上海市教育委员会重点学科基金(B505)
- 作品数：60 被引量：236H指数：8
- 相关作者：魏东芝沈亚领张嗣良周文瑜鲍杰更多>>
- 相关机构：华东理工大学生物技术有限公司中国石油更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 木薯纤维素乙醇发酵的纤维素酶成本评价被引量：2
- 2013年
- 木薯中的纤维素成分约占木薯干重的10%(W/W)。文中以木薯燃料乙醇生产的木薯纤维素酒渣为原料,从纤维素酶成本角度评估了三种利用木薯纤维素组分发酵生产乙醇的方法,包括木薯纤维素酒渣的直接糖化和乙醇发酵、木薯纤维素酒渣预处理后的糖化与乙醇发酵、木薯乙醇发酵中同步淀粉与纤维素糖化以及乙醇发酵。结果表明,前两种方法的纤维素利用效率不高,酶成本分别达到13 602、11 659元/吨乙醇。第三种方法,即在木薯乙醇发酵过程同时加入糖化酶和纤维素酶,进行同步淀粉与纤维素糖化,进而进行乙醇发酵,木薯纤维素乙醇的收益最高。发酵结束时的乙醇浓度从101.5 g/L提高到107.0 g/L,纤维素酶成本为3 589元/吨乙醇。此方法利用木薯纤维素与木薯淀粉同时进行,不会带来额外的设备及操作投入,酶成本低于产品乙醇价格,可实现盈利,因此第三种方法为木薯纤维用于乙醇发酵的最适方法,本研究结果将为木薯乙醇产业深度利用木薯纤维提供依据。
- 方镇宏邓红波张小希张建鲍杰
- 关键词：乙醇发酵
- 有机酸对肺炎克雷伯杆菌厌氧代谢甘油的影响被引量：1
- 2011年
- 在肺炎克雷伯杆菌厌氧发酵甘油生产1,3-丙二醇的过程中,大量的副产物,特别是乳酸和乙醇等副产物的生成,导致1,3-丙二醇的浓度和得率下降。为了进一步了解有机酸加入后菌体的代谢情况,在菌体生长期同时加入柠檬酸、琥珀酸和延胡索酸三种有机酸的混合液,使其浓度达到3.8 mmol·L-1。5 L罐发酵结果显示,产物的生成发生显著变化。同时,发酵动力学分析表明,有机酸加入后,甘油的比消耗速率和1,3-丙二醇的比生成速率显著提高,而乳酸和乙醇的比生成速率则明显下降。进一步对甘油代谢过程中的碳流分配分析表明,有机酸加入后,甘油进入还原途径的碳流比例由0.45显著增加为0.62,氧化途径的碳流比例由0.53减为0.35。
- 薛学东李伟李志敏周利夏月兰叶勤
- 关键词：有机酸肺炎克雷伯杆菌厌氧发酵甘油
- gdh和ldh基因共表达重组大肠杆菌合成D-乳酸研究被引量：3
- 2014年
- D-聚乳酸是一种生物可降解材料,具有高热稳定性,生物合成其单体D-乳酸将具有广阔的前景。以枯草芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增葡萄糖脱氢酶基因gdh,与表达载体pETduet-1连接获得pETduetGDH;再以粘质沙雷氏菌基因组DNA为模板,PCR扩增乳酸脱氢酶基因ldh,与已构建的pETduet-GDH连接获得pETduet-LG,转化E.Coli BL21共表达。过表达GDH和LDH大肠杆菌可不对称还原丙酮酸合成D-乳酸。经全细胞转化条件优化发现,添加NAD+能提高起始反应速度,在最佳温度37℃、0.2 mol/L磷酸缓冲液、pH7.0、细胞浓度OD值为40和丙酮酸20 g/L时,底物转化率可达86.5%,D-乳酸产量为17.3 g/L。
- 胡媛周文瑜魏东芝沈亚领
- 关键词：D-乳酸葡萄糖脱氢酶共表达辅酶再生
- 多粘类芽孢杆菌HY96-2发酵液化学成分研究被引量：15
- 2009年
- 从多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa HY96-2)的发酵液中分离得到了12个化合物,其结构通过波谱分析分别鉴定为苯甲酸(1)、对羟基苯甲酸(2)、对羟基苯丙酸(3)、2-苯基乳酸(4)、3-苯基乳酸(5)、琥珀酸(6)、棕榈酸甲酯(7)、大豆甙元(8)、环(甘氨酸-L-丙氨酸)二肽(9)、吲哚-3-乙酸(10)、L-苯丙氨酸(11)和2R,3R-丁二醇(12),其中化合物1～9均为首次从该菌中分离得到,化合物1、2、5和6对青枯劳尔氏菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为1、3、2和3mg/mL。
- 龚春燕张道敬魏鸿刚李淑兰沈国敏李元广
- 关键词：多粘类芽孢杆菌化学成分抑菌活性
- 麦芽糖浓度和渗透压对游动放线菌生长及阿卡波糖生物合成的综合影响被引量：7
- 2010年
- 阿卡波糖(1)是游动放线菌(Actinoplanes sp.)的次级代谢产物,其生成与菌体生长具有相关性。发酵液渗透压对细胞生长及1的生物合成影响显著。本研究考察了渗透压对1生物合成的影响,结果表明通过补料将发酵前期渗透压维持在300mOsm/kg,中后期维持400～500mOsm/kg,麦芽糖浓度维持6%,1生物合成水平大幅提高,50L发酵罐效价为3360mg/L,提高了50%以上。
- 姜玮生英涛蔡月明郭美锦储炬
- 关键词：阿卡波糖渗透压发酵
- 外源功能基因在木质纤维素依赖型乳酸菌Pediococcus acidilactici DQ2中的表达
- 2013年
- 乳酸片球菌Pediococcus acidilactici DQ2是一株耐高温和耐木质纤维素降解抑制物的乳酸高产菌株.为了在P.acidilactici DQ2中建立外源蛋白表达系统,对常用的乳酸菌表达载体pMG36e进行改造,将其启动子P32更换为来源于P.acidilactici DQ2的L-乳酸脱氢酶基因的启动子PldhL.并通过新载体pTY36e成功表达了两种不同的外源基因:来源于维多利亚多管发光水母(Aequorea victoria)的绿色荧光蛋白基因gfp和来源于多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa 1.794)的β-葡萄糖苷酶基因bglA,其中所表达的胞内β-葡萄糖苷酶活力为4.48 U g-1(细胞干重).此系统的成功构建为后续对该菌的基因工程改造奠定了基础.
