重庆市自然科学基金(CSTC2007BB5305)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：李建国彭志平王洁李少林庞华更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗HIF-1α肺腺癌人源单链抗体的筛选和初步鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的从单链大容量噬菌体抗体库中筛选特异性的抗HIF-1α肺腺癌人源单链抗体(scFv),并进行初步鉴定。方法先后以肺腺癌细胞A549、HIF-1α为抗原,通过"吸附-洗脱-扩增"从大容量噬菌体抗体库中筛选特异性抗体,感染大肠杆菌HB2151,实现可溶性抗体的表达,ELISA、免疫细胞化学检测抗原-抗体结合活性,SDS-PAGE和Western blot检测可溶性抗体表达和相对分子质量。结果经筛选后,单链抗体得到富集。随机选取10个克隆,ELISA检测5个与HIF-1α抗原呈阳性反应,阳性率为50%。免疫细胞化学表明抗体与A549细胞特异性结合。SDS-PAGE、Western blot证明单链抗体成功可溶表达,且相对分子质量在30×103左右,ELISA显示其有较好的特异性。结论利用单链大容量噬菌体抗体库技术成功获得特异性抗HIF-1α的肺腺癌人源单链抗体。
- 王洁李建国庞华彭志平李少林
- 关键词：噬菌体抗体库单链抗体HIF-1Α肺腺癌
