国家重点基础研究发展计划(2003CB716004)
- 作品数：40 被引量：223H指数：9
- 相关作者：韦萍何冰芳刘铮卢滇楠周华更多>>
- 相关机构：南京工业大学清华大学湖南科技大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：化学工程生物学理学轻工技术与工程更多>>
- Clostridium papyrosolvens发酵产氢研究
- 采用分批培养研究了Clostridium papyrosolvens在低成本培养基中的发酵产氢能力,主要探讨了发酵基质浓度、发酵过程pH对产氢的影响。结果表明:当葡萄糖浓度为30g／L、pH控制在4．5时,可获得较好的产...
- 靳孝庆徐昊沈磊何冰芳
- 关键词：厌氧发酵产氢
- 采用pHsh载体克隆与表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶基因
- 2012年
- 利用质粒pHsh为表达载体,构建高效表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的基因工程菌E.coli DH10B/argE-pHsh。为提高酶活并降低生产成本,优化了诱导条件。结果表明:NAOase可在pHsh系统中高活性表达,诱导起始OD600为0.6,在空气摇床中42℃热激诱导5 h重组菌比酶活达到152 U/mL。
- 张琛李环吴圆丽韦萍
- 关键词：大肠杆菌克隆
- 泉古菌Sulfolobus islandicus PCNA1的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：3
- 2010年
- 泉古菌Sulfolobus islandicus中PCNA有3个同源类似蛋白,本研究选取PCNA1作为研究对象,为获得可溶性表达的PCNA1蛋白,制备多克隆抗体,深入了解PCNA1基因的功能,将PCNA1基因片段克隆到组氨酸标签融合的表达载体pET30a中,利用IPTG诱导,金属螯合亲和层析进行纯化分析表明,融合蛋白大部分可溶。紫外分光光度法测定纯化蛋白的纯度可达90%以上,浓度约为2 mg/mL。免疫家兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗血清效价可达1∶10 000以上,Western印迹检测证明抗体特异性良好。
- 田斌张昌毅佘群新梁运祥
- 关键词：原核表达金属螯合亲和层析多克隆抗体
- 氨基磺酸催化的Mannich反应合成β-氨基酮被引量：9
- 2008年
- 采用廉价的氨基磺酸作为催化剂,芳香酮以及环己酮、3-戊酮与芳香醛、芳香胺可直接发生Mannich反应,生成相应的Mannich碱,产率均在60%～95%。氨基磺酸作为催化剂表现出高效的催化活性,优良的稳定性及良好的利用效率。
- 吴璇李维思李振江
- 关键词：MANNICH反应氨基磺酸催化
- 表面活性剂辅助蛋白质体外折叠:分子模拟被引量：4
- 2005年
- 采用分子模拟方法考察表面活性剂与蛋白质分子之间的相互作用及其对蛋白质折叠过程热力学特性的影响,蛋白质分子构建采用HP模型并引入了方阱类势函数.模拟结果显示:模型蛋白分子的某些折叠中间态会陷入局部能量最低状态而无法完成折叠;弱疏水性表面活性剂对模型蛋白的稳定性影响小,但可有效地帮助处于局部能量最低状态的蛋白折叠中间态通过能量壁垒而实现折叠;强疏水性表面活性剂则可与蛋白质形成高稳定性的复合物而阻止折叠的进行,需将其脱除才能使折叠过程重新开始.模拟结果还显示:表面活性剂的加入会使蛋白质折叠中间态更加丰富,从而能够光滑折叠过程中的能量阱;表面活性剂与变性环境对于蛋白质的折叠具有协同效应.模拟结果与文献报道的实验结果具有一致性,显示分子模拟的方法在揭示蛋白质折叠过程的微观机理以及表面活性剂类折叠助剂的分子设计方面有很好的应用前景.
