山东省博士后创新项目(2006bs03050)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：邓爱军杜玮臧萍姜德咏刘君更多>>
- 相关机构：潍坊医学院附属医院更多>>
- 发文基金：山东省博士后创新项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 1-磷酸鞘氨醇对体外培养的人视网膜色素上皮细胞α-SMA表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究1-磷酸鞘氨醇对人视网膜色素上皮细胞α-平滑肌肌动蛋白表达的影响。方法对RPE细胞常规培养,取传3～4代生长良好的细胞用于实验,以10~6个/ml接种于24孔培养板中,加入含1-磷酸鞘氨醇无血清培养液,使1-磷酸鞘氨醇终浓度为1、1×10^(-1)、1×10^(-2)、1×10^(-3)、1×10^(-4)μg/ml,加入不含1-磷酸鞘氨醇的无血清培养液为对照组,采用免疫荧光法分析1-磷酸鞘氨醇对α-平滑肌肌动蛋白表达的影响。结果 1、1×10^(-1)、1×10^(-2)μgm 1-磷酸鞘氨醇组中表达α-平滑肌肌动蛋白阳性的细胞与对照组相比差异具有明显统计学意义(P=0.000、0.000、0.000);而1×10^(-3)、1×10^(-4)μg/mI组表达α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞与对照组相比差异无明显的统计学意义(P=0.832、0.781)。结论α-平滑肌肌动蛋白主要在RPE细胞的胞浆中表达。随着1-磷酸鞘氨醇浓度的增加,RPE细胞α-平滑肌肌动蛋白的表达增强。
- 孙艳刘君邓爱军
- 关键词：1-磷酸鞘氨醇Α-平滑肌肌动蛋白
- HIF-1α反义寡核苷酸体外对缺氧时视网膜血管内皮细胞HIF-1α和VEGF表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸(ASODN)治疗视网膜新生血管性疾病的可行性及机制。方法将体外培养的牛眼视网膜微血管内皮细胞(BREC)分为转染组和未转染组,转染组体外转染HIF-1α ASODN(根据GenBank提供的HIF-1αcDNA序列设计),两组均予125μmol/L的CoCl2行缺氧处理。采用免疫荧光法检测细胞HIF-1α的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF蛋白水平。结果脂质体介导的HIF-1α ASODN可成功转染BREC细胞。未转染组缺氧开始时HIF-1α有极低表达,缺氧1h时表达量显著升高,4h达到高峰,16h后下降。而转染组HIF-1α的表达始终在极低水平,两组间有显著性差异(P<0.01)。转染组从缺氧1h开始VEGF表达明显低于未转染组(P<0.01)。结论脂质体介导的HIF-1α ASODN能有效抑制BREC细胞HIF-1α的表达,从而降低细胞VEGF的表达。
- 付文琴邓爱军杜玮臧萍
- 关键词：视网膜新生血管
- 缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸对缺氧时视网膜血管内皮细胞增殖活性影响的研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸(ASODN)对缺氧时体外培养的牛眼视网膜血管内皮细胞(BREC)增殖活性的影响,探讨HIF-1αASODN治疗视网膜新生血管性疾病的可行性。方法根据Genbank提供的HIF-1αcDNA序列设计HIF-1αASODN,全硫代修饰,并用脂质体包被,体外转染BREC细胞,荧光显微镜下计算转染效率。采用免疫组织化学法检测HIF-1α的表达,采用免疫组织化学法和生物荧光法分别检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达、细胞内ATP含量以分析细胞增殖能力。结果荧光显微镜检测表明,HIF-1αASODN可成功转染BREC。免疫荧光检测显示,未转染组缺氧开始时HIF-1α有极低表达,在缺氧1h时表达量显著上升,4h达到高峰,16h后下降。而ASODN转染组HIF-1α的表达始终在极低水平,两组间差异有统计学意义(P<0.01)。PCNA免疫组织化学检测和细胞内ATP含量测定结果显示,在缺氧后各检测点ASODN转染组较对照组细胞增殖活性受到抑制,抑制作用在缺氧后8h最为明显(P<0.01)。结论 HIF-1αASODN转染能有效抑制BREC细胞HIF-1α的表达,从而降低细胞增殖活性,可能对视网膜新生血管性疾病有治疗作用。
- 邓爱军姜德咏杜玮臧萍
- 关键词：视网膜新生血管化缺氧诱导因子1,Α亚基细胞增殖