- 涂毅高秋强鲍杰
- 关键词：木质纤维素PEDIOCOCCUS启动子
- 胶原蛋白的高效制备及与明胶的鉴别被引量：8
- 2010年
- 在分析酸提取法和酶解法提取牛皮中胶原蛋白各自的优缺点后,研究并最终确定了一种提取牛皮中胶原蛋白的新方法——酸酶复合法,该法工艺简单,在相对较短的制备时间内,胶原蛋白的提取率可以达到54.5%,同时又保证了胶原蛋白的天然三螺旋结构。同时以对胶原蛋白性质的研究结果为基础,建立一种快速且准确的胶原蛋白和明胶的鉴定及质量评价方法——快速鉴定评价法,包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、丹宁酸沉淀实验、胰蛋白酶敏感性实验和体外成纤维能力实验。酸酶复合法和快速鉴定评价法对胶原蛋白提取工艺的大规模生产应用及对市场上各种产品的鉴定及品质评价具有实际意义。
- 汤俊魏东芝张国钧沈菊泉董莹周文瑜马志英沈亚领
- 关键词：胶原蛋白明胶
- 烷烃降解菌的筛选、鉴定及优势菌株的降解特性被引量：13
- 2011年
- 以正庚烷为唯一碳源,从长期受到石油污染的土壤中筛选获得可利用正庚烷的微生物14株.通过形态观察和16S rDNA序列比对,鉴定G2、G9、G14为红球菌属,G3、G27为人苍白杆菌属,G4、G7为芽孢杆菌属,G5、G10、G15、G25为节杆菌属,G16为缺陷短波单胞菌,G17、G22为嗜麦芽寡养单胞菌属.通过考察其降解烷烃的能力,确定Rhodococcus sp.G2为烷烃降解优势菌株.该菌株可代谢庚烷获得最大菌体浓度D600 nm=7.51.同时该菌对不同碳链长度的烷烃,如十二烷、十六烷、煤油和二甲苯均具有较强的降解能力,以十二烷为碳源的最大比生长速率为0.37 h-1,最高菌体浓度为D600 nm=12.00,在正十六烷中生长,最大比生长速率为0.23 h-1,在煤油中生长,最大比生长速率为0.14 h-1,在以二甲苯为唯一碳源时,D600 nm也可达到1.00左右.研究表明该菌株对于石油污染土壤的生物修复有很大的应用前景.
- 郭娜李志敏叶勤
- 关键词：红球菌RDNA石油污染土壤
- 微生物细胞脂肪酸的组成分析被引量：3
- 2011年
- 应用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对微生物细胞脂肪酸的组成进行了分析。结果表明,菌体的代谢状态分为两个时期:菌体生长期和油脂积累期;菌体细胞主要积累油酸(C18:1)、软脂酸(C16:0)和棕榈油酸(C16:1);通过发酵,最终得到的微生物油脂脂肪酸组成为:油酸(C18:1)64.80%、软脂酸(C16:0)19.90%、棕榈油酸(C16:1)10.94%、硬脂酸(C18:0)3.72%和亚油酸(C18:2)0.56%。GC-MS可以很好地用于脂肪酸甲酯的分析,具有普遍的应用意义。
- 柳志杰章辉周利花强
- 关键词：微生物细胞油脂含量脂肪酸组成气相色谱-质谱联用技术
- 葡萄糖诱导型AOX1启动子毕赤酵母突变株B5的筛选
- 2013年
- 在毕赤酵母表达系统中,AOX1启动子被广泛应用于驱动异源蛋白的表达,但是AOX1启动子的活性严格依赖于甲醇的诱导。本文成功筛选到一株毕赤酵母紫外诱变随机突变株B5,该突变株可以在葡萄糖碳源中表达Aox酶。利用绿色荧光蛋白GFP作为报告蛋白,B5在葡萄糖中具有AOX1启动子活性,但是在甘油中仍然没有AOX1启动子活性。该突变株提供了一种葡萄糖诱导型的新型AOX1启动子。
- 柏鹏蔡孟浩周祥山张元兴
- 关键词：毕赤酵母葡萄糖异源蛋白
