国家自然科学基金(30930043)
- 作品数：8 被引量：46H指数：3
- 相关作者：邹云增蒋国良叶勇龚惠葛均波更多>>
- 相关机构：复旦大学华中科技大学同济大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 环状RNA:心血管疾病新型标志物被引量：1
- 2017年
- 环状RNA是新型非编码RNA,可以"海绵分子"的形式结合microRNA和相关蛋白,参与心血管疾病的调控。环状RNA广泛存在于细胞内或细胞外,包括血液、唾液和精液,提示环状RNA或可作为心血管疾病的新型治疗靶点和生物标记物。本文对环状RNA的产生机制和表达特征、环状RNA与心血管疾病的关系、环状RNA作为新型生物标记物和治疗靶点的可能性进行综述。
- 王晓燕邹云增
- 关键词：心血管疾病生物标记物
- 机械牵张对诱导多能干细胞向心肌细胞分化的研究被引量：3
- 2012年
- 目的研究机械牵张对诱导多能干细胞向心肌细胞分化效率的影响。方法诱导多能干细胞形成拟胚体后将拟胚体分为四组:对照组(未行牵张处理),牵张组1(5-6天行24小时牵张),牵张组2(5-6天行24小时牵张,7-8天再行24小时牵张),牵张组3(5-6天行24小时牵张,7-10天再行72小时牵张),通过对小鼠诱导多能干细胞施加20%形变率的机械牵张力后,于第15天,分别计数每组跳动克隆数目从而初步在上述四组中选出诱导效率最高组,此后用荧光免疫染色、Westernblot、RT-PCR和激光共聚焦法,进一步鉴定对照组和初步筛选出的牵张组最终分化效率和细胞成熟度差异。结果机械牵张刺激下,分化15天时,牵张组2的跳动克隆数上升(P<0.05),初步筛选出牵张组2可以提高分化效率;统计α-MHC免疫荧光染色面积发现牵张组2是对照组的2.1倍(P<0.05);牵张组2TroponinI的蛋白表达量为对照组的1.7倍(P<0.05);半定量PCR结果发现,心肌细胞标志基因β-MHC,MLC-2v及心肌细胞早期转录因子Nkx2.5的表达量分别提高了6.7倍、4.4倍和11.4倍(P值均<0.05);激光扫描共聚焦显微镜对分化来的单个心肌细胞进行α-actinin观察发现,牵张组2有利于心肌细胞的伸展和成熟。结论初步验证机械牵张力作为一种刺激诱导因素,20%拉伸形变率,牵张组2(贴壁的拟胚体5-6天行24小时牵张,7-8天再行24小时牵张)的处理方法可以显著促进诱导多能干细胞向心肌细胞的分化效率,为以后的深入研究和临床应用提供了实验基础。
- 薛媛媛龚惠闫媛周寅叶勇蒋国良苑洁周宁葛均波邹云增
- 关键词：诱导多能干细胞机械牵张分化心肌细胞
- 参芎葡萄糖注射液对缺血再灌注损伤心肌的保护作用被引量：15
- 2012年
- 目的探讨参芎葡萄糖注射液对小鼠急性心肌缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及可能的分子机制。方法建立急性心肌缺血再灌注(Ischemia-Reperfusion,I/R)损伤的小鼠模型,将野生型小鼠(C57BL/6)随机分为3组,假手术组(Sham),缺血再灌注+生理盐水组(Vehicle),缺血再灌注+参芎葡萄糖注射液预处理组(20mL/kg,SL),术前2小时给予腹腔注射生理盐水或参芎葡萄糖注射液,于缺血再灌注后不同时间点,通过心脏超声观察各组小鼠心功能的变化,心肌组织TTC染色确定心梗面积大小,脱氧核糖核苷酸末端转移酶法(TUNEL)检测凋亡心肌,蛋白免疫印迹法(Western Blot)及酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测心肌组织以及血清炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)表达水平变化。结果 I/R手术48小时后,与假手术组相比,左室射血分数(LVEF)明显降低(P<0.01)。参芎葡萄糖注射液预处理明显改善I/R组的LVEF,并降低了心肌梗死面积,抑制I/R引起的心肌细胞凋亡和组织炎症反应。进一步的研究表明,参芎葡萄糖注射液预处理明显抑制了I/R后心肌组织以及血清中TNF-α表达水平升高(P<0.01)。结论参芎葡萄糖注射液预处理通过抑制TNF-α表达水平发挥对缺血再灌注(I/R)损伤心肌的保护作用。
