美国中华医学基金(00-722)
- 作品数：17 被引量：126H指数：6
- 相关作者：张红英步宏郭立新杨光华刘卫平更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院四川大学南京医科大学更多>>
- 发文基金：美国中华医学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用组织芯片技术研究A103和Inhibinα在肾上腺皮质腺瘤中的表达被引量：4
- 2003年
- 目的 研究 A10 3及 Inhibinα在肾上腺皮质腺瘤中的潜在诊断价值并探讨组织芯片技术应用的可行性。方法 制备肾上腺组织芯片 ,含 79例样本 ,其中正常肾上腺 3例 ,肾上腺皮质腺瘤 66例 ,肾上腺转移癌 5例 ,嗜铬细胞瘤 5例。用免疫组织化学 Envision法检测 A10 3及 Inhibinα的表达。结果 免疫组织化学染色 A10 3阳性率分别为正常肾上腺皮质 10 0 % ( 3 / 3 ) ,肾上腺皮质腺瘤 90 .2 % ( 5 5 / 61) ,肾上腺转移癌 0 % ( 0 / 4) ,嗜铬细胞瘤0 % ( 0 / 4) ;Inhibinα在正常肾上腺皮质中 10 0 %表达 ,阳性部位主要在网状带与束状带内层 ,肾上腺皮质腺瘤阳性率 83 .6% ( 5 1/ 61) ,肾上腺转移癌 0 % ( 0 / 4) ,嗜铬细胞瘤 0 % ( 0 / 4)。结论 A10 3及
- 张红英刘卫平王晓洁李甘地郭嘉李俸媛廖殿英
- 关键词：组织芯片技术肾上腺皮质腺瘤
- 核因子κB介导丙烯醛刺激大鼠气道黏蛋白高表达被引量：5
- 2005年
- 李莉冯玉麟文富强
- 关键词：气道黏蛋白核因子ΚB丙烯醛黏液高分泌
- 转化生长因子-β/Smad信号对人横纹肌肉瘤细胞RD生长和凋亡的调控被引量：6
- 2005年
- 目的研究TGF-β/Smad信号对人胚胎性横纹肌肉瘤细胞系RD生长和凋亡的调控作用。方法采用小分子RNA干扰(RNAi)技术,以阳离子脂质体为载体,将生物合成的发夹状短链RNA(shRNA)转染RD细胞,封闭Smad4的表达以阻碍内源性TGF-β/Smad信号的转导;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot检验shRNA干扰Smad4表达的效果;采用免疫荧光化学,通过激光共聚焦显微镜检测Smad4封闭前后RD细胞中Smad2/3表达位置的变化;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)和3H-thymidine摄入实验检测阻碍内源性TGF-β/Smad信号转导和以外源性TGF-β1刺激这2种条件下RD细胞的生长状况;采用流式细胞术和荧光化学染色检测上述2种条件下RD细胞的凋亡情况。结果RNAi技术可有效封闭RD细胞中Smad4mRNA和蛋白的表达;Smad4的封闭导致Smad2/3由胞质入核明显减少;内源性TGF-β/Smad信号转导受阻不但抑制RD细胞生长,并且诱导凋亡;外源性、较高浓度的TGF-β1可抑制RD细胞生长,但不诱导凋亡。结论TGF-β/Smad信号在一定的浓度范围内精细调控RD细胞的生长和凋亡。
- 叶绿张红英杨光华步宏郭华
- 关键词：SMAD信号转化生长因子-Β横纹肌肉瘤细胞逆转录一聚合酶链反应外源性TGF-Β1肉瘤细胞系
- 人胚成肌细胞体外培养的生物学特性研究被引量：4
- 2004年
