黑龙江省青年科学基金(QC07C87)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 卵巢上皮性癌患者血清和腹水中HMGA1mRNA的表达及其意义被引量：1
- 2010年
- HMGA1蛋白是高迁移率族蛋白（high mobility group，HMG）家族成员，HMG是细胞核内非组蛋白中的一组比较丰富而不均一的富含电荷的蛋白，在正常成人组织中无或仅有微量表达。由于HMGA1基因位于许多肿瘤细胞染色体断裂点的簇集区，它的异常表达与肿瘤的关系已日益引起关注。HMGA1的生物学行为类似癌基因，已逐渐被视为一种潜在的肿瘤标志物。
- 柳英兰郑建华
- 关键词：卵巢上皮性高迁移率族蛋白癌患者HMGA1腹水血清
- siRNA对卵巢上皮癌细胞HMGA1基因表达抑制的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨小分子干扰RNA对卵巢上皮癌细胞中高迁移率蛋白家族A1(High mobility group A1,HMGA1)基因表达的影响,了解HMGA1基因在卵巢上皮癌发生、发展中的作用。方法:设计并合成HMGA1siRNA,分为两组,实验组以不同浓度[(1.0,2.5,5.0)μg/L,下同]的HMGA1 siRNA转染HMGA1基因高表达的卵巢上皮癌细胞系OVCAR细胞,对照组以等量阴性对照siRNA转染OVCAR细胞,实时荧光定量RT-PCR技术检测转染后OVCAR细胞中HMGA1 mRNA的表达,HMGA1 mRNA的表达以PCR循环数阈值(Ct值)表示;蛋白印迹法测定OVCAR细胞中HMGA1蛋白的表达;显微镜观察并计数转染后存活的OVCAR细胞数。结果:HMGA1 siRNA转染OVCAR细胞后,明显下调OVCAR细胞中HMGA1 mRNA及蛋白的表达水平,实验组不同浓度HMGA1 siRNA转染后,OVCAR细胞的Ct值分别为(19.62±0.02),(20.46±0.02),(20.57±0.03)个循环数,与对照组[分别为(19.30±0.02),(19.45±0.01),(19.58±0.03)个循环数]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。上述浓度转染后,实验组OVCAR细胞的HMGA1蛋白表达水平(分别为0.75±0.02,0.56±0.02,0.19±0.03)分别与对照组(分别为1.92±0.25,1.80±0.29,1.15±0.18)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。实验组OVCAR细胞生长较对照组明显受到抑制(P<0.05)。结论:HMGA1 siRNA可以下调HMGA1 mRNA及其蛋白的表达水平,抑制细胞生长,提示HMGA1基因在卵巢上皮癌的发生、发展中具有重要作用。
- 柳英兰
- 关键词：RNA小分子干扰HMGA1卵巢上皮癌
- 稳定转染HMGA1基因的小分子干扰RNA对卵巢上皮性癌细胞生物学特性的影响被引量：5
- 2010年
- 目的观察稳定转染HMGA1基因的小分子干扰RNA（siRNA）对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞生物学特性的影响。方法实验分为3组，反义序列载体（卵巢癌细胞系OVCAR细胞转染载有HMGA1基因siRNA序列的pSilence4．1-CMV—Hs质粒）、无关序列载体（OVCAR细胞转染载有HGMA1基因无关序列的pSilence4．1-CMV—Hn质粒）和空白对照组（OVCAR细胞仅转染脂质体），3组均经抗性筛选获得稳定转染的细胞系。采用RT—PCR技术、蛋白印迹法检测3组细胞中HMGA1mRNA和蛋白的表达；四甲基偶氮唑蓝比色法观察细胞增殖情况，绘制细胞生长曲线；体外侵袭实验观察3组细胞转染前后侵袭能力的变化；裸鼠接种3组细胞后观察其成瘤能力的变化。结果（1）反义序列载体组转染前、后OVCAR细胞中HMGAImRNA表达水平分别为（86．3±2．7）％和（35．8±3，1）％，HMGA1蛋白表达水平分别为（68．6±2．8）％和（22．3±4．2）％，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；无关序列载体组和空白对照组转染前、后HMGA1mRNA和蛋白表达水平分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。（2）反义序列载体组OVCAR细胞增殖速度明显慢于无关序列载体组和空白对照组（P〈0．05）。（3）转染前、后的穿膜细胞数，反义序列载体组分别为（53±6）和（21±6）个，两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；无关序列载体组和空白对照组转染前、后的穿膜细胞数分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。（4）接种转染后的OVCAR细胞后，反义序列载体组裸鼠的成瘤时间为（6．0±0．9）d，明显短于无关序列载体组的（12．3±3．9）d和空白对照组的（13．0±2．3）d（P〈0．05）。接种5周后，反义序列载体组裸鼠的肿瘤重量和体积分别为（0．8±0．3）g和（205±34）mm^3，分别与无关序列载体组[分别为（2．1±0．4）g和（
- 柳英兰郑建华
- 关键词：小分子干扰转染
- HMGA1基因小分子RNAi对卵巢癌转移抑制的实验研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨高迁移率蛋白家族A1(high mobility group A1,HMGA1)基因小分子干扰RNA对卵巢癌转移抑制的机理。方法:RT-PCR一步法检测3种不同的卵巢癌细胞株中HMGA1、E钙黏蛋白mRNA的表达水平;设计并合成HMGA1 siRNA,转染HO8910PM细胞:半定量RT-PCR分析法观察HMGA1siRNA转染对E钙黏蛋白mRNA表达的逆转作用,及对卵巢癌细胞株体外侵袭、运动的抑制作用。结果:RT-PCR半定量分析结果显示:OVCAR-3细胞中HMGA1 mRNA表达量相对较低(0.64±0.13),而E-钙黏蛋白mRNA仅在OVCAR-3细胞中有表达;HO8910PM细胞稳定转染HMGA1 siRNA后,转染组、对照组HMGA1 mRNA表达水平分别为0.16±0.08、0.47±0.11(P<0.01),E钙黏蛋白mRNA表达水平分别为0.38±0.07、0.09±0.05(P<0.01);体外运动实验显示,跨膜细胞数转染组明显低于对照组(P<0.05);重组细胞基底膜侵袭实验显示,穿透基底膜细胞数转染组明显低于对照组(P<0.01)。结论:HMGA1基因与卵巢癌转移密切相关,HMGA1基因siRNA可上调卵巢癌细胞中E钙黏蛋白的表达,抑制卵巢癌细胞的运动和侵袭,为卵巢癌转移的基因治疗提供新的靶点。
- 柳英兰郑建华
- 关键词：卵巢癌E钙黏蛋白
