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膀胱移行细胞癌中整合素连接激酶的表达及意义被引量：5: 2009年; 目的检测膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)和癌旁正常膀胱组织中整合素连接激酶(ILK)蛋白和mRNA的表达,探讨其在BTCC发生、发展中的作用。方法利用免疫组织化学S-P法检测56例BTCC和30例癌旁正常膀胱组织中ILK蛋白的表达,同时运用逆转录聚合酶链反应法检测这些组织标本中ILK mRNA的表达,并与临床病理资料进行相关性分析。结果56例BTCC中,ILK蛋白阳性表达率为53.6%(30/56),ILK mRNA阳性表达率为58.9%(33/56);而30例癌旁正常膀胱组织中ILK蛋白阳性表达率为10%(3/30),ILK mRNA表达阳性率为13.3%(4/30),ILK mRNA和蛋白在癌组织和癌旁正常膀胱组织表达有显著差异(P<0.01)。临床病理资料的相关性分析显示,BTCC中,ILK mRNA和蛋白的表达分布与病理分级有相关性(P<0.05),但与临床分期无相关性(P>0.05)。结论ILK基因转录和蛋白表达可能参与BTCC的发生过程,ILK可能成为早期发现BTCC的一个肿瘤标志物和治疗BTCC的新靶点。; 蓝建华王德林杨宗珂李曾; 关键词：膀胱肿瘤整合素连接激酶免疫组织化学逆转录聚合酶链反应

肾细胞癌组织与正常组织中VEGF165b的差异表达及其意义被引量：2: 2009年; 目的:研究血管内皮生长因子165b(Vascular endothelial growth factor 165b,VEGF165b)在肾细胞癌(Renalcellcarcino-ma,RCC)组织和正常组织中的表达情况,初步探讨其与肾细胞癌发生发展的关系。方法:(1)用S-P免疫组化法检测30例肾细胞癌组织和29例正常肾组织中VEGF165b蛋白的表达情况;(2)用RT-PCR法分别检测32例肾细胞癌组织和30例正常肾组织中VEGF165b mRNA的表达情况。结果:(1)正常肾组织中VEGF165b蛋白表达率为96.55%(28/29),肾细胞癌组织中VEGF165b蛋白的表达率为20.00%(6/30),表达差异有统计学意义(P<0.05)。(2)正常肾组织中VEGF165b mRNA阳性表达率为93.33%(28/30),肾细胞癌组织中VEGF165b mRNA的阳性表达率为18.75%(6/32),具有统计学意义(P<0.05)。结论:VEGF165b在肾细胞癌组织中的表达低于正常肾组织的表达,这种表达差异可能与肾癌发生、发展的机制有关。; 姜翠苹王德林彭波; 关键词：肾肿瘤 VEGF165B 免疫组织化学

RNAi沉默整合素连接激酶基因对人膀胱癌BIU-87细胞体内成瘤的影响: 2012年; 目的:研究RNAi沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因对人膀胱癌BIU-87细胞裸鼠皮下成瘤的影响。方法:构建4条针对ILK基因的特异性miRNA干扰载体和1条阴性对照载体,并利用脂质体转染法将其转染BIU-87细胞,并筛选获得稳定转染细胞株。利用RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测抑制效果。将10只裸鼠随机分为2组,皮下分别接种转染组细胞和未转染组细胞,观察瘤体的生长情况,并于接种4周后处死裸鼠,测量其瘤体体积和重量,并将瘤体做HE染色,观察瘤体病理情况。结果:转染组细胞ILK的表达明显受到抑制,以miR-3组的抑制效率最高。裸鼠皮下成瘤实验检测发现:两组均有瘤体形成,未转染组较转染组瘤体生长快,未转染组体积平均为:289.56±36.49mm3,转染组为:56.67±4.32mm3。瘤体重量分别为:1.265±0.02 g和0.518±0.03g。转染组与未转染组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:利用RNAi技术能有效抑制靶基因ILK的表达,从而降低膀胱癌细胞的体内的增殖能力。; 何江陈亮王德林黄飚; 关键词：ILK BIU-87 裸鼠

