安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2012A113)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：江彤李祥宇何志龙谢朝阳夏伟伟更多>>
- 相关机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 草莓镶脉病毒ORF Ⅵ基因的原核表达与抗血清制备被引量：4
- 2013年
- 为了分析草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)ORFⅥ基因的功能,采用原核表达技术获得该基因表达的重组蛋白并制备其抗血清。利用PCR技术扩增得到SVBV中国分离物的ORFⅥ基因,将此基因克隆到原核表达载体pET-SUMO上,获得重组质粒pET-SUMO-ORFⅥ。转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导与Ni2+-NTA亲和柱纯化,获得分子质量约为90 kD的重组蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔制备抗血清,采用间接ELISA和Western blot方法测定抗血清的效价、反应灵敏度以及ORFⅥ基因在本氏烟中的瞬时表达。结果显示,间接ELISA法测定抗血清对重组蛋白的效价达1∶256 000,Western blot法能够检测到稀释64 000倍的重组蛋白。利用稀释2000倍的抗血清,仍能够检测出SVBV中国分离物和美国分离物ORFⅥ基因在本氏烟中瞬时表达的蛋白。
- 江彤谢朝阳丁菲李祥宇贾琳
- 关键词：草莓镶脉病毒ORF原核表达抗血清
- 草莓镶脉病毒编码的P6蛋白是RNA沉默抑制子
- 基因沉默是植物依赖核酸序列特异性互作降解外源RNA来抵御病毒入侵的防御机制，许多植物病毒针对这种机制进化出一种反防御机制，编码不同的沉默抑制子来抑制基因沉默的发生.本研究系统鉴定了草莓镶脉病毒(SVBV)编码的P6蛋白功...
- 谢朝阳蒋磊江彤
- 关键词：草莓镶脉病毒RNA沉默抑制子基因沉默
- 南方水稻黑条矮缩病毒安徽分离物全基因组序列测定及分析
- 南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)是近年发现为害水稻的一种新病毒,能引起水稻植株矮缩、高位分蘖、倒生根、抽穗量少等症状,导致水稻减产甚至绝...
- 李祥宇闫德龙郑兆阳刘家成陈莉丁克坚江彤
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒全基因组序列
- 草莓镶脉病毒启动子鉴定
- 启动子是基因表达调控的重要元件,它能够启动下游基因的转录,CaMV 35S启动子是植物基因工程中最为常用的启动子.草莓镶脉病毒(SVBV)和花椰菜花叶病毒(CaMV)同属于花椰菜花叶病毒属,有关SVBV启动子的研究,国内...
- 杨友志李瑞江彤
- 关键词：草莓镶脉病毒启动子活性分析
- 侵染安徽玉米的水稻黑条矮缩病毒全基因组特征被引量：1
- 2015年
- [目的]测定水稻黑条矮缩病毒（Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV）安徽分离物全基因组序列,分析RBSDV安徽分离物与RBSDV其他分离物以及斐济病毒属（Fijivirus）其他成员之间的分子差异,为明确RBSDV遗传变异与进化规律提供重要信息.[方法]采用RT-PCR法从安徽玉米粗缩病样本中扩增RBSDV的全基因组,克隆、测序并进行序列分析.[结果]获得RBSDV安徽分离物全基因组序列.序列比对发现,RBSDV安徽分离物与其他RBSDV各个分离物S1到S10的序列相似性较高,为87.6%-99.5%,其中与RBSDV韩国分离物（RBSDV-KOR）序列相似性最高,达94.6%-99.5%;从构建的系统关系树也可以看出,RBSDV安徽分离物和其他所有RBSDV分离物均聚成一个单独的分支.[结论]RBSDV各分离物之间亲缘关系很近.RBSDV安徽分离物与RBSDV-KOR亲缘关系最近,可能起源于相同的祖先.另外,推测RBSDV各个基因组片段可能是协同进化的.
- 江彤何志龙李祥宇张享享
- 关键词：水稻黑条矮缩病毒全基因组
- 南方水稻黑条矮缩病毒安徽分离物S7片段的克隆及其S7-1基因编码蛋白的原核表达被引量：2
- 2017年
- 为探讨南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的种群变异并获得S7-1原核表达蛋白,采用RT-PCR技术扩增SRBSDV安徽分离物S7片段,并进行克隆、测序及序列分析,再利用特异性引物扩增该分离物S7-1基因并克隆到原核表达载体p ET-GST上,重组质粒p ET-S7-1转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导及Ni^(2+)-NTA亲和柱纯化融合蛋白,再进行Western blot检测。结果显示,SRBSDV安徽分离物S7片段与其它SRBSDV各个分离物S7片段的序列相似性极高,达99.3%~99.9%,而与斐济病毒属Fijivirus其它种之间的序列相似性较低,为35.5%~73.3%。SRBSDV安徽分离物与其它SRBSDV各个分离物聚成1个单独的分支,彼此间亲缘关系较近。试验获得了分子质量约为68 k D的S7-1融合蛋白,且GST单抗能够与S7-1融合蛋白发生特异性反应,表明本研究得到的融合蛋白确为靶标蛋白。
- 江彤何志龙张享享夏伟伟李祥宇
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒克隆原核表达
