国家自然科学基金(30572407)
- 作品数：13 被引量：103H指数：8
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- 视网膜Müller细胞与谷氨酸代谢
- 2010年
- 视网膜Mller细胞作为重要的星形胶质细胞,在维持视网膜正常功能方面具有重要的作用,在病理状态下也可以通过蛋白表达、反应性胶质增生、谷氨酸(glutamate,Glu)转运体的表达、谷氨酰胺合成酶的改变和分泌神经营养因子等途径对Glu代谢进行干预,从而起到保护视网膜神经元免受Glu神经性毒性损伤的作用。
- 李芳梅谢学军
- 关键词：谷氨酸
- 缺氧实验模型研究进展被引量：26
- 2007年
- 缺氧为临床各科疾病的最常见的直接因素或主要病理过程之一,建立理想的缺氧模型对研究缺氧病理与治疗十分重要。对近10年来缺氧实验模型的建立方法、原理及模型的优缺点等研究进展进行综述,反映这一专题的最新水平与进展,为以后的临床与科研提供参考依据。
- 马殿伟谢学军李晓微
- 关键词：缺氧病理
- 补肾活血中药血清对高糖条件下纯化培养的视网膜神经节细胞Glu释放量的影响被引量：10
- 2010年
- 目的探讨稳定高糖及糖波动条件对体外纯化培养的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)谷氨酸(glutamate,Glu)释放量的影响,以及补肾活血中药的干预作用。方法采用抗体联合两步纯化法培养新生Sprague-Dawley(SD)大鼠RGCs,将其分别置于模拟正常条件、稳定高糖条件及糖波动条件下进行培养,并以补肾活血中药复方含药血清进行干预。实验分为正常对照组、正常中药干预组,稳定高糖组、稳定高糖中药干预组、糖波动组、糖波动中药干预组;分别在试验干预24、48、72h后,用全自动氨基酸分析仪测定各组细胞外液中Glu的含量(mg/L),采用SPSS13.0软件对所得数据进行统计学分析。结果糖波动组24h时RGCs的Glu释放量[(256.33±25.73)mg/L]较同期正常对照组[(134.22±9.14)mg/L]及稳定高糖组[(141.17±22.13)mg/L]均明显增加(P<0.05)。正常中药干预组的Glu释放量在24h[(124.50±10.30)mg/L]及72h[(30.17±2.97)mg/L]时段均较正常对照组降低(P<0.05);稳定高糖中药干预组24h[(127.50±16.94)mg/L]、48h[(26.17±3.99)mg/L]及72h[(27.67±3.49)mg/L]时段的Glu释放量均较稳定高糖组降低(P<0.05);糖波动中药干预组RGCs的Glu释放量在24h[(228.33±18.41)mg/L]、72h[(28.00±2.41)mg/L]均较糖波动组降低(P<0.05)。结论糖波动条件能明显增加RGCs的Glu释放量,导致大量Glu在细胞外聚积,细胞外高浓度Glu聚积最终引发RGCs神经兴奋性毒性,加剧细胞损害;补肾活血中药能在一定程度降低稳定高糖及糖波动条件下RGCs的Glu释放量,减轻Glu神经兴奋性毒性作用对RGCs的损伤,这可能是补肾活血中药防治糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DRP)的药物干预途径之一。
- 马荣谢学军万李马殿伟米珍
- 关键词：高糖视网膜神经节细胞补肾活血
- 补肾活血剂对高糖和(或)缺氧状态下视网膜神经节细胞活力及谷氨酰胺合成酶活性的影响被引量：10
- 2014年
- 目的观察补肾活血中药对高糖和(或)缺氧状态下体外共同培养的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)和Müller细胞活力以及谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)的影响,并对其作用机制进行探讨。方法以中药血清药理学方法获得补肾活血复方中药含药血清。建立RGC与视网膜Müller细胞共同培养模型,在体外共同培养细胞的培养液中加入葡萄糖(终浓度为50 mmol·L-1)/连二亚硫酸钠(终浓度为1.0 mmol·L-1)造成细胞高糖(缺氧)模型(高糖/缺氧组),仅加入终浓度为50 mmol·L-1葡萄糖造成细胞高糖模型(高糖组),仅加入终浓度为1.0 mmol·L-1连二亚硫酸钠造成细胞缺氧模型(缺氧组);在此基础上加入体积分数20%中药含药血清进行中药血清干预。