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广东省自然科学基金(04300622)

作品数:1 被引量:0H指数:0
相关作者:闫欣欣刘乃华唐琴琴晏永波李校更多>>
相关机构:温州医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇葡萄糖
  • 1篇克隆
  • 1篇基因
  • 1篇N-乙酰
  • 1篇D-葡萄糖
  • 1篇产物纯化
  • 1篇纯化

机构

  • 1篇温州医学院

作者

  • 1篇余云彦
  • 1篇张卫星
  • 1篇林绍强
  • 1篇李校
  • 1篇晏永波
  • 1篇唐琴琴
  • 1篇刘乃华
  • 1篇闫欣欣

传媒

  • 1篇温州医学院学...

年份

  • 1篇2010
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶基因的克隆、表达及产物纯化
2010年
目的:从猪肾中提取RNA,从中克隆出N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶(GNE)基因,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达。方法:从猪肾中提取总RNA,通过RT-PCR克隆出GNE基因,经测序,感受态大肠杆菌E.coli DH5a转化,质粒抽提,鉴定以及大肠杆菌BL21(DE3)转化表达,通过His-tag亲和纯化(Ni Sepharose 6 Fast Flow),G-25柱脱盐,SDS-PAGE电泳检测。结果:RNA提取物经紫外分光光度计检测OD260/OD280=1.77,说明无明显的蛋白质和酚污染。RT-PCR扩增目的片段,测序证明该基因的ORF为1 206 bp,编码402个氨基酸组成的酶蛋白(GNE)。SDS-PAGE显示,纯化蛋白为45 kD的单一条带,与基因序列推测值一致。结论:GNE基因已被成功地克隆和表达。
余云彦张卫星闫欣欣唐琴琴刘乃华晏永波李校林绍强
关键词:基因克隆纯化
共1页<1>
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