- 观察原代人胚成肌细胞 (Myoblast,Mb)体外培养的分化特点 ,并对其分化机制进行初步研究。分离人胚成肌细胞 ,用形态学及肌球蛋白 (Myosin)免疫组织化学技术鉴定。将成肌细胞在分化培养基 DM(含 3%小牛血清的 DMEM)中培养 ;对照组在 GM(含 10 %小牛血清的 DMEM)中培养 ,分别于不同时间检测各项指标。计算成肌细胞肌管形成率 (RMF)评价其分化能力 ;用流式细胞仪检测肌细胞分化过程中细胞周期的变化 ;应用倒置显微镜及透射电镜检测成肌细胞的形态学特点 ;RT- PCR检测肌细胞的肌分化调节因子 (Myogenic regulatory factors,MRFs) Myo D、Myogenin及 Myf5的 m RNA表达水平。结果显示分离培养后的细胞能融合成肌小管、形成肌丝及肌球蛋白免疫组化染色阳性 ,证实为成肌细胞。在 DM中培养 6 d后 ,相对于对照组 ,有较多肌管和肌丝形成 ;有更多的细胞退出细胞周期 ;Myogenin m RNA表达显著增高 ,Myo D m RNA表达增高不明显 ,Myf5 m RNA表达却降低。上述结果表明 ,在成肌细胞的分化与细胞周期之间可能存在着某种调节机制 ;肌分化调节因子在肌细胞分化的特定时间有不同的表达 。
- 王守立杨光华步宏周桥郭立新张红英王华叶绿
- 关键词：人体胚胎成肌细胞体外培养生物学特性免疫组织化学
- 多水平模型在生物等效性评价中的应用（Ⅰ）被引量：3
- 2009年
- 【导读】探讨多水平模型在生物等效性评价中的应用价值。以2×4试验设计的抗高血压药生物等效性评价为研究实例，研究多水平模型对效应指标值的变异即方差的分解方式，并与FDA推荐的矩法所获得的方差分量进行比较。对比传统FDA推荐的生物等效性评价标准，研究利用多水平模型直接进行平均等效性、群体等效性和个体等效性评价的可行性。对于2×4试验设计的单变量两水平模型获得In（AUC）指标的方差分量如试验药丁的总方差σTT^2、个体间方差σBT^2和个体内方差σwt^2刍以及参比药R的总方差σTR^2、个体间方差σBR^2未和个体内方差σWR^2，与FDA推荐的矩法所获得的结果非常接近。实际应用中，根据FDA提出的生物等效性评价的标准和程序进行评价，直接用多水平模型的估计值进行平均、群体和个体等效性评价，两者结果一致。多水平模型适合于交叉设计的生物等效性评价，相对于FDA推荐的方法，多水平模型对于复杂的有影响因素的交叉试验设计更容易估计方差分量，进而可以评价平均、群体和个体等效性，实际应用上更具有灵活性，为生物等效性评价提供了新的思路和方法。
- 刘巧兰沈卓之陈峰李晓松杨珉
- 关键词：多水平模型生物等效性方差分量
- 26例孤立性纤维性肿瘤临床病理及免疫组化特征被引量：50
- 2004年
- 目的 分析孤立性纤维性肿瘤的临床表现、病理形态学、免疫组织化学及生物学行为。方法 对 2 6例孤立性纤维性肿瘤进行肿瘤大体及镜下观察、临床资料分析及随访 ;对 2 3例标本的石蜡切片行 CD34、 vi-mentin、 CD99、 bcl- 2、S- 10 0、SMA、 HBME- 1、EMA和 Ki6 7等免疫组织化学 Envision法染色。结果 本组发病年龄为 15到 6 6岁 ,平均 4 4岁 ;17例为男性 ,9例为女性。发生部位包括鼻腔及鼻咽部、颅内、躯体软组织、纵隔及胸膜等。临床主要表现为局部肿块及其引起的压迫症状。主要病理学改变包括 :无构像的生长模式 (patternlessness) ,细胞密集区与细胞疏松区 ,圆钝的梭形细胞混杂于瘢痕样的胶原中及典型的“血管外皮瘤样”区域。免疫组织化学结果 :vimentin阳性率 10 0 % (2 3/ 2 3) ,CD3482 % (19/ 2 3) ,bcl- 2 87% (2 0 / 2 3) ,CD9910 0 % (2 3/ 2 3) ,SMA 30 % (7/2 3) ,S- 10 0、HBME- 1及 EMA均为阴性。随访 :回访共 13例 ,10例无瘤生存 ,3例于肿瘤复发后死亡。结论 孤立性纤维性肿瘤可发生在全身各部位。需与其他多种梭形细胞肿瘤进行鉴别诊断 ,其组织学特点及免疫组织化学染色可以帮助鉴别。约 10 %～ 2 3%孤立性纤维性肿瘤具恶性的生物学行为 ,表现为局部复发或远处转移 ,其组织学构像?
