深圳市科技计划项目(200902013)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：秦晓林李武县涂植光成凤匡文斌更多>>
- 相关机构：重庆医科大学深圳市坪山新区人民医院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- TFPI-2对人肝癌细胞生长增殖、凋亡及AFP合成的影响被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨TFPI-2基因对人肝癌细胞Hep3B生长增殖、凋亡及甲胎蛋白AFP表达的影响。方法:将重组质粒PCDNA3.1-TFPI-2转染Hep3B细胞并经G418稳定筛选后,RT-PCR和Westernblot检测转染前后TFPI-2 mRNA和蛋白表达水平,采用CCK-8法、生长曲线观察TFPI-2对人肝癌细胞Hep3B生长增殖的影响,通过平板克隆形成实验观察单个细胞的增殖能力,RT-PCR检测AFP mRNA的表达,并用电化学发光法测定培养上清液中甲胎蛋白AFP含量,流式细胞仪检测细胞早晚期凋亡情况。结果:转染成功的Hep3B细胞检测到TFPI-2 mRNA和蛋白的表达;与转染空载体及未转染的细胞相比,转染TFPI-2的细胞生长增殖能力明显减弱;AFP mRNA表达抑制率为16.51%,AFP蛋白分泌明显低于对照组(P<0.01);流式细胞术检测转染TFPI-2的Hep3B细胞早期凋亡率明显增加(24.03%±7.28%vs 8.77%±3.66%)。结论:TFPI-2表达可显著抑制肝癌细胞生长和AFP的表达,同时还能诱导细胞早期凋亡。为进一步探讨靶向TFPI-2的肝癌基因治疗提供了实验依据。
- 秦晓林徐勇范晓卿李武县匡文斌成凤涂植光
- 关键词：肝癌组织因子途径抑制物-2甲胎蛋白
- 组织因子途径抑制物-2对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)对人肝癌Hep3B细胞株裸鼠皮下移植瘤生长以及肿瘤血管生成的作用。方法:将TFPI-2稳定表达的Hep3B细胞(Hep3B-TFPI-2组)、转染空载体PCDNA3.1的Hep3B细胞(Hep3B-V组)及未进行转染的Hep3B细胞(Hep3B-P组)分别接种于裸鼠皮下,待皮下成瘤后,每隔3d测量1次肿瘤大小,并绘制出肿瘤体内生长曲线。3周后处死裸鼠,测定肿瘤体积,提取组织中总RNA和蛋白,实时荧光定量PCR(real-time uorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)检测肿瘤组织中TFPI-2和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA水平;蛋白质印迹法检测肿瘤组织中TFPI-2和VEGF蛋白表达水平;免疫组织化学法检测肿瘤组织中TFPI-2蛋白表达水平和肿瘤微血管密度(micro vessel density,MVD)。结果:Hep3B-TFPI-2组最终肿瘤体积明显小于Hep3B-V组和Hep3B-P组(P<0.05)。Hep3B-TFPI-2组肿瘤组织的TFPI-2mRNA表达丰度和蛋白水平明显高于其余2组(P<0.05);而Hep3B-TFPI-2组VEGFmRNA表达丰度和蛋白水平明显低于其余2组,与2个对照组相比,VEGF蛋白表达抑制率分别为19.8%和23.5%(P<0.05)。Hep3B-TFPI-2组MVD计数明显低于其余2组(P<0.05)。结论:TFPI-2能抑制人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长和肿瘤血管生成。
- 秦晓林李武县李紫微涂植光张莉唐景云陈敬波徐勇
- 关键词：丝氨酸蛋白酶抑制剂异种移植模型抗肿瘤试验新生血管化组织因子途径抑制物-2