- 李达文龚惠叶勇路静蒋国良贾剑国吴超能张国平邹云增
- 关键词：参芎葡萄糖注射液心肌缺血再灌注损伤炎症反应细胞凋亡
- 芪苈强心胶囊通过抑制血管紧张素Ⅱ改善压力超负荷致小鼠心肌肥厚被引量：9
- 2011年
- 目的探讨探讨芪苈强心胶囊是否通过抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)表达改善压力超负荷下小鼠心肌肥厚。方法小鼠行升主动脉缩窄手术(TAC)建立心肌肥厚模型,8-10周龄野生型雄性小鼠(WT)和雄性血管紧张素原基因敲除小鼠(ATG-/-)随机分为假手术组、生理盐水组、芪苈强心胶囊三组,TAC组小鼠给予生理盐水或1.0mg/(kg.d)药物灌胃处理。术后2周行心超及血流动力学检查,同时分析心肌组织学指标以及肥厚相关基因表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆和心肌组织AngⅡ浓度,,蛋白印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)及血管紧张素Ⅱ-1型(AT1)受体表达。结果 WT和ATG-/-小鼠TAC后2周,主动脉血压及左室收缩末期压显著升高,芪苈强心胶囊对其均无影响。WT小鼠中,此药显著抑制TAC介导AngⅡ的升高(P<0.05),抑制TAC介导的左室前壁,左室后壁增厚以及心肌细胞横截面积(CSA)和纤维化面积增大,同时抑制肥厚相关基因、AT1受体和p-ERK表达上调(P<0.05),;ATG-/-小鼠中,在AngⅡ缺失的情况下,TAC两组间左室前后壁、CSA、纤维化面积以及肥厚相关基因、AT1受体和p-ERK表达无明显差异(P>0.05)。结论芪苈强心胶囊改善压力超负荷致小鼠心肌肥厚是通过抑制AngⅡ表达来减弱AT1受体激活,非直接抑制压力超负荷机械刺激引起AT1受体的激活。
- 叶勇李磊蒋国良吴剑周宁马宏关爱丽龚惠葛均波葛均波
- 关键词：芪苈强心胶囊心肌肥厚升主动脉缩窄
- 隐秘的未知宇宙:心血管环状RNA研究被引量：2
- 2017年
- 经典的基因表达理论认为,所有RNA分子都是线性结构,测序方法只能分离具有特征性分子尾巴的那些分子。环状RNA的末端连接在一起,缺乏这些尾巴,因此被普遍忽略掉了。所以环状RNA一直飞行于雷达之下,鲜被发觉。最新研究证明,环状RNA不仅存在,而且广泛存在于人体细胞内外,包括血液、唾液及心脏,提示环状RNA或可作为心血管疾病的新型治疗靶点和生物标记物。
- 邹云增王晓燕
- 关键词：生物标记物
- 运用BiFC技术检测LOX-1与AT1受体的相互作用被引量：1
- 2011年
- 目的运用双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)技术探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)介导血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)之间的相互作用,推测其可能是参加动脉粥样硬化等心血管疾病过程的重要机制之一。方法将LOX-1与AT1受体质粒共转染COS7细胞,给予ox-LDL(50ug/ml)刺激后,检测细胞中p-ERK表达水平。