膀胱移行细胞癌组织与正常组织中VEGF_(165)b的差异表达及其意义被引量：2: 2009年; 目的:初步探讨VEGF165b与膀胱移行细胞癌(Transitional cell carcinoma of the bladder,TCCB)发生发展的关系。方法:用S-P免疫组化法检测38例TCCB组织和36例正常膀胱组织中VEGF165b蛋白表达;以RT-PCR法检测55例TCCB组织和43例正常膀胱组织中VEGF165bmRNA表达。结果:正常膀胱组织中VEGF165b蛋白表达率为97.22%(35/36),TCCB组织中VEGF165b蛋白表达率为21.05%(8/38),表达差异有显著性(P<0.05);正常膀胱组织中VEGF165bmRNA阳性表达率为95.35%(41/43),明显高于TCCB组织中VEGF165bmRNA阳性表达率18.18%(10/55)(P<0.05);TCCB中VEGF165b蛋白和mRNA的表达与TCCB不同分期、分级间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:VEGF165b在TCCB组织中的表达明显低于正常膀胱组织中的表达,这种表达差异可能与VEGF165b抑制膀胱癌的发生、发展作用有关。; 姜翠苹王德林; 关键词：膀胱移行细胞癌 VEGF165B

姜黄素联合多烯紫杉醇诱导PC-3细胞凋亡的实验研究被引量：3: 2012年; 目的探讨姜黄素联合多烯紫杉醇对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及其作用机制。方法将体外培养的PC-3细胞分为对照组(仅加培养基)、姜黄素组(5.0μmol/L姜黄素处理)、多烯紫杉醇组(2.5nmol/L多烯紫杉醇处理)及联合组(5.0μmol/L姜黄素与2.5nmol/L多烯紫杉醇联合处理),作用24h。用流式细胞仪分析PC-3细胞凋亡率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测Bcl-2及Bax mRNA和蛋白的表达情况。结果姜黄素和多烯紫杉醇均可诱导PC-3细胞凋亡,二者联合用药组的细胞凋亡率明显高于单药组(P<0.05);RT-PCR及Western blot显示姜黄素和多烯紫杉醇都可明显下调Bcl-2mRNA和蛋白的表达率,而上调Bax mRNA和蛋白表达率,且联合组细胞Bax与Bcl-2表达的改变更明显。结论姜黄素和多烯紫杉醇可能通过下调Bcl-2,上调Bax的表达协同诱导PC-3细胞的凋亡。; 马强王德林赵修民杨军; 关键词：细胞凋亡姜黄素多烯紫杉醇 BCL-2 BAX

RNAi沉默整合素连接激酶基因表达对膀胱癌细胞BIU-87增殖的影响被引量：4: 2010年; 为了研究整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因沉默对膀胱癌BIU-87细胞系增殖产生的影响,应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,合成了4条针对ILK的miRNA干扰载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-ILK-miR(miR-1、miR-2、miR-3、miR-4)作为实验组,另设1条为阴性对照组,分别转染膀胱癌BIU-87细胞系.经杀稻瘟菌素持续压力筛选和有限稀释法培养获得稳定转染细胞株.采用RT-PCR和Western-blot检测各组对ILK基因的抑制作用,实验组miRNA对BIU-87细胞ILK mRNA和蛋白的表达均有明显的抑制作用,以miR-3组抑制效应最强.通过流式细胞术检测发现,miR-3组细胞周期G0/G1期细胞所占比例较未转染组明显增加,而S期则明显减少(P<0.05).四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测发现,转染组细胞在体外的增殖能力较对照组明显下降(P<0.05).证明RNA干扰技术能有效抑制靶基因ILK的表达,进而抑制了膀胱癌细胞系BIU-87的增殖.; 陈亮王德林黄飚; 关键词：膀胱癌稳定转染

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重庆市自然科学基金(CSTC2005BB5033)