- 陈卉娇张红英李响郭立新魏兵郭华步宏杨可刘柏龄
- 关键词：孤立性纤维性肿瘤免疫组织化学CD34BCL-2
- TGFβ1信号通路蛋白在横纹肌肉瘤中的表达被引量：5
- 2004年
- 目的探讨转化生长因子β1(TGF β1)信号转导通路中TGF β1、受体(TβR Ⅰ、TβRⅡ)及胞内转导分子(Smad2、Smad4)在横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)中的表达,及其在肿瘤发生发展中可能的作用机制。方法 应用免疫组织化学技术(S-P法)及TR-PCR分别检测石蜡包埋人体横纹肌肉瘤组织及横纹肌肉瘤细胞株RD中TGF β1信号转导通路中各成分的蛋白及mRNA表达水平,与正常骨骼肌组织和成肌细胞(Myoblasts,Mb)比较。结果 在横纹肌肉瘤石蜡组织中TGF β1、Smad2和Smad4的高表达率分别为58.6％(41／70)、70％(49／70)和75.7％(53／70),对应正常骨骼肌组织的高表达率分别为28％(7／25)、24％(6／25)和28％(7／25)。两组间都有明显差异(P<0.01)。TβR Ⅰ、TβR Ⅱ在RMS及正常骨骼肌组织中普遍表达,两组无明显差异(P>0.05)。TGF β1、TGF βR Ⅰ、TGF βRⅡ、Smad2和Smad4 mRNA水平在RD细胞株中都明显高于正常成肌细胞.结论 RMS中存在TGF β1自分泌现象.Smad2、Smad4介导了TGF β1信号从细胞表面受体到细胞核内的转导。TGF β1信号转导途径可能参与了横纹肌肉瘤的发生与发展。
- 王守立杨光华步宏周桥郭立新张红英王华叶绿
- 关键词：横纹肌肉瘤转化生长因子Β受体转化生长因子ΒSMAD2SMAD4
- 慢性阻塞性肺疾病患者气道上皮水通道5的表达与黏液高分泌被引量：10
- 2006年
- 目的通过检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者气道上皮水通道5(AQP5)和黏蛋白MUC5AC、黏膜下腺黏蛋白的表达,探讨COPD患者气道黏液高分泌的机制。方法取2004年华西医院胸外科手术病人离体标本,根据术前检查结果将患者分为轻度COPD组(8例)、中重度COPD组(17例)和对照组(20例),分别用RT-PCR、原位杂交、免疫组化、阿辛兰-PAS染色检测气道上皮细胞AQP5、MUC5AC以及黏蛋白的表达。结果与正常对照组相比较,COPD组患者黏膜下腺AQP5表达低于对照组(P<0.01),两组患者肺组织AQP5表达差异无统计学意义(P>0.05);中重度COPD组患者黏膜下腺AQP5表达低于轻度COPD组(P<0.01)。COPD组患者气道上皮MUC5AC表达高于对照组(P<0.01),中重度COPD组患者气道上皮MUC5AC表达高于轻度COPD组(P<0.01);COPD组黏膜下腺分泌黏蛋白较对照组增加(P<0.01),中重度COPD组患者黏膜下腺分泌黏蛋白表达高于轻度COPD组(P<0.01)。黏膜下腺AQP5mRNA表达与患者FEV1/FVC、FEV1%pred、V50%pred、V25%pred呈正相关(r分别为0.60,0.60,0.55和0.45,P均<0.01),AQP5的表达减弱与COPD患者的气道气流受限严重程度有关;与患者气道上皮MUC5ACmRNA表达呈负相关(r=-0.45,P<0.01);与黏膜下腺着色面积呈负相关(r=-0.61,P=0.01)。