河南省基础与前沿技术研究计划项目(072300430020)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：河南科技学院中国农业大学更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新城疫病毒F48E9株F1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2008年
- 根据GenBank中新城疫病毒(NDV)F48E9株F1基因序列和原核表达载体pET-28a的克隆位点,设计1对引物,通过PCR方法获得了F1基因;将F1双酶切产物插入原核表达载体pET-28a,得到的重组子命名为pET-F1。用IPTG进行诱导将其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行了表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,NDV F1在pET-F1中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为31 ku。表达的重组蛋白为进一步研究NDV的免疫特性和分子生物学功能奠定了基础。
- 赵坤李敬玺王选年王三虎
- 关键词：新城疫病毒克隆原核表达
- 鸡新城疫病毒Lasota株HN蛋白主要抗原表位基因在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2008年
- 用RT—PCR法从NDV Lasota疫苗株中扩增出HN基因，将其克隆到pGEM—T easy vector中，构建了重组质粒pT—HN．设计了1对引物，用PCR法扩增出HN蛋白主要抗原表位基因（442—1734bp共1239bp），将其连接到原核表达载体pET-28a（＋），构建重组质粒pET—HN．用IPTG诱导使其在大肠杆菌BL21（DE3）中表达．SDS—PAGE结果表明，NDV HN主要抗原表位基因在pET—HN中获得了高效融合表达，其表达蛋白的分子量为28kD．同时，通过试验摸索并确定了表达HN蛋白主要抗原表位基因的最佳诱导条件：IPTG终浓度为0．4mmol·L^-1，诱导时间为4h，温度为37℃．
- 赵坤王选年赵德明
- 关键词：新城疫病毒HN蛋白克隆原核表达
- 新城疫病毒单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2011年
- 将复性的重组NDVHN蛋白免疫BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤.通过ELISA筛选,获得了1株稳定分泌抗HN单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞4E11.ELISA和Western-blot结果表明,该MAb能与NDV特异性反应,而不与H9亚型AIV,IBDV,EDS76,IBV和CIAV交叉反应.利用该MAb和抗NDV多克隆抗体IgG建立了双抗体夹心ELISA.试验结果表明该DAS-ELISA检测NDV的敏感性可达8个血凝单位.
- 赵坤李任峰赵朴赵恒章常新耀
- 关键词：新城疫病毒单克隆抗体ELISA
