国家高技术研究发展计划(2005AA206130)
- 作品数：14 被引量：42H指数：4
- 相关作者：石德顺黄雅琼杨素芳谭世俭陈玉更多>>
- 相关机构：广西大学广西壮族自治区妇幼保健院新疆畜牧科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金广西青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 利用PCR技术筛选微卫星标记及其应用被引量：1
- 2007年
- 微卫星DNA具有分布广泛、高度多肽性、保守性等特点,已广泛应用于遗传连锁图谱、种群进化、法医科学和人类疾病的鉴别诊断等领域,通过研究微卫星DNA突变机制,可以确定微卫星DNA在真核基因组的排列形态及其相应的生物学特性。其中,利用PCR技术快速筛选微卫星,可以提高微卫星突变分析和多肽性分析的灵敏度和准确性。
- 崔奎青李秀林石德顺
- 关键词：微卫星DNA突变PCR技术
- SYBR Green实时荧光定量PCR检测水牛体细胞组蛋白乙酰化相关基因mRNA表达被引量：9
- 2009年
- 以检测水牛成纤维细胞中组蛋白乙酰转移酶(HAT1)和脱乙酰化酶(HDAC1)转录活性为例,对SYBRGreen实时荧光定量PCR技术平台的建立进行了探讨。结果显示,适宜的引物,高质量RNA反转录得到的cDNA以及合适的PCR体系为SYBR Green实时荧光定量PCR能否成功的关键因素。本试验中3对引物的灵敏度高,其反应性能完全满足SYBR Green实时荧光定量PCR的要求。2个目的基因HAT1、HDAC1的扩增效率与参照基因H2A接近,试验结果可用2-△△Ct计算法进行分析。当cDNA模板量为0.5μL(相当于总RNA 50 ng),引物为1μmol/L时,SYBR Green实时荧光定量PCR能高效获得特异性强的目的产物。
- 罗婵王志强公方强石德顺
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 抗冻剂对水牛卵母细胞冷冻后孤雌发育的影响被引量：1
- 2009年
- 试验主要探索了不同抗冻剂组合对水牛MⅡ期卵母细胞冷冻-解冻后孤雌发育潜力的影响.通过对3种抗冻剂组合(Ⅰ:20%乙二醇(EG)+20%二甲基亚砜(DMSO);Ⅱ:20%EG+20%1,2-丙二醇(PROH);Ⅲ:20%EG+20%PROH+10%DMSO)的毒性试验,发现试验组的形态正常率均低于对照组(p<0.05),但Ⅰ组的分裂率、8-细胞率和囊胚率与对照组无显著差异(p>0.05).并以抗冻剂Ⅰ组做冷冻液,探讨了解冻液中蔗糖梯度浓度(A:0.5,0.25,0.10mol/L与B:0.62,0.42,0.31mol/L)对卵母细胞冷冻-解冻效果的影响.B组的形态正常率显著高于A组(p<0.05),且B组的分裂率和囊胚率与对照组无显著差异(p>0.05).最后比较了3种抗冻剂组合对卵母细胞冷冻-解冻后的孤雌激活发育效果.3组的形态正常率、分裂率和8-细胞率之间无显著差异(p>0.05),但均显著低于对照组(p<0.05),其中Ⅰ组的囊胚率与Ⅱ、Ⅲ组及对照组差异均不显著(p>0.05),Ⅱ组和Ⅲ组的囊胚率显著低于对照组(p<0.05).结果表明:采用抗冻剂组合Ⅰ冷冻水牛MⅡ期卵母细胞,解冻时采用B组解冻液去除抗冻剂,可以取得较好的冷冻保存效果.