在实验干预24 h、48 h及72 h 3个时间段分别以酶联免疫吸附法(ELISA)测定体外共同培养细胞外液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出量和GS活性。结果高糖组、缺氧组及高糖/缺氧组共同培养的细胞LDH漏出量在24 h、72 h比正常对照组均明显增加(均为P<0.05),缺氧组视网膜Müller细胞GS活性在48 h比正常对照组明显降低(P<0.05);高糖组视网膜Müller细胞GS活性在24 h、48 h和72 h三个时间点均比正常对照组增高(均为P<0.05),补肾活血中药血清能够增加缺氧条件下及高糖缺氧条件下视网膜Müller细胞GS活性,并且该作用随着时间的延长其作用逐渐加强。结论补肾活血中药血清可能通过降低高糖和(或)缺氧状态下共同培养的RGC与Müller细胞细胞膜的通透性,提高细胞活力。同时提高视网膜Müller细胞和RGC共同培养时视网膜Müller细胞GS活性,转化Glu,减轻Glu的兴奋性毒性,从而起到细胞保护作用。
- 马殿伟谢学军张梅万李
- 关键词：高糖缺氧视网膜神经节细胞
- 补肾活血剂对TGF-β_2干预缺氧状态下视网膜Müller细胞谷氨酸代谢的影响被引量：2
- 2013年
- 目的应用血清药理学方法探讨补肾活血中药对体外培养的视网膜Müller细胞在缺氧及转化生长因子-β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)干预下谷氨酸(glutamate,Glu)代谢的影响。方法取新生7 d SD大鼠5只,颈椎脱位处死后进行视网膜Müller细胞培养。根据[3H]标记的D,L-Glu摄入量判断体外培养第2代视网膜Müller细胞的Glu的摄入功能;以酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定体外培养细胞外液中谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)活性。结果与正常对照组比较,12 h、24 h、48 h时缺氧组、TGF-β2+缺氧组的Glu摄入量增加(均为P<0.05),而24 h、48h时GS活性明显下降(均为P<0.05);与缺氧组比较,TGF-β2+缺氧组12 h、48 h时Glu摄入量减少,48 h时GS活性下降(P<0.05)。24 h、48 h时TGF-β2干预组较正常对照组Glu摄入量增加(均为P<0.05),12 h时GS活性增加(P<0.05)。与TGF-β2+缺氧组比较,中药血清+TGF-β2+缺氧组12 h、24 h时Glu摄入量减少(均为P<0.05),但GS的活性增加(均为P<0.05)。结论缺氧使视网膜Müller细胞的Glu摄入功能明显增强,GS活性明显降低,而TGF-β2加重缺氧条件下Müller细胞GS活性的降低;在缺氧和TGF-β2同时存在条件下,补肾活血中药血清下调视网膜Müller细胞的Glu摄入能力,增加GS的活性。
- 马殿伟谢学军张梅万李
- 关键词：补肾活血转化生长因子-Β2缺氧视网膜MÜLLER细胞谷氨酸谷氨酰胺合成酶
- 补肾活血法对Müller细胞谷氨酸摄取功能的影响被引量：27
- 2008年
- 目的探讨补肾活血中药含药血清对高糖条件下Müller细胞谷氨酸(Glutamate,Glu)摄取功能的影响。方法以改良酶消化法体外培养大鼠Müller细胞;根据[3H]标记的D,L-Glu摄入量判断Müller细胞的Glu摄取功能。结果在高糖条件下Müller细胞的Glu摄取功能一过性提高,随时间推移其对Glu的摄取功能又明显下降;中药含药血清对正常条件下Müller细胞Glu摄取功能的提高在用药后24小时时段最为明显,对高糖条件下Müller细胞Glu摄取功能的提高在用药后48小时时段最为明显。结论高糖条件所引起的Müller细胞糖酵解在短时间内旺盛可能是Müller细胞Glu摄取功能一过性提高的原因之一;Müller细胞对短期高糖条件可能有一定耐受性,持续的高糖最终会导致Müller细胞的损伤;中药含药血清可减轻高糖条件下Müller细胞Glu摄取功能的下降,这可能是补肾活血法防治糖尿病视网膜病变的干预途径之一。
- 谢学军李芳梅张梅马殿伟李晓微马荣万李
- 关键词：补肾活血法MÜLLER细胞谷氨酸
- 补肾活血法对TGF-β2干预缺氧状态下视网膜Müller细胞活力的影响
- 目的:探讨补肾活血中药含药血清对体外培养的视网膜Müller细胞在缺氧及转化生长因子β(TGF-β)干预下的细胞活力的影响。方法:以改进良酶消化法体外培养大鼠Müller细胞;以中药血清药理学方法获得补肾活血中药复方含药...
