国家高技术研究发展计划(2007AA021401)
- 作品数：12 被引量：56H指数：5
- 相关作者：祝建波张煜星武寒雪周鹏任国栋更多>>
- 相关机构：石河子大学中国热带农业科学院中国科学院新疆理化技术研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项新疆生产建设兵团科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- CAC3基因转运肽序列和accD基因融合植物表达载体的构建被引量：5
- 2008年
- 采用PCR方法分别从陆地棉和拟南芥基因组中扩增出Accase羧基转移酶-βCT亚基编码基因accD,Accase羧基转移酶-αCT亚基编码基因CAC3的定位于叶绿体的转运肽序列。分析结果与NCBI公布的氨基酸同源性分别为100%,99%。将CAC3基因转运肽序列与accD基因进行体外重组,构建了融合植物表达载体pBI-CAC3tp-accD,为下一步作物的遗传转化打下了基础。
- 张煜星崔燕武寒雪祝建波周鹏
- 关键词：陆地棉拟南芥转运肽
- 高山离子芥(Chorispora bungeana)不同铁营养水平下NO对铁蛋白的调节
- 在高山离子芥对缺铁逆境的适应过程中 NO、NOS、NR 含量变化的结果表明,缺铁胁
- 李争艳韩艳安黎哲徐世健
- 文献传递
- 利用抑制性消减杂交PCR和cDNA芯片筛选离子芥抗冻相关基因
- 高山离子芥(ChorisporabungeanaFischct.Mcy,Chorisporabungean夕是十字花科多年生植物,分布在海拔3600～3900m
- 岳修乐金鸣关淼安黎哲
- 文献传递
- 天山雪莲遗传转化体系建立被引量：10
- 2010年
- 采用根癌农杆菌介导法进行GFP基因的遗传转化,建立了农杆菌介导天山雪莲遗传转化体系。以天山雪莲胚性愈伤组织为受体;40 mg/L的卡那霉素为胚性愈伤组织筛选质量浓度;胚性愈伤组织预培养2 d后用含100μmol/L AS和500 mg/L脯氨酸的感染工程菌液侵染25 min,能够取得比较理想的转化效果。对8株卡那霉素抗性植株进行PCR及GFP荧光蛋白检测,共获得6株阳性植株。结果表明GFP基因已整合到天山雪莲的基因组中并得到表达。
- 管岩岩任国栋郭新勇祝建波
- 关键词：天山雪莲根癌农杆菌GFP基因
- 利用Gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库被引量：8
- 2010年
- 以天山雪莲为材料,利用gateway技术构建天山雪莲cDNA表达文库。从经低温处理后的天山雪莲叶片中提取并分离mRNA,合成双链cDNA;cDNA经BP重组反应重组到入门载体pDONR222上,构建得到天山雪莲en-try cDNA文库;天山雪莲entry cDNA再经LR重组反应将雪莲cDNA重组到植物表达载体pLEELA上,从而构建了天山雪莲cDNA表达文库。结果表明:cDNA入门文库滴度达到1.2×107cfu/mL,文库总容量为4.8×107cfu。表达文库的滴度为6.9×106cfu/mL,文库总容量为2.76×107cfu,插入片段平均大小1000 bp。阳性克隆率100%。天山雪莲cDNA表达文库的建立为进一步高通量筛选天山雪莲抗寒基因奠定了基础。
- 李晨沈海涛张煜星王爱英祝建波
- 关键词：天山雪莲CDNA表达文库GATEWAY技术
- 铁胁迫对高山离子芥抗氧化系统的影响
- 以高山离子芥为材料,来探讨不同 Fe 浓度胁迫对高山冰缘植物的抗氧化机制的影响,为深入了解植物抗逆胁迫的信号转导机制提供理论依据。实验以高山冰缘植物高山离子芥的悬浮细胞为实验材料,研究了缺铁和富铁胁迫对抗氧化酶(超氧化物...