- 杨素芳陈玉冯贵雪王晓丽陈自洪石德顺
- 关键词：水牛卵母细胞玻璃化冷冻抗冻剂孤雌激活
- 猪核移植供体细胞的分离培养及传代的研究
- 2006年
- 通过对猪的卵丘细胞和胎儿成纤维细胞的分离、培养和传代的研究，摸索出一套猪体细胞的分离、培养和传代的方法，建立了猪的供体细胞系。研究结果表明：猪的卵丘细胞单层的生长需要5～6d；运用组织块法和酶消化法获得胎儿成纤维细胞，组织块法单层的生长需要10～11d，酶消化法需要8～9d。猪的卵丘细胞和胎儿成纤维细胞均可以建立并获得稳定的细胞系，这些供体细胞培养方法的应用可为猪体细胞核移植研究提供丰富的供体细胞材料来源。
- 黄雅琼石德顺谭世俭陆凤花王晓丽苏文昌
- 关键词：供体细胞传代培养
- 3种玻璃化冷冻液对水牛MII期卵母细胞冷冻-解冻后体外发育的影响被引量：3
- 2009年
- 本试验主要探索了3种玻璃化冷冻液对水牛MII期卵母细胞冷冻-解冻后体外发育的影响。水牛MII期卵母细胞经3组玻璃化冷冻液(Ⅰ:20%乙二醇(EG)+20%二甲基亚砜(DMSO);Ⅱ:20%EG+20%丙二醇(PROH);Ⅲ:20%EG+20%PROH+10%DMSO)毒性试验后,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组体外受精的分裂率、8-细胞率和囊胚率之间差异不显著(P>0.05),分裂率均显著低于对照组(P<0.05),但Ⅱ组8-细胞以后的发育潜力跟对照组无显著差异(P>0.05)。进一步比较了3组玻璃化冷冻液对卵母细胞的玻璃化冷冻效果。卵子解冻后进行体外受精后,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的发育潜力均显著低于对照组(P<0.05),各组的8-细胞率和囊胚率之间无显著差异(P>0.05),但Ⅱ组卵裂率明显高于Ⅰ组(24.8±4.6%vs12.7±1.5%,P<0.05)。结果表明,3种冷冻玻璃化保护液均可用于冷冻水牛MII期卵母细胞,其中Ⅱ组处理的卵母细胞体外受精效果相对较好。
- 杨素芳陈玉冯贵雪王晓丽吴正三石德顺
- 关键词：水牛卵母细胞体外受精
- 反向核移植在水牛体细胞核移植中的初步研究
- 2010年
- 探讨了反向核移植技术应用在水牛体细胞核移植中的效果。结果显示,反向核移植可支持重构胚发育到囊胚,但其构建重构胚的效率极显著低于电融合法(54.0%vs75.1%,P<0.01),囊胚发育率也显著低于电融合法(6.9%vs15.9%,P<0.05)。
- 杨素芳陈自洪谢英王健韦精卫石德顺
- 关键词：水牛体细胞核移植
- B超诊断技术在母牛繁殖生产和胚胎移植工作中的应用被引量：4
- 2007年
- 黄雅琼石德顺陈静波谭世俭张震
- 关键词：B超诊断仪畜牧生产胚胎移植母牛生殖系统
- 猪卵母细胞的皮质颗粒与多精受精
- 2006年
- 猪卵母细胞的体外成熟（IVM）和体外受精（IVF）是进行体外生产胚胎（IVP）的重要方法。多精受精常会导致早期胚胎死亡。严重影响着猪胚的IVP技术。受精时皮质颗粒（CGs）中酶的释放使透明带（ZP）上的蛋白分子进行修饰，从而可阻止猪卵的多精受精。
- 舒金辉李秀林卞桂华石德顺
- 关键词：多精受精皮质颗粒
- 动物克隆技术的研究进展、存在问题及应用前景被引量：7
- 2008年
- 本文全面综述了动物克隆技术及其原理、研究进展以及存在的问题,并对克隆技术在相关领域蕴藏的巨大应用价值及发展前景进行了展望。
- 黄雅琼杨素芳农微王锦刘畅谭世俭石德顺
- 关键词：动物克隆技术发育调控
- 磷酸二酯酶抑制剂对水牛卵母细胞减数分裂成熟的影响被引量：2
- 2008年
- 本研究探讨了磷酸二酯酶抑制剂米力农(milrinone)对水牛卵母细胞体外自发成熟和促性腺激素诱导成熟的影响,以便提高卵母细胞体外成熟质量。试验对水牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)培养不同时间或采取不同处理后,取出卵母细胞剥光后固定,然后用间苯二酚蓝染色,观察卵母细胞核成熟情况。结果表明:(1)Milrinone对水牛COCs的自发成熟具有抑制作用,且具有剂量依赖关系;(2)Milrinone对水牛卵母细胞体外自发成熟的抑制作用随培养时间的延长没有减弱,可作为水牛卵母细胞成熟过程中的核成熟抑制剂;(3)Milrinone能显著抑制促卵泡激素(FSH)诱导的水牛COCs体外成熟,但是随着时间的延长,这种抑制作用可以部分被FSH克服。
- 卞桂华黄雅琼杨娟陆凤花石德顺
- 关键词：水牛卵母细胞米力农
