caspase-3和ki67的表达分别与对应的足月鼠模型组、Gln干预组及对照组比较,差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论细胞凋亡与增殖参与了NEC的病变过程,Gln对肠道的保护作用可能是通过调控凋亡与增殖的平衡来实现的。
- 周伟郑晓辉荣箫黄龙光
- 关键词：坏死性小肠结肠炎谷氨酰胺凋亡增殖
- 脂多糖联合人工喂养诱导新生大鼠坏死性小肠结肠炎模型的建立与评价被引量：4
- 2014年
- 目的探讨脂多糖(内毒素,LPS)联合人工喂养诱导新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型的方法并评价其效果。方法出生当日SD新生大鼠,按不同的造模方式随机分为9组(每组8只):A组大鼠人工喂养;B1、B2、B3、B4、B5、B6组为人工喂养+LPS灌胃,LPS的剂量分别为5、10、15、20、30、40 mg/kg,以筛选LPS诱导新生大鼠NEC模型的最佳剂量;C组大鼠采取鼠乳喂养+LPS(30 mg/kg)灌胃;D组大鼠为鼠乳喂养,作为正常对照组。每日定时称量体重。3天后禁食24小时取回肠末端组织HE染色,光镜下观察肠道组织病理损伤情况,并进行病理评分,评分≥2分确定为NEC。按B5组造模条件,重复两次,每次8只,分别为B5a、B5b组。结果 A、B4、B5、B6组新生大鼠均出现不同程度的活动减少,倦怠,进而可见腹胀及粪便颜色性状发生改变。实验结束A、B组体重不增或下降,C、D组体重增加,A、B组体重分别与D组比较,差异均有显著性(P<0.05)。各组病理评分分别为A组:1.78±0.52,B1组:1.76±0.32,B2组:1.83±0.1,B3组:1.87±0.33,B4组:2.16±0.11,B5组:3.34±0.37,B6组:3.78±0.51,C组:0.52±0.42,D组:0.3±0.48。B5a、B5b组评分分别为3.3±0.17、3.35±0.44。B5、B6模型组分别与对照组比较,差异均有显著性(P<0.05);模型组内B5、B6组分别与B1、B2、B3、B4组比较,差异均有显著性(P<0.05);B5、B6组分别与A组比较,差异均有显著性(P<0.05)。B5a、B5b分别与B5组比较,差异均无显著性(P>0.05)。B4、B5、B6组的NEC发生率分别为25%(2/8)、75%(6/8)和100%(8/8)。A、B1、B2、B3、C、D组的NEC发生率均为0。结论在LPS剂量为30 mg/kg时,联合人工喂养可诱导与人类新生儿NEC临床特征、病理改变基本一致的严重肠道损伤,且其发生率高,重复性好,特异性高,可用于新生儿NEC的研究。
- 李美雪周伟吕回陶莉黄龙光袁伟明
- 关键词：脂多糖坏死性小肠结肠炎
- 早产大鼠坏死性小肠结肠炎三种常用模型的建立及评价被引量：16
- 2010年
- 目的用人工喂养＋缺氧＋冷刺激、缺氧-复氧及腹腔注射内毒素（lipopolysaccharides，LPs）等国内外常用方法建立早产大鼠坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEc）模型，并进行比较和评价。方法A组早产大鼠（n=10）采用代乳品人工喂养，并给予100％氮气缺氧90s，4℃冷刺激10min，每天2次，连续2d；B组早产大鼠（n=10）给予100％氮气5min，100％氧气5min，每天2次、连续3d；C组早产大鼠（n=10）给予腹腔注射LPS5mg／kg；D、E、F组为相应正常对照组，每组10只。HE染色后光镜下观察肠道、肝、肺及肾组织病理改变，并对肠组织损伤情况进行病理评分，评分≥2分确定为NEC。结果A、B、C组均出现不同程度的活动减少，腹胀腹泻，肠道扩张充血。A至F组的肠组织损伤病理评分结果分别为（3．13±0．64）分、（1．40±0．52）分、（2．00±0．42）分、（0．30±0．48）分、（0．30±0．48）分和（0．40±0．52）分，模型组与相应对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；模型组内B组与A组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；C组与A组比较，差异亦有统计学意义（P〈0．05）。A、B、C组的NEC发生率分别为6／8、20％（5／10）和4／8，对照组的NEC发生率均为0。C组的肝脏、肾脏和肺脏损伤较A、B组严重，而对照组各重要脏器均未见异常。结论与缺氧复氧和腹腔注射LPS等单因素的建模方法相比，综合运用人工喂养＋缺氧＋冷刺激更接近新生儿NEC的病因，且其发生率高，重复性好，特异性强，是一种较为理想的NEC建模方法。
- 郑晓辉周伟荣箫黄龙光
- 关键词：早产小肠结肠炎坏死性疾病模型
- 谷氨酰胺对肠道保护作用的研究进展被引量：1
- 2009年
- 谷氨酰胺（Gln）是人体内含量最多的条件必需氨基酸，是一种高效能量物质，为体内合成嘌呤、嘧啶及核苷酸提供氮的前体，参与体内酸碱平衡调节，运送氮源和氮源的提供者，是肠道黏膜细胞及各种快速生长细胞的代谢氧化燃料。与肝脏或骨骼肌相比，小肠上皮细胞内Gln池贮量很小，明显依赖于外源性Gln的供给，小肠黏膜Gln合成酶活性也很低。因此，早产儿有必要补充Gln。在应激状态下，Gln通过降低肠黏膜通透性、增强肠道免疫力、阻止肠黏膜细胞凋亡和减少菌群移位等作用保护肠道。早产儿经胃肠道或静脉补充Gln能改善喂养耐受性，缩短静脉营养时间，并能更快过渡到全胃肠道喂养，还能降低坏死性小肠结肠炎的发生率。但目前临床上是否对重症患者和早产儿等常规使用Gln还存在很大争议，Gln的用量也还没有明确的标准可供参考。
- 郑晓辉周伟
- 关键词：谷氨酰胺
- 坏死性小肠结肠炎动物模型简介及评价被引量：6
- 2010年
- 郑晓辉周伟
- 关键词：新生儿坏死性小肠结肠炎动物模型新生儿重症监护病房极低出生体重儿住院患儿
