国家自然科学基金(31071787)
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
- 相关作者：赖钟雄赖呈纯林玉玲姜顺日方智振更多>>
- 相关机构：福建农林大学福建省农业科学院漳州城市职业学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金福建省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 龙眼胚性愈伤组织DlGRAS4与DlGRAS54基因的克隆及表达分析被引量：7
- 2014年
- 以龙眼松散型胚性愈伤组织为实验材料,采用RT-PCR结合RACE法,克隆了植物特异转录调控因子DlGRAS4和DlGRAS54的cDNA全长序列和DNA序列,并进行生物信息学以及表达分析。结果表明:DlGRAS4全长1 668bp,开放阅读框(ORF)1 296bp,编码431个氨基酸(GenBank登录号:KC127683);DlGRAS54全长2 113bp,ORF 1 659bp,编码552个氨基酸(GenBank登录号:KC127684);DlGRAS54的DNA序列在5′-UTR含有1个1 533bp的内含子。生物信息学分析表明:DlGRAS4和GRAS54是不稳定亲水蛋白,不含信号肽,具有跨膜结构和GRAS家族的保守结构域,亚细胞定位于细胞膜中;与毛果杨、葡萄、蓖麻和可可等具有较高的同源性。系统进化树分析显示,DlGRAS54与拟南芥AtPAT1、葡萄VvPAT1、毛果杨PtPAT1、大豆GmPAT1处于同一分枝;DlGRAS4与拟南芥AtSCL23、玉米ZmSCL23处于同一分枝。推测DlGRAS4和DlGRAS54是GRAS基因家族的成员。qPCR结果表明,DlGRAS4在整个发育阶段转录水平呈"W"型变化趋势,在球形胚和子叶形胚阶段的表达量达最大值;DlGRAS54在整个发育阶段的转录水平呈"M"型变化趋势,在球形胚和鱼雷形胚阶段表达量达最大值,表明DlGRAS4和DlGRAS54主要在发育的中晚期起作用。外源赤霉素处理后DlGRAS4和DlGRAS54的表达量明显上调,说明DlGRAS4和DlGRAS54对赤霉素处理能做出积极的反应。
- 陈裕坤林玉玲田奇琳林丽霞赖瑞联赖钟雄
- 关键词：龙眼体细胞胚胎发生GRAS生物信息学实时荧光定量PCR
- 龙眼胚性愈伤组织限制生长中淀粉含量的变化
- 2013年
- 试验以限制生长保存的龙眼胚性愈伤组织为材料,测定了3个龙眼品种红核子、松风本、苗翘在4种不同培养基中限制生长保存过程中淀粉含量变化。研究结果表明:龙眼不同基因型以及不同培养基限制生长保存过程中,淀粉含量变化都有所不同。红核子在A、B、C培养基中出现2次积累高峰,在D培养基出现3次积累高峰;苗翘在A、B培养基中出现2次积累高峰,C、D培养基中出现3次积累高峰;松风本在A、D培养基中只有1次积累高峰,而在B、C培养基中有2次积累高峰。
- 林秀莲张新英赖钟雄
- 关键词：龙眼胚性愈伤组织限制生长保存淀粉含量
- 龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-4的克隆与表达分析被引量：1
- 2012年
- 以龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性培养物为材料,采用简并引物结合RACE方法分离得到龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-4的cDNA全长序列,全长为1 061 bp,由735个核苷酸组成的开放阅读框,编码244个氨基酸(GenBank登录号为GQ443758)。