根据BiFC载体和AT1、LOX-1基因序列设计引物,将AT1、LOX-1基因克隆到BiFC特异性的荧光载体上,得到重组BiFC质粒:phmKGN-MN-AT1,phmKGC-MN-AT和phmKGC-MC-LOX-1,phmKGN-MC-LOX-1,配对共转染HEK293细胞,用ox-LDL(50ug/ml)刺激,研究AT1受体和LOX-1的相互作用;构建G蛋白偶联受体家族中另一蛋白肾上腺素受体β2(β2-adrenergi creceptor,β2AR)的BiFC重组质粒:phmKGN-MN-β2AR和phmKGC-MN-β2AR,分别与LOX-1对应的BiFC质粒转染HEK293细胞,ox-LDL(50ug/ml)刺激后,观察细胞荧光。结果用ox-LDL刺激转染AT1与LOX-1受体质粒的COS7细胞,可以引起p-ERK表达升高;成功构建AT1、LOX-1、β2AR的BiFC重组质粒;将AT1和LOX-1的BiFC质粒共转染HEK293细胞,用ox-LDL刺激后,可以观察到绿色荧光。而转染β2AR和LOX-1的BiFC质粒,用ox-LDL刺激后未检测到荧光。结论初步验证ox-LDL可以诱导LOX-1与AT1受体特异性相互作用。
- 葛静怡龚惠蒋国良杨春杰张国平邹云增
- 关键词：血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1
- 微小RNA-378抑制高血压心肌纤维化的作用和机制研究被引量：3
- 2018年
- 目的 研究微小RNA-378(miR-378)在高血压心肌纤维化中的作用和机制.方法 通过对体外细胞施加机械应力刺激模拟高血压压力负荷对心肌细胞的作用.试验分为四部分:(1)对心肌细胞进行机械牵张刺激或不干预,分别提取心肌细胞上清中的外泌体,用电镜观察外泌体数目和形态、实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外泌体中微小RNA(miRNA)的表达、免疫蛋白印迹法(Western blot)检测CD81蛋白表达水平.(2)用诺瑟杂交(Northern blot)检测体外心肌细胞和心肌成纤维细胞中内源性miR-378的表达水平;用RT-PCR检测不同培养基中成纤维细胞的miR-378的表达水平.(3)用经机械牵张刺激和未经刺激的心肌细胞上清分别培养成纤维细胞后,再对成纤维细胞进行机械牵张刺激,用RT-PCR检测成纤维细胞的miR-378和胶原mRNA表达水平、Western blot检测基质金属蛋白酶9(MMP9)和基质金属蛋白酶3(MMP3)的蛋白表达水平.(4)用miR-378模拟物转染心肌成纤维细胞,并分别加入p38 MAPK抑制剂SB203580和STAT3抑制剂S3I-201,再经机械牵张刺激后,用RT-PCR检测成纤维细胞中胶原mRNA、Western blot检测p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK、STAT3、MMP9的表达.结果 (1)对比未干预的心肌细胞上清,机械牵张刺激后的心肌细胞上清中外泌体数量和miR-378含量显著增多(P<0.01).(2)miR-378在心肌细胞中高表达,而在心肌成纤维细胞中不表达;而经牵张刺激的心肌细胞上清培养的成纤维细胞中miR-378水平较未牵张组显著升高(P<0.01).(3)成纤维细胞经牵张刺激的心肌细胞上清培养后,其Col1a1、Col3a1 mRNA和MMP9、MMP3蛋白在机械应力刺激下的表达水平显著下降(P<0.01).(4)成纤维细胞经miR-378类似物转染后,其Col1a1和Col3a1 mRNA(P<0.05)、MMP9和磷酸化p38 MAPK(P<0.01)在机械应力刺激下的表达水平显著下降,而STAT3表达升高(P<0.01).在miR-378的基础上,阻断p38 MARK磷酸化,成纤维细胞STAT3在机械应力刺激�
- 苑洁邹云增
- 关键词：高血压心内膜心肌纤维化症核苷酸类