气道上皮MUC5ACmRNA表达与患者FEV1/FVC、FEV1%pred、V50%pred、V25%pred呈负相关(r分别为-0.53,-0.53,-0.48和-0.43,P均<0.01);与黏膜下腺黏液着色面积呈正相关(r=0.43,P<0.05)。结论COPD患者的黏膜下腺AQP5较对照组表达降低,AQP5可能参与了COPD患者气道黏液分泌的调节。
- 王可冯玉麟文富强陈雪融欧雪梅徐丹邓治平杨劼
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病黏液高分泌
- 转化生长因子-茁1在人横纹肌肉瘤肌源性分化中的作用被引量：1
- 2004年
- 目的:探讨转化生长因子-茁1(TGF-茁1)在横纹肌肉瘤肌源性分化中的作用。方法:采用细胞培养、逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)及免疫荧光染色观察TGF-茁1对横纹肌肉瘤细胞系RD肌源性分化相关指标的影响,并用免疫组化SP法,检测49例横纹肌肉瘤组织中TGF-茁1表达与肌球蛋白重链(MyHC)之间的相关性。结果:TGF-茁1可明显抑制RD细胞肌球蛋白重链mRNA和蛋白的表达。用TGF-茁1处理RD细胞后,肌球蛋白重链和肌节肌动蛋白(Sarcomeric-Actin)阳性着色细胞数明显下降(P<0.05)。MyoD1的表达在处理前后未见明显差异。横纹肌肉瘤组织中TGF-茁1表达与肌球蛋白重链呈明显负相关(P<0.05)。结论:TGF-茁1可抑制RD细胞的肌源性分化,这一作用可能不依赖于MyoD1的调节。TGF-茁1信号传导通路可能与横纹肌肉瘤的肌源性分化受阻有关。
- 王华杨光华步宏郭立新周桥李胜富彭惠
- 关键词：转化生长因子-Β1横纹肌肉瘤免疫组化SP法
- 恶性组织细胞增生症瘤细胞属性及临床病理分析被引量：2
- 2004年
- 目的:探讨恶性组织细胞增生症瘤细胞的属性,EB病毒感染的情况及其临床病理特点。方法:收集33例以往诊断为恶组的尸检病例及相关临床资料,并利用组织芯片技术将不同组织集成在一张切片上。免疫组化采用LsAB法。一抗选用CD4、CD8、CD20、CD45RO、CD56、CD3ε、CD30、CD68、TIA-1及GranzymeB。DNA-RNA原位杂交检测EB病毒编码的小分子mRNA。结果:33例恶组中,排除不符合传统恶组诊断标准的4例,选择其中29例作为研究对象。检测结果示29例中有28例属外周T细胞淋巴瘤,其中皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤3例、肠道T细胞淋巴瘤1例,间变性大细胞淋巴瘤1例;16/28例为EBER1/2阳性;余1例为恶组样B细胞性血管内淋巴瘤。结论:恶性组织细胞增生症是一组异质性淋巴细胞增生性疾病。绝大多数瘤细胞来源于细胞毒性,T细胞或NK细胞(28/29),少数来源于B淋巴细胞(1/29),未发现组织细胞源性的肿瘤。
- 鲁昌立李甘地刘卫平郭嘉李俸媛廖殿英张文燕
- 关键词：恶性组织细胞增生症EB病毒