- 谢学军马殿伟李晓微马荣万李
- 文献传递
- 葛根血中移行成分高效液相色谱分析被引量：18
- 2008年
- 目的:对常用中药材葛根进行血清药物化学研究,为筛选确定葛根的药效成分奠定基础。方法:在建立葛根高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱的基础上,通过比较葛根甲醇提取物、葛根含药血清和空白血清的HPLC指纹图谱,确定葛根血中移行成分。结果:在葛根含药血清中发现了4个入血成分,其中两个为原型成分(其中一个为葛根素),其余两个可能为原型成分的代谢产物。结论:4个入血成分可能成为葛根的体内直接作用物质,对其进行深入的研究,将有助于阐明葛根的药效物质基础及药效机制。
- 张梅邱丰谢学军刘静陈潇
- 关键词：HPLC指纹图谱血清药物化学
- 补肾活血中药血清对高糖状态下纯化培养的视网膜神经节细胞活力的影响被引量：12
- 2009年
- 目的探讨补肾活血中药血清对体外高糖状态下纯化培养的视网膜神经节细胞活力的影响。方法体外纯化SD大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs),模拟稳定高糖(50mmol/L)及糖波动环境进行培养,以补肾活血中药血清进行干预,检测RGCs乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出量,以推测RGCs活力。结果RGCs的LDH漏出量(U/L)稳定高糖组24h(1349.17±215.50)、48h(1220.24±124.53)及72h(1982.14±219.03)均较正常对照组(1628.10±122.10、1484.13±127.55及2155.75±140.44)降低(P<0.05);而糖波动组的LDH漏出量在72h(2299.60±88.35)较正常对照组增加(P<0.05),且糖波动组各时段的LDH漏出量均较稳定高糖组增加(P<0.05);稳定高糖中药干预组的LDH漏出量在72h(1797.62±146.40)时较稳定高糖组减少(P<0.05);糖波动中药干预组的LDH漏出量在48h(1259.92±87.74)和72h(1940.40±155.47)时均较糖波动组减少(P<0.05)。结论糖波动能明显降低RGCs细胞膜的稳定性,增加细胞膜通透性,降低细胞活力;补肾活血中药血清能降低本实验中稳定高糖及糖波动条件下RGCs的细胞膜通透性,提高细胞膜稳定性,增强其细胞活力,这可能是补肾活血中药复方防治糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DRP)的药物干预途径之一。
- 马荣谢学军万李马殿伟
- 关键词：高糖视网膜神经节细胞补肾活血
- 补肾活血中药对TGF-β_2及高糖状态下体外培养的视网膜Müller细胞活力的影响被引量：9
- 2010年
- 目的探讨高糖及转化生长因子-β2(Transforming growth factor,TGF-β2)和高糖同时存在条件对体外培养的Müller细胞活力的影响,以及补肾活血中药的干预作用。方法以改良酶消化法体外培养大鼠Müller细胞,将P3细胞分别置于模拟正常、高糖、TGF-β2及TGF-β2和高糖同时存在条件下进行培养,并以补肾活血中药复方含药血清进行干预。实验分为正常对照组、TGF-β2组、高糖组、TGF-β2+高糖组、正常中药干预组、TGF-β2+高糖中药干预组;分别在试验干预12h、24h及48h后,以490型酶标仪测定各组细胞外液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的漏出量。结果 TGF-β2组和高糖组12h和24h的LDH漏出量与正常对照组比较均无明显差异(P>0.05),但48h的LDH漏出量均较正常对照组增多(P<0.05);TGF-β2组24h的LDH漏出量较高糖组增多(P<0.05);TGF-β2+高糖组24h和48h的LDH漏出量均较TGF-β2组减少(P<0.05);TGF-β2+高糖组48h的LDH漏出量较高糖组减少(P<0.05);补肾活血中药血清能降低24h时TGF-β2和高糖同时存在条件下LDH的漏出量,降低各时段正常条件下的LDH漏出量(P<0.05)。结论 Müller细胞对短期高糖状态以及浓度为150pg/ml的TGF-β2短期干预可能有一定的耐受性,但当高糖(50mol/l)以及TGF-β2(150pg/ml)干预48h后Müller细胞活力明显降低;补肾活血中药复方含药血清能提高正常及高糖和TGF-β2同时存在条件下视网膜Müller细胞膜的稳定性、增强Müller细胞活力可能是补肾活血中药复方防治糖尿病性视网膜病变的另一药物干预途径。
- 马殿伟谢学军李晓微李芳梅张梅马荣
- 关键词：高糖TGF-Β2MÜLLER细胞补肾活血
