国家自然科学基金(81071941)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
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- miR-9在H／RS细胞的表达及其对靶点PRDM1的调控
- 2013年
- 目的检测miR-9在霍奇金淋巴瘤H／RS细胞的表达及其对靶点PRDM1的调控作用。方法采用荧光定量反转录聚合酶链反应（RT—PCR）和原位杂交方法从定量和定位两方面检测miR．9在正常CD；B淋巴细胞及8株淋巴造血系统肿瘤细胞株中的表达，并将化学合成的miR．9反义寡核苷酸瞬时转染IA28细胞使其沉默，观测PRDM1蛋白表达的变化。结果荧光定量RT—PCR结果显示L428细胞株miR．9的表达远高于正常的cDjB淋巴细胞和其他淋巴瘤细胞株f分别为OCI—Lyl细胞、Raji细胞、EB病毒（EBV）’永生化B细胞、间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）细胞的47倍、50倍、7倍、6倍]；原位杂交结果显示miR-9的表达定位于胞质，在L428细胞呈弥漫强阳性表达。在弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）和伯基特淋巴瘤细胞株呈散在弱阳性表达，在KARPAS-299和Jurkat细胞表达阴性；瞬时下调IA28细胞中miR-9后PRDM1蛋白的表达水平升高。结论miR-9在经典霍奇金淋巴瘤中扮演着“癌基因”的角色，可能通过转录后调控PRDMl基因发挥着潜在的调节终末B细胞分化功能。
- 周新华黄学平代新珍葛娟赵彤
- 关键词：MIR-9PRDM1H再分化
- CD99调控对H/RS细胞分化的影响
- 2013年
- 目的探究CD99基因调控cHL细胞株L428的分化。方法形态观察、免疫细胞化学和流式细胞检测上调CD99基因对L428细胞形态、免疫表型的影响,实时荧光定量RT-PCR、Western blot和免疫荧光共聚焦显微镜方法检测PRDM1的表达。结果 L428细胞过表达CD99后形态学观察显示细胞体积变小,免疫组化和流式检测显示CD15和CD30表达基本消失,CD79a、CD19和CD38表达增强,CD138无明显变化,PRDM1在mRNA和蛋白水平出现明显表达。结论 L428细胞过表达CD99后形态发生改变,在恢复了B细胞表型的基础上又进一步打开了向浆细胞分化的开关,诱导H/RS细胞向终末B细胞方向分化。
- 周新华黄学平钟琳赵彤
- 关键词：HCD99分化
- Hsa-miR9在伯基特淋巴瘤EBV^(+/-)细胞中的差异表达及其与BCL-6调控的关系被引量：3
- 2013年
- 目的探究hsa-miR9在伯基特淋巴瘤细胞株EBV^+Raji/EBV-Ramous中差异表达及其与BCL-6的关系。方法荧光定量PCR检测hsa-miR9和BCL-6在EBV^+Raji和EBVRamous细胞中的表达;利用Oligofectamine 2000脂质体法将化学合成的hsa-miR9-inhibitor和随机序列转染高表达hsa-miR9的EBV^+Raji细胞(Raii-miR9-inhibitor组和Raji-CON组),hsa-miR9-mimics和相应的随机序列转染低表达hsa-miR9的EBVRamous细胞(Ramous-miR9-mimics组和Ramous-CON组);运用实时荧光定量PCR、Western blotting检测转染前后BCL-6的表达,AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡率和观测凋亡细胞形态。结果 hsa-miR9和BCL-6在EBV^+Raji细胞的表达水平显著高于EBVRamous细胞(P<0.01);EBV^+Raji细胞经转染hsa-miR9-inhibitor 48 h后,BCL-6基因和蛋白水平的表达量均降低,而EBVRamous细胞经转染hsa-miR9-mimics 48 h后,BCL-6基因和蛋白水平的表达量均升高,与相应的随机序列组相比均有显著性差异(P<0.05);转染48 h后Raji-miR9-inhibitor组凋亡率明显低于Raji-CON组,Ramous-miR9-mimics组凋亡率明显高于Ramous-CON组,差异具有统计学意义(P<0.05);Raji-CON组和Ramous-miR9-mimics组可见明显凋亡细胞。结论 hsa-miR9正向调控伯基特淋巴瘤细胞株EBV^+Raji/EBVRamous细胞BCL-6的表达和凋亡。
- 代新珍陈少红葛娟韩西群周新华吴自勍赵彤
- 关键词：伯基特淋巴瘤BCL-6RAJI细胞
- 经典型霍奇金淋巴瘤中大细胞与小细胞亚系生物学特性比较
- 2014年
- 目的:探究经典型霍奇金淋巴瘤细胞系L428中大小细胞亚系生物学特性差异及其意义。方法:应用有限稀释法分离出L428中大小细胞亚系并进行传代培养,分别命名为L428-big和L428-small细胞。免疫细胞化学实验检测L428中大小细胞亚系CD15和CD30表达差异,MTT实验检测L428中大小细胞亚系增殖能力的差异;流式细胞术检测L428中大小细胞亚系的凋亡差异。结果:成功分离出L428细胞株中大小细胞亚系并进行传代培养;免疫组化显示L428-big细胞的CD15及CD30表达明显强于L428-small细胞;MTT实验显示,L428-big细胞和L428-small细胞之间增殖能力差异有统计学意义,F=565.273,P<0.001,L428-small细胞增殖能力高于L428-big细胞,P<0.001;流式细胞术显示,L428-big细胞的凋亡率为(3.3±0.1)%,明显多于L428-small细胞(0.4±0.1)%,P<0.001。结论:L428-small细胞增殖能力强,凋亡少,为经典型霍奇金淋巴瘤细胞起源的进一步研究提供一定的实验基础。
- 李锋黄作平黄学平王志强朱梅刚赵彤
- 关键词：有限稀释法霍奇金淋巴瘤
- CD99调控经典霍奇金淋巴瘤细胞株L428向B细胞方向分化被引量：4
- 2013年
- 目的分析上调CD99基因对经典霍奇金淋巴瘤(cHL)细胞株L428形态和免疫表型的影响,探究CD99基因对H/RS细胞发生发展的意义。方法鬼笔环肽染色和大细胞计数分析过表达CD99基因对L428细胞形态的影响;免疫细胞化学和流式细胞检测分析上调CD99基因对L428细胞免疫表型的改变。结果 CD99基因的过表达导致L428细胞变小、骨架发生重建,丢失了cHL的诊断标记CD30和CD15,重现B细胞表型PAX5、CD19、CD79α、BCL-6和CD10。结论 CD99基因过表达调控L428细胞向B细胞方向转化,提示cHL的B细胞表型的缺失很可能是CD99基因下调的结果。
- 周新华黄学平黄作平王志强赵彤
- 关键词：CD99B细胞
