国家重点基础研究发展计划(2003CB716005)
- 作品数:26 被引量:146H指数:8
- 相关作者:沈寅初郑裕国易平贵于贤勇陈忠更多>>
- 相关机构:浙江工业大学湖南科技大学厦门大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程理学生物学轻工技术与工程更多>>
- 蜗牛酶中一种人参皂苷Rb_1水解酶的分离纯化被引量:16
- 2005年
- 通过DEAE-Sepharose离子交换分段层析,DEAE-Sepharose离子交换梯度层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析三种方法的联用从中华白玉蜗牛消化酶中分离出一种人参皂苷Rb1水解酶。分离后该酶在SDSPAGE上呈单一蛋白质条带。应用SDSPAGE和凝胶过滤层析对分子量的测定,提示该酶是由4个分子量为110~115kD的相同亚基组成的同源四聚体。Rb1为底物的动力学参数Km和Vmax分别为0.790mmolL和10.192μmolminmg。该酶对人参皂苷Rb1糖键进行有选择的水解,可水解人参皂苷Rb1C20位的一个糖苷键生成人参皂苷Rd。
- 刘欣崔昱杨凌杨胜利
- 关键词:人参皂苷RB1生物转化
- 一种来源于Leifsonia shinshuensis DICP 16菌体的β-D-木糖苷酶的分离纯化及其性质被引量:9
- 2008年
- 采用盐析、DE52、Q-SepharoseFast Flow阴离子交换层析、Toyopearl Butyl 650C疏水层析以及Sephacryl S-300HR凝胶过滤层析联用的方法,从Leifsonia shinshuensis DICP 16菌体中纯化出一种β-木糖苷酶。分离后该酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带,通过SDS-PAGE和凝胶过滤层析法,测得该酶是一个由两个分子量约为91kD的相同亚基组成的同源二聚体。其水解对硝基苯酚木糖苷(pNPX)的最适反应温度为55°C,pH值为7.0。该木糖苷酶在45°C以下,pH6.0-11.0之间具有很好的稳定性。在45°C,pH值为7.0的条件下,水解pNPX的Km,Vmax分别为1.04mmol/L,0.095mmol/(min·mg)。研究不同的金属离子对该酶的活性影响,发现Fe^2+和Cu^2+是很强的抑制剂。通过对天然木糖苷化合物的水解测试,发现该酶可以水解人参皂苷Rb3的木糖基,产生人参皂苷Rd,却不能水解紫杉烷木糖苷的木糖基。
- 栾宏伟胡莹刘兴宝郝大程杨凌
- 关键词:Β-木糖苷酶分离纯化
- 腈水合酶的分离纯化研究
- <正> 腈是一类重要的化合物,它的酶法水解反应被广泛应用于氨基酸、酰胺、羧酸及其衍生物的合成,在有机合成中占有极其重要的地位。利用微生物产生的腈水合酶对腈进行催化水合反应,使其转变成相应的酰胺或者酸,这一路线因其具有较高...
- 廖春燕郑裕国沈寅初
- 对苯二甲酸的生产方法及展望被引量:2
- 2005年
- 对苯二甲酸工业上主要采用以对二甲苯为原料的化学法生产,但化学法需要高温高压、催化剂容易失活、副产物较多、环境污染严重;介绍了对苯二甲酸的酶法生产,并结合现有技术,提出利用腈水解酶生产对苯二甲酸的展望。
- 徐亚蓉郑裕国沈寅初
- 关键词:对苯二甲酸生产方法
- 双过氧钒配合物与4,4′-联吡啶相互作用的NMR和理论研究
- 2008年
- 在模拟生理条件下(0.15mol/LNaCl溶液),应用多核(1H和51V)多维(DOSY)NMR以及变温技术等谱学方法研究双过氧钒配合物[OV(O2)(2D2O)]-/[OV(O2)(2HOD)](-简写为bpV)与4,4'-联吡啶(简写为bipy)的相互作用.竞争配位的结果,导致溶液中既有6配位的过氧钒物种[OV(O2)(2bipy)]-的生成,还有([OV(O2)2)(2bipy)]2(-6配位)的存在.采用密度泛函理论(B3LYP方法),在3-21+G*水平下计算表明,bipy和bpV生成[OV(O2)(2bipy)]-和([OV(O2)2)(2bipy)]2-的ΔG分别为-53.35和-55.85kJ/mol,较好地支持了实验结果.
- 于贤勇易平贵张峻李国斌黄昊文曾云龙陈忠
- 关键词:相互作用核磁共振
- Bacillus subtilis E9生产对甲氧基苯乙酸的研究
- <正>Bacillus subtilis E9作为芳基乙腈类水解酶,在国内外还未曾有报道。本文以Bacillus subtilis E9为催化剂,以对甲氧基苯乙腈为底物,对静息细胞催化法生产对甲氧基苯乙酸进行了初步研究。...
- 陈静郑裕国沈寅初
- 关键词:腈水解酶
- 文献传递
- 有机腈生物转化生产医药中间体被引量:1
- 2005年
- 生物技术是应用自然科学及工程学的原理,依靠生物催化剂的作用将物料进行加工以提取产品或为社会服务的技术,其实质是利用生物催化剂从事生物技术产品的生产过程.……
- 金利群王亚军郑仁朝郑裕国沈寅初
- 关键词:生物转化生物催化医药中间体生物催化剂羟基乙酸
- 腈水合酶菌株筛选及其初步鉴定
- <正> 腈类化合物是自然界中广泛分布的一类物质。传统的化学法水解腈类物质能耗大、副产物多,而且需在强酸或强碱的条件下进行,通过微生物把腈类化合物转化为相应的酰胺和酸具有条件温和、环境污染小、能够实现化学选择性、区域选择性...
- 金利群王亚军胡基埂郑裕国沈寅初
- 文献传递
- 产S-酰胺酶培养基统计学筛选与响应面优化被引量:3
- 2008年
- 利用Design Expert软件中的两水平实验设计和响应面法,对发酵生产S-酰胺酶(可用于拆分2,2-二甲基环丙甲酰胺外消旋体)的培养基进行了优化。采用Plackett-Burman(PB)设计对培养基中相关影响因素的效应进行评价并筛选出了有显著效应的葡萄糖、酵母粉及2,2-二甲基环丙甲酰胺浓度,其他因素对酰胺酶产量的影响不显著。然后用旋转中心组和实验设计及响应面分析确定了主要影响因素的最佳条件,在优化的培养基中,酰胺酶产量达到168 U/L,比优化前的80 U/L提高了110.0%。
- 王宝峰郑裕国沈寅初
- 关键词:PLACKETT-BURMAN设计
- 糖苷酶序列分类法和作用机理的研究进展被引量:10
- 2006年
- 糖苷酶作为维持生物体基本功能的重要酶类之一,在生物催化和转化领域具有广泛的应用价值。文章介绍了一种能显示酶的结构和机理特征的糖苷酶分类法———序列分类法。它能更好的反映酶的结构特征,显示酶与酶之间的进化关系,为获得机理相关信息提供方便。同时又从糖苷酶作用的一般催化机理(包括保持型和倒置型糖苷酶)、各类糖苷酶的活性位点的结构特点、糖苷酶机理的研究方法3方面对糖苷酶作一介绍。
- 胡莹杨凌杨胜利
- 关键词:糖苷酶中间体