中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-EW-G-5)
- 作品数：4 被引量：23H指数：3
- 相关作者：杜昱光黄李淑馨白凤武王晓辉张延平更多>>
- 相关机构：中国科学院中国科学院天津工业生物技术研究所中国科学院大学更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 大肠杆菌合成1,2,4-丁三醇的途径优化被引量：7
- 2016年
- 1,2,4-丁三醇(BT)是一种在工业中有多种用途的重要的非天然化合物。文中通过将外源基因xdh和mdlC导入大肠杆菌BW25113表达,并敲除了xylA、xylB、yagE、yjhH、yiaE和ycdW等木糖和中间产物代谢旁路基因,构建了能够将D-木糖转化为BT的重组菌株。为优化BT合成途径,针对BT合成途径中的限速步骤——3-脱氧-D-甘油-戊酮糖酸的脱羧反应,进行了新酶的筛选和评价,获得了可显著提高反应效率的新的2-酮酸脱羧酶——KivD,并构建了表达该酶的重组菌株BW-025。在此基础上,通过初步条件优化,将BT产量提高至2.38g/L;进一步调节途径中各个酶的表达量,探究了它们对BW-025合成BT的影响,最终获得了BT产量较BW-025提高了48.62%的重组菌株BW-074。
- 孙雷杨帆朱泰承李兴华孙红兵李寅许正宏张延平
- 关键词：D-木糖大肠杆菌
- 海洋底泥环境DNA提取与纯化方法比较研究被引量：9
- 2014年
- 为了探索有效的海洋底泥宏基因组DNA提取与纯化方法,分别采用CTAB结合SDS法、CTAB结合玻璃珠法、SDS结合蛋白酶K法和SoilMasterTM试剂盒法提取海洋底泥宏基因组DNA,用柱式腐殖酸清除试剂盒法与电洗脱法纯化宏基因组DNA,并对宏基因组DNA的产量与纯度进行评价.结果表明:SDS结合蛋白酶K法提取率最高,DNA片段完整;SoilMasterTM试剂盒法与CTAB结合SDS法次之;CTAB结合玻璃珠法有严重降解;电洗脱法可以得到高纯度、大于42kb宏基因组DNA片段.因此,SDS结合蛋白酶K法和电洗脱法提取纯化海洋近海底泥宏基因组DNA优于其他方法.
- 王晓辉黄李淑馨白凤武杜昱光
- 关键词：纯化
- 双酶偶联转化果糖制备含有稀少糖的混合糖液被引量：2
- 2014年
- 酶转化法是功能性稀少糖生产的重要途径,但单一稀少糖转化酶的转化率普遍较低。文中提出构建双酶偶联转化系统提高转化效率的思路,即利用D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-psicose 3-epimerase,DPE)和L-鼠李糖异构酶(L-rhamnose isomerase,L-RhI)双酶偶联反应,催化D-果糖生成D-阿洛酮糖和D-阿洛糖等功能性稀少糖。DPE和L-RhI加酶量的比例为1∶10,其中DPE的浓度为0.05 mg/mL;转化反应的最佳温度为60℃,最适pH为9.0。当D-果糖浓度为2%时,反应10 h达到平衡,此时D-阿洛酮糖和D-阿洛糖的产量分别为5.12和2.04 g/L。利用文中提出的双酶偶联系统可以将果葡糖浆等富含果糖的低附加值原料转化为含有功能性稀少糖的高附加值混合糖液。
- 韩文佳朱玥明柏玮何森健张同存孙媛霞
- 诱变选育以菊芋为原料高产甘露醇的乳酸菌被引量：5
- 2012年
- 以短乳杆菌为出发菌株,采用大气压冷等离子体介质阻挡放电法和离子束对乳酸菌进行诱变。以菊芋作为筛选培养基,摇瓶筛选得到高产甘露醇的菌株。之后对筛选出的高产甘露醇菌株进行遗传稳定性实验,证实该菌株遗传稳定。在5L发酵罐中进行发酵,该菌株可有效地将果糖转化为甘露醇,产率达到62%。这株诱变菌可作为高产甘露醇的优良菌株。
- 岳敏曹海龙李曙光杨凤丽张建平杜昱光
- 关键词：大气压介质阻挡放电离子束菊芋甘露醇乳酸菌
