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广东省博士启动基金(05301075)
作品数:
1
被引量:3
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相关作者:
梁斌
杜昆
宋旭红
黄东阳
刘戈飞
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广东省博士启动基金
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2006
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辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶的表达与多克隆抗体制备
被引量:3
2006年
目的制备辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)多克隆抗体。方法应用大肠杆菌BL21-AI表达NRDR,制备NRDR包涵体,使用从SDS-PAGE凝胶中回收的重组NRDR作为免疫原,采用肩胛骨下注射作为免疫途径免疫兔。斑点杂交测定抗血清效价,HiTrapProteinG柱纯化兔IgG,免疫印迹鉴定抗体特异性。结果BL21-AI对NRDR进行了高效表达。回收的NRDR蛋白溶液的浓度为0.36mg/ml,回收率为48.5%。所有免疫的动物在第2次追加免疫之后都产生了高效价的抗血清,血清的效价是1∶500,检测极限是8ngNRDR蛋白。纯化后的NRDR抗体具有较高的免疫活性和特异性。结论建立了高效制备辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶多克隆抗体的方法。
刘戈飞
宋旭红
梁斌
杜昆
黄东阳
关键词:
基因表达
多克隆抗体
免疫
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