国家教育部博士点基金(200804871043)
- 作品数：4 被引量：19H指数：2
- 相关作者：邓云华张彩娥吴雄文陈艳彭芬更多>>
- 相关机构：华中科技大学湖北民族学院附属民大医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同病程尖锐湿疣患者特异性CTL细胞频率和功能分析
- 2009年
- 目的利用负载人乳头瘤病毒6型（HPV-6）E7抗原肽的HIA-A$0201四聚体染色结合流式细胞术，分析不同病程HLA—A2阳性HPV-6所致尖锐湿疣（CA）患者外周血中特异性CTL细胞的频率和功能。方法以负载HPV-6E7抗原肽1、2细胞（表达HLA—A2分子）作为刺激细胞，与不同病程CA患者的外周血淋巴细胞（PBL）共培养，获得特异性CTL。体外制备PE标记HLA—A2／HPV-6E7四聚体，利用该四聚体和FITC．CD8单克隆抗体对这些特异性CTL进行双色荧光染色，经流式细胞仪分析双阳性细胞的频率；同时采用乳酸脱氢酶释放法（LDH）测定这些特异性CTL的杀伤活性。结果经混合淋巴细胞培养4周后，正常对照组特异性CTL细胞频率为（0．320±0．076）％，复发期CA患者组特异性CTL细胞频率为（1．100±0．064）％，缓解期cA患者组的特异性CTL为（1．115±O．071）％，均显著高于正常对照组（t值分别为19．23和18．66，P均〈0．001），复发期CA患者组与缓解期CA患者组间差异无统计学意义（t值为0．34，P=0．74）。复发期患者组特异性CTL杀伤活性为（51．18±0．48）％，缓解期CA患者的特异性CTL杀伤活性为（59．33±1．71）％，两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论缓解期CA患者与复发期CA患者外周血中特异性CTL数量相近，但缓解期CA患者特异性CTL杀伤活性明显强于复发期CA患者，这可能是不同病程CA患者转归差异的根本原因。
- 张彩娥吴雄文邓云华
- 关键词：E7抗原尖锐湿疣四聚体细胞毒性T淋巴细胞
- 家族性进行性色素过度沉着症家系丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11基因的克隆和序列鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的进行家族性进行性色素过度沉着症(FPH)家系中患者丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶11(STK11)基因的克隆和序列鉴定,以期检测FPH发生是否由于STK11突变所致。方法从FPH患者永生化的B淋巴细胞中提取总RNA,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获取cDNA序列,加入特异性引物经PCR扩增STK11 cDNA双链,再经过HindⅢ、EcoRI双酶切PCR产物及质粒载体pcDNA3.0,酶切产物经回收、连接,产物转化到大肠杆菌DH5α,选取阳性克隆菌落进行PCR鉴定、酶切鉴定和测序分析。结果成功构建重组质粒pcDNA3.0-STK11,其测序结果与美国国立生物技术信息中心查询的正常序列结果一致。结论该FPH家系发病并非由于STK11突变所致,在初步定位FPH致病基因的19p13.1-pter区段存在尚未发现的致病基因。
- 张彩娥邓云华吴雄文
- 关键词：克隆
- NICU新生儿感染预防与护理分析被引量：16
- 2016年
- 目的研究新生儿重症监护病房(NICU)新生儿感染的护理方法及护理效果,为降低感染率提供参考依据。方法选取2015年1-8月医院NICU诊治的80例感染新生儿临床资料进行分析,采用随机对照方法将新生儿分为两组,对照组40例新生儿实施常规护理,试验组40例新生儿在对照组护理基础上联合护理干预,比较两组新生儿护理效果,数据采用SPSS 18.0软件进行统计分析。结果试验组新生儿护理总有效率为95.0%,显著高于对照组85.0%;试验组新生儿治疗后复发率为5.0%,显著低于对照组17.5%;两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NICU感染新生儿治疗过程中在常规护理基础上联合护理干预效果理想,能提高护理质量,促进新生儿早期恢复,值得推广应用。
- 吴华莉彭芬廖平博陈艳向茂艳
- 关键词：新生儿重症监护病房新生儿感染护理方法护理效果
- 人ABCB6表达载体的构建及稳定表达细胞株A375的筛选被引量：2
- 2012年
- 目的构建表达载体pIRES2-ZsGreen1-ABCB6,在转染的人黑素瘤细胞系株A375中筛选其稳定表达的细胞株。方法抽取健康人外周血,分离外周血单个核细胞,提取总RNA,逆转录获取cDNA序列,加入特异性引物经PCR扩增获得ABCB6cDNA双链,再经过BglII、EcoRI双酶切PCR产物及质粒载体pIRES2-ZsGreen1,酶切产物经回收、T4DNA连接酶连接,产物转化到大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆经菌落PCR鉴定、酶切鉴定和测序分析,以确定构建质粒正确。转染人黑素瘤细胞株A375,G418筛选稳定表达ABCB6的单克隆细胞株,应用荧光显微镜鉴定ABCB6蛋白的表达情况。结果 pIRES2-ZsGreen1-ABCB6质粒经菌落PCR、酶切、测序鉴定正确,经过G418筛选后获得稳定细胞株,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白在A375细胞中的表达。结论表达载体pIRES2-ZsGreen1-ABCB6构建正确,并成功筛选出稳定表达ABCB6的A375细胞株,为进一步研究ABCB6的生物学功能奠定了良好基础。
- 张彩娥陈岚任伟萍梅爱华邓云华
- 关键词：转染A375细胞
