国家教育部博士点基金(200804871041)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：袁劲栾弘张茜刘丽丽张妙更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外分化的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可减轻小鼠皮肤移植急性排斥反应被引量：3
- 2010年
- 目的利用转化生长因子-β1(TGF-β1)体外诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞,通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间,并研究其相关机制。方法分选获取CD4+CD25-T细胞,根据诱导条件不同分为3组:对照组、无TGF-β1刺激组和TGF-β1组。检测CD4+CD25+T细胞比例,并用RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达水平。建立小鼠皮肤移植模型,于0、1、2、3 d输注上述细胞,观察皮肤移植物存活时间,并检测移植物的病理改变和受鼠外周淋巴细胞的增殖能力。结果 TGF-β1组中CD4+CD25+T细胞比例与无TGF-β1刺激组相近,但高表达Foxp3 mRNA(P<0.05)。将培养的细胞输注给受鼠后发现,输注无TGF-β1刺激组细胞的受鼠其移植物平均存活时间(mean survival time,MST)为(7.3±1.6)d,低于对照组(P<0.05);而输注TGF-β1组细胞小鼠MST为(24.1±2.5)d,较对照组和无TGF-β1刺激组明显延长(P<0.05)。病理检测亦显示TGF-β1组受鼠移植物结构完整,无明显淋巴细胞浸润。用Alamar Blue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示,TGF-β1组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制,低于对照组。进一步检测外周血中IL-4和IFN-γ的表达水平,结果显示TGF-β1组小鼠体内IL-4和IFN-γ均明显低于对照组和无TGF-β1刺激组。结论 TGF-β1可诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞,将诱导后的调节性T细胞进行过继输注可延长小鼠皮肤移植物存活时间。
- 袁劲吴轲陈忠华
- 关键词：转化生长因子-Β1调节性T细胞皮肤移植
- CD4^+T细胞免疫应答介导小鼠抗GBM肾小球肾炎
- 2012年
- 目的探讨CD4+T细胞免疫应答在小鼠抗GBM肾小球肾炎中的作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为肾炎模型组和正常对照组,两组均给予兔IgG预致敏,10 d后肾炎模型组给予兔抗GBM血清(0.2 mL/20 g)尾静脉注射,正常对照组给予正常兔血清,分别于第7、14、21、28天行以下处理:收集尿和血清样本检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)和尿蛋白/尿肌酐(UmAlb/c)的含量;光镜和电镜观察肾组织病理学改变;流式细胞仪检测淋巴器官和肾脏局部免疫细胞分布情况;Real-time PCR检测肾组织中IFN-γ、IL-4、IL-17A、TGF-β1、CCL-2、CCL-4、CCL-5和CXCL-1等细胞因子mRNA的含量;ELISA检测血清中IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-12、IL-10和TGF-β1等细胞因子的表达水平。结果与正常对照组小鼠相比,肾炎模型组小鼠的Scr、BUN和UmAlb/c均明显升高(P<0.05);光镜下可见典型新月体肾炎样病理改变,免疫荧光可见兔IgG和鼠IgG沿GBM呈线性沉积;小鼠脾脏中Th1、Th2、Th17和Treg细胞比例明显增加,同时肾脏局部有大量Th1、Th2和Th17细胞浸润;血清及肾脏局部IFN-γ、IL-4、IL-17A和TGF-β1等细胞因子表达水平相应上调。结论 CD4+T细胞免疫应答能介导小鼠抗GBM肾小球肾炎并在其病理进程中发挥促进作用。
- 张茜栾弘张妙陈艳王艻刘丽丽何凡吕永曼袁劲
- 关键词：免疫细胞T细胞免疫应答
- Galectin-9对活化的CD4^＋T细胞免疫调节作用的机制研究被引量：3
- 2012年
- 目的研究Galectin-9对活化的CD4＋T细胞的免疫调节作用，并进一步探讨其作用机制。方法获取野生型C57BL／6小鼠淋巴细胞，利用MACS分选CIM＋naiveT细胞，给予anti-CD3（2．5μm1）抗体、anti-CD28（5μg／ml）抗体和IL-2（100ng／ml）刺激，培养3d。将活化的CD4＋T细胞分为3组：正常对照组、Galectin-9组和Galectin-9＋α-乳糖组。利用CFSE检测T细胞增殖情况，并动态观察细胞形态变化；检测CD4＋CD69＋T细胞、Thl、Th2和Thl7细胞的比例；并利用ELISA检测淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-12、IL-17A和TGF-β1等细胞因子的水平；利用Westernblot检测T-bet、GATA-3和ROR-γt等T细胞分化调控蛋白的变化。结果与正常对照组和Galectin-9＋α-乳糖组相比，Galectin-9组于2h时开始出现细胞形态改变，同时CD4＋CD69＋T细胞、Thl和Thl7细胞表达减少（P〈0．05），但Th2细胞无明显变化；培养上清液中IFN-γ、IL-12、IL-17A和TGF-β1的表达水平降低（P〈0．05），而IL-4和IL-10等Th2型细胞因子水平无明显变化；同时T-bet和ROR-γt的表达水平减少（P〈0．05）。结论Galectin-9抑制活化CD4＋T细胞的Thl和Thl7型免疫应答，而对Th2型免疫应答无影响，免疫调节的机制可能与其在转录水平影响Thl和Thl7特定转录因子的表达有关。
- 栾弘张茜王艻张妙陈艳许小利李杏爱刘丽丽袁劲吕永曼
- 关键词：GALECTIN-9TH2TH2TH17