- 卢滇楠王君刘志霞张敏莲刘铮
- 关键词：分子模拟表面活性剂
- 蛋白质在溶液中构象转换的分子动力学模拟
- 2005年
- 将蛋白质的稳定和失活、折叠和去折叠等现象概括为蛋白质分子在溶液中的构象变化问题。采用非晶格模型和Langevin分子动力学方法研究了无限稀释溶液及不同尺度和不同表面亲/疏水性球形限制性空间内β模型蛋白的构象分布及其转换特性。模拟结果显示:尺寸适度的疏水性空间有利于蛋白质结构发生缩塌,而亲水性空间有利于缩塌态蛋白质结构的稳定,且表面亲/疏水性的影响作用随着空间半径的增大而减弱。计算结果与实验报道一致,为研究蛋白质分子在溶液中的折叠和稳定化提供了理论工具。
- 卢滇楠刘铮
- 关键词：蛋白质折叠
- 酶法合成脂肪族聚酯的研究进展被引量：1
- 2009年
- 酶法合成的脂肪族聚酯不仅是具有生物可降解性的高聚物,而且具有良好的生物吸收性,保证了其作为医用材料的安全性。酶法合成脂肪族聚酯的方法是一种新型的环境友好绿色化学技术,合成条件温和,产物易于分离,可以弥补传统合成方法的不足。本文评价了酶法合成脂肪族聚酯的发展现状和最新研究进展,介绍了酶催化合成脂肪族聚酯的方法及影响因素。
- 黄小玲何若平周华韦萍
- 关键词：酶催化脂肪族聚酯
- 活性污泥处理高浓度基质发酵产氢条件的优化被引量：5
- 2006年
- 以蔗糖为基质模拟有机废水,通过对活性污泥的梯度驯化,提高了活性污泥对高糖溶液的代谢能力与产氢能力,在此基础上对其产氢条件进行优化。优化后发酵条件为:厌氧发酵温度36℃,初始pH值5.0,蔗糖90 g/L,玉米浆8 mL/L,FeSO4.7H2O 20 mg/L,MgC l2.6H2O 10 mg/L,K2HPO41.0 g/L。优化后的活性污泥平均产氢速率达到565 mL/(L.h),比优化前提高了223%;比产氢率为3.04 mol/mol,比优化前提高了30%。提出了有机氮与生长因子同步添加的高效廉价培养基方案,为活性污泥厌氧发酵生物制氢技术的工业化奠定了基础。
- 吴薛明申宁何冰芳
- 关键词：生物产氢活性污泥厌氧发酵
- 枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆及高效表达被引量：13
- 2007年
- 扩增了枯草芽孢杆菌中的葡萄糖脱氢酶基因(gdh),构建了诱导型表达载体pET-gdh,导入E.coliBL21(DE3)后获得了高效表达葡萄糖脱氢酶基因的重组菌BL21/pET-gdh。经过诱导时间、诱导温度参数的优化,IPTG诱导后重组菌BL21/pET-gdh的葡萄糖脱氢酶比酶活高达9.65 U/mg蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明,重组蛋白质表达量占全菌胞内可溶性蛋白的53%,实现了葡萄糖脱氢酶基因的高效表达,为氧化还原酶催化系统提供高效率的NADP+与NADPH循环奠定了基础。
- 徐娴谢承佳何冰芳
- 关键词：葡萄糖脱氢酶辅酶再生
- 嗜热菌Bacillus fordii3-2海因酶的纯化及性质被引量：3
- 2007年
- 对自行筛选的海因酶法L-苯丙氨酸生产菌株Bacillus fordii3-2中的海因酶进行了分离纯化及相关性质研究。该海因酶协同L-氨甲酰水解酶是海因酶法生产L-氨基酸的关键酶。且fordii3-2菌悬液经压力破碎离心后取上清液为粗酶液，粗酶液通过硫酸铵分级沉淀、Phenyl FF（high sub）疏水层析以及Source 15Q离子交换层析，经SDS—PAGE分析达到电泳纯。亚基相对分子质量为55×10^3，海因酶的纯化回收率为20．5％，纯化倍数为149．23。该海因酶在pH8．0～10．0的范围内具有较高的活性，在45—70℃具有很高的酶活力，最适反应pH和温度分别为10．0℃和65℃。纯酶易氧化失活，DTT对该酶有一定的保护作用。二价金属离子，Mn^2＋、Co^2＋及Fe^2＋对酶活性有显著的促进作用，而Ca^2＋、Cu^2＋等对酶活性有抑制作用。相关研究可为该菌株及海因酶的进一步开发与应用提供理论指导。
- 孙倩倩潘瑶姚忠何冰芳
- 关键词：海因酶纯化酶学性质