采用生物信息学方法分析,发现该基因推导的蛋白分子量为28 576 ku,pI为9.96;该蛋白为60S Ribosomal protein L30蛋白质家族成员中的L7蛋白,是一个具有核糖体蛋白L30信号位点和1个典型的Ribosomal L30 like superfamily组件,无典型信号肽结构,无跨膜螺旋的亲水性蛋白;α螺旋是该蛋白最大量的结构元件,散布于整个蛋白质中。实时荧光定量PCR分析结果显示,DlUP-4基因在龙眼体胚发生过程中均有表达,其表达水平的趋势呈"M"形,其中2个高峰出现在不完全胚性紧实结构阶段和鱼雷形胚阶段,而球形胚阶段最低。该研究结果对DlUP-4基因在龙眼体胚发生过程中的作用有了一个初步的认识,其在龙眼体胚发生过程中,在调控体胚发生的启动、细胞的极化、细胞的增殖等方面可能有重要的功能,这为进一步研究该基因在龙眼体胚发生过程中的功能奠定了基础。
- 赖呈纯林玉玲赖钟雄
- 关键词：龙眼体胚基因克隆基因表达
- 龙眼体细胞胚发生中期的蛋白质组学研究被引量：8
- 2011年
- 【目的】了解龙眼体细胞胚发生中期(球形胚至子叶形胚)蛋白质组的变化,为进一步阐明植物体细胞胚发生的机制提供依据。【方法】进行龙眼体细胞胚发生中期的同步化调控,采用双向电泳和质谱对龙眼体细胞胚发生中期的蛋白质组变化进行分析。【结果】龙眼体细胞胚发生中期表达蛋白的种类随着体细胞胚的发育逐渐减少,但在鱼雷形胚阶段其种类数量有所回升,且增加的蛋白分子质量小于66.0 kD,pI主要集中在5.00—7.00。成功鉴定了35个差异蛋白,发现了多个与体细胞胚发生密切相关的蛋白。1/2以上的蛋白与代谢途径有关,多个蛋白与氧化胁迫有关。RAN2和GTPase ObgE在龙眼体细胞胚发生中期发生了活跃的变化。【结论】随着体细胞胚的发育,细胞不断分化,体细胞胚中表达的蛋白种类减少。氧化胁迫相关蛋白、RAN2和GTPase ObgE与龙眼体细胞胚发生的调控有关。
- 方智振赖钟雄赖呈纯姜顺日
- 关键词：龙眼体细胞胚发生蛋白质组学
- 不同光照条件下龙眼体胚发生过程中过氧化物酶同工酶酶谱分析被引量：1
- 2011年
- 试验以龙眼胚性愈伤组织为材料,研究不同光照条件对龙眼体细胞胚胎发生各阶段过氧化物酶(POD)同工酶的影响。结果表明:龙眼体细胞胚胎发生各阶段过氧化物酶(POD)同工酶出现了很大的变化。酶带数量总的变化趋势是胚性愈伤组织谱带条数较少,球形胚发生过程中增多,到了子叶形胚后谱带条数又减少;不同光照条件下,蓝光的谱带条数最多,说明不同光照条件对龙眼体细胞胚胎发生有不同效应,意味着蓝光条件下体细胞胚胎内物质代谢是最活跃的,蓝光对体细胞胚胎生长有促进作用。
- 林小苹赖钟雄
- 关键词：龙眼体细胞胚胎发生光质同工酶酶谱
- 龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-5的克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达
- 2012年
- 以龙眼体胚发生早期的胚性培养物为材料,通过简并引物结合PCR进行cDNA末端快速克隆(RACE)的技术,克隆到了龙眼体胚相关未知蛋白基因DlUP-5全长序列,其cDNA全长为887 bp,由681个核苷酸组成的开放阅读框,编码226个氨基酸(GenBank登陆号为GQ443759).该基因推导的蛋白分子质量为24511.9 u,理论等电点pI为9.65;该蛋白是Frigi-da-like蛋白质家族成员,是一个具有Frigida组件,无典型信号肽结构,无跨膜螺旋的亲水性蛋白;不规则卷曲是其最大量的结构元件,并且主要集中在C端区域.实时荧光定量PCR分析结果显示,该基因在龙眼体胚发生过程中均有表达,呈"N"形趋势,其中以不完全胚性紧实结构阶段最高,而鱼雷形胚阶段表达量最低;方差分析表明,鱼雷形胚阶段DlUP-5基因表达量与其他7个阶段存在极显著差异.该研究结果对DlUP-5基因在龙眼体胚发生过程中的作用有了一个初步的认识,其在龙眼胚性愈伤组织胚胎发生能力、早期体胚正常发育和体胚成熟过程等方面可能起重要作用.
- 赖呈纯林玉玲赖钟雄
- 关键词：龙眼体胚基因克隆实时荧光定量
