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2012-2013年广东猪流行性腹泻流行情况调查报告被引量：9: 2015年; 为了解广东猪群流行性腹泻(PED)的发生状况,对全省120个不同养殖规模的猪场进行了猪群腹泻的流行病学调查和样品采集。共采集566份肠道和粪便样品,采用猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)-猪流行性腹泻病毒(PEDV)-猪轮状病毒(PRo V)三重荧光RT-PCR方法进行病原学检测。结果显示,TGEV、PEDV和PRo V的样品阳性率分别为0.88%、23.32%和16.78%,造成广东猪群爆发腹泻的主要病原是PEDV;PEDV的场阳性率和样品阳性率分别为35.83%和23.32%,PED已成持续感染的地方流行态势;从规模看,以存栏母猪100头以下的猪场群内PED发病率最高,为77.38%,生物安全措施好的场发病率较低;从生长阶段(用途)看,以哺乳仔猪的发病率最高,为50.33%,且现有PED疫苗的免疫已无法避免PED的发生。; 田云焦颖王福广查云峰孙彦伟; 关键词：流行病学调查猪流行性腹泻猪传染性胃肠炎猪轮状病毒感染

2012年广东猪群腹泻流行病学调查被引量：12: 2015年; 为了解2012年广东猪群腹泻的发病状况,对全省19个地级市102个不同养殖规模的猪场进行了猪群腹泻的流行病学调查。采集236份肠道和粪便样品,采用猪流行性腹泻病毒(PEDV)-猪轮状病毒(PRo V)-猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)三重荧光RT-PCR方法进行病原检测。结果显示,猪群腹泻的场阳性率高达68.63%,发病率为37.76%,病死率为50.26%。从规模看,以存栏母猪100头以下的猪场群内发病率和病死率最高,分别为63.55%和66.75%;从生长阶段(用途)看,以哺乳仔猪的发病率和病死率最高,分别为47.74%和61.11%;免疫率高、生物安全措施好的场发病率和病死率均较低。PEDV阳性率为33.05%(78/236),PRo V阳性率为17.8%(42/236),未检测到TGEV。因此认为,广东猪群腹泻流行面广,导致猪病毒性腹泻的病原以PEDV为主,且以哺乳仔猪发病和死亡最多。; 田云孙彦伟王福广焦颖查云峰; 关键词：流行病学调查猪流行性腹泻病毒

猪流行性腹泻病毒COE蛋白原核表达及其反应原性的初步鉴定: 2016年; 为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的优势抗原表位COE可溶性原核表达及其反应原性,试验采用RT-PCR方法扩增出COE基因,将其克隆至原核表达载体p MAL-C5X上,构建重组质粒p MAL-C5X-COE,经测序鉴定正确后转化Rosetta感受态细胞,并进行IPTG诱导表达和Westernblot验证。结果表明:重组菌p MAL-C5X-COE表达的融合蛋白MBP-COE的分子质量约为57 ku,优化的诱导条件为IPTG浓度0.8 mmol/L、诱导时间4 h,诱导温度30℃,重组蛋白以可溶性蛋白形式存在于菌体中,融合蛋白与兔抗PEDV多克隆抗血清发生特异的免疫印迹反应。说明原核表达的COE融合蛋白可溶且具有良好的反应原性。; 孙彦阔汪志冯嘉萍石庆伟罗勇峰秦锋白小磊张桂红; 关键词：S基因逆转录PCR

多重PCR检测副猪嗜血杆菌毒力相关三聚自转运蛋白: 2015年; 为建立快速检测副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)毒力相关三聚自转运蛋白(Trimeric autotransporters,Vta A)的多重PCR方法,根据HPS Vta A Vta A1和Vta A3基因为模板,设计合成了2对特异性引物,进行多重PCR扩增及反应条件的优化,并对多重PCR扩增的敏感性和特异性进行了分析.结果表明:所建立的多重PCR检测方法对HPS Vta A1和Vta A3基因分别能扩增出406和291 bp的目的条带,最小检测限为3.4×107cfu/m L;此多重PCR方法只能检出HPS Vta A1和Vta A3基因400和300 bp大小的目的条带,而不能检出胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonella suipestifer)、大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)、支气管败血波氏杆菌(Brodetella bronchiseptica)和猪链球菌(Streptococcus suis).由此证明,所建立的多重PCR方法操作简单、快速、特异性强和敏感性高,能够实现对HPS的快速诊断与检测.; 陈汉锶李春玲郭海翔邹创智宋帅李淼臧莹安; 关键词：VTA A基因

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广东省科技计划工业攻关项目(2012A020200014)