- 韩艳李争艳徐世健安黎哲
- 文献传递
- 天山雪莲根边缘细胞特异蛋白BCsp基因的克隆及转化被引量：1
- 2011年
- 根据石河子大学农业生物技术重点实验室天山雪莲cDNA文库单克隆测序结果,发现编号为123的单克隆具有1个843 bp的完整的ORF,编码281个氨基酸。B1astx分析表明该cDNA编码的蛋白与豌豆根边缘细胞特异蛋白具有很高的同源性,且具有相同的结构域,命名为BCsp(暂无登录)。以cDNA文库单克隆为模板,通过PCR克隆得到BCsp。以中间载体pUCCRNAi和植物表达载体pCAM2300-35S-Ocs为基础,成功构建了植物RNAi表达载体pCAB,转化天山雪莲愈伤组织获得转基因雪莲苗。
- 阴志刚祝建波
- 关键词：天山雪莲RNAI载体构建
- 铜绿假单胞菌脂肪酶Lipase基因的原核表达被引量：5
- 2008年
- [目的]对铜绿假单胞菌脂肪酶Lipase基因进行原核表达。[方法]利用PCR方法从铜绿假单胞菌基因组DNA中扩增得到脂肪酶基因,测定其核苷酸序列,利用基因重组技术构建脂肪酶基因的原核表达载体,加IPTG至终浓度为1.0 mmol/L诱导蛋白表达4 h,并进行SDS-PAGE电泳。[结果]从铜绿假单胞菌中克隆的脂肪酶基因成熟肽的序列,与NCBI上所递交的铜绿假单胞菌脂肪酶序列同源性很高,达99.36%。成功构建了脂肪酶基因的原核表达载体pET32a-Lip,进一步SDS-PAGE电泳结果显示目的基因得到高效表达。[结论]克隆的铜绿假单胞菌脂肪酶带有自身的信号肽,也可以在大肠杆菌中正常表达,可以用于进一步的研究。
- 张煜星武寒雪祝建波刘焕周鹏
- 关键词：铜绿假单胞菌脂肪酶原核表达
- 利用简并引物克隆天山雪莲sikPIP基因片段及RNAi载体的构建被引量：6
- 2010年
- 利用NCBI、Bloekmaker、CODEHOP、Primer Premier5.0等数据库和生物软件设计简并引物并利用简并引物RT-PCR,首次从天山雪莲中克隆到474bp的PIP基因cDNA片段,命名为sikPIP,其与GenBank中非洲杂交菊PIP基因氨基酸序列的同源性高达93.0%。从上述序列中选取200bp的序列,利用2对同尾酶将正义片段和反义片段插入到植物表达载体CAM2300-35S-Ocs中,成功构建天山雪莲RNAi载体CAM2300-35S-Ocs-sikPIP。为接下来的遗传转化,进一步探明sikPIP基因在天山雪莲中的功能奠定了基础。
- 孙辉祝建波
- 关键词：天山雪莲RNAI
- 盐芥ICE1转录因子的克隆及生物信息学分析被引量：16
- 2010年
- ICE1基因编码一个MYB类型的碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子,在冷胁迫条件下调节CBF基因的表达,能够提高植物抗寒性。利用盐芥5′EST序列和拟南芥ICE13′UTR保守序列设计引物,从盐芥基因组中克隆得到了1个2525bp的基因xhICE。生物信息学分析,表明该基因具有4个外显子,4个内含子,外显子/内含子边界符合经典的GT-AG规则。由此推导的cDNA包含一个1500bp的开放阅读框,编码500个氨基酸。与拟南芥ICE1相比,二者的内含子具有相同的类型和相对保守的位置,在核酸水平与氨基酸水平高度同源,并且具有相同的bHLH结构域。以上分析都表明,xhICE基因可能是盐芥ICE1基因,涉及抗寒相关的CBF转录调控途径。
- 轩春雷肖向文李晓波祝建波
- 关键词：转录因子表达序列标签生物信息学
