国家火炬计划(1997)
- 作品数：9 被引量：36H指数：3
- 相关作者：李六金施新猷李秦张海金昌德更多>>
- 相关机构：第四军医大学中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家火炬计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 犬副流感流行毒株的分离与鉴定被引量：3
- 2000年
- 目的 分离和鉴定犬副流感病毒 .方法 无菌抽取病犬脑脊液 ,接种到 Vero细胞 ,72 h后收集培养液进行回归动物试验 ,并采用形态学观察、血凝特性、血球吸附试验以及细胞敏感性、中和试验和交叉中和试验等方法进行系统鉴定 .结果 从病犬脑脊液中分离出一株 CPIV流行毒株 (CPIV-XN931 ) .接种 Vero细胞后 ,出现明显的细胞病变作用 ,对Vero和 MDCK敏感 ,对 2 .5 m L· L- 1豚鼠红细胞具有显著的吸附作用 ;其超微结构具有副粘病毒的基本特点 ,中和抗体效价和交叉中和抗体效价都高达 10 2 4.结论 成功分离犬副流感病毒 CPIV-
- 金昌德李六金施新猷师长宏赵世君
- 关键词：犬副流感病毒流行毒株
- 犬副流感弱毒株的分离与鉴定被引量：6
- 2000年
- 目的 分离并鉴定犬副流感弱毒株 ,供疫苗制备 .方法 根据犬副流感的血球吸附特性、细胞培养特性以及异种病毒抗血清阻断法分离病毒 (简称为 CPIV- XN4病毒 ) .并对其进行形态学、生物学特性等系统鉴定 .结果 病毒分离后其毒力可达 10 - 6 TCID5 0 .在电镜下可见较典型的犬副流感病毒形态结构特征 ;免疫电镜下见到抗体分子已被吸附在病毒颗粒表面 ;在几种细胞上盲传结果 MDCK和 Vero细胞出现程度不同的病变 (CPE) ;血清中和抗体效价 (SN)可达149.6 2 ;CPIV- XN4与国际标准毒株 D- 0 0 8之间有交叉中和反应 ;病毒接种到健康幼犬后 15 d内未发现仔犬死亡 ;攻毒实验结果 ,对照组有 2条在攻毒后 9d出现神经症状 ,第 14日衰竭而死 ,实验组动物均未出现临床症状 .结论 CPIV-
- 金昌德李六金李秦施新猷张海娄清林押宗保
- 关键词：犬副流感病毒弱毒
- 犬瘟热病毒流行株的驯化与鉴定被引量：2
- 2000年
- 目的 驯化并鉴定犬瘟热病毒疫苗候选毒株 .方法 犬瘟热流行毒株经鸡胚绒毛尿囊膜→ MA10 4→ Vero→ MDCK→ MA10 4上依次连续传 112代 ,传代过程中进行蚀斑克隆、扩增以及每代 TCID5 0 效价测定 .驯化获得 1株弱毒株 (简称CDV- XN1 1 2 ) ,然后进行电镜观察及抗原性、遗传稳定性、神经毒力等试验 .结果 分离到的犬瘟热流行毒株 ,驯化到 90代时失去对犬的致病性 ,TOID5 0 效价达 10 - 5 .5 · m L- 1 ,电镜负染观察可见此毒株具有较典型的犬瘟热形态结构 ;免疫电镜观察发现 CDV- XN1 1 2 的兔抗 Ig G与国际标准毒株 Onder stepoot病毒粒子有清晰可见的桥连支架 .其病毒的中和抗体效价(SN)达 5 12 .CDV- XN1 1 2 和 SH- CDV以及 onder stepoot- CDV等 3种毒株之间均有程度不同的交叉中和现象 .在 MA10 4细胞传代过程中未发现返祖现象 .结论 CDV- XN1 1 2
- 李六金金昌德李秦施新猷张海师长宏张志培
- 关键词：病毒驯化
- 犬细小病毒弱毒株的分离及疫苗应用被引量：9
- 2000年
- 目的 从犬四联弱毒样品中分离获得一株细小病毒(CPV)弱毒株 ,用于疫苗制备 .方法 根据犬副流感的血球吸附特性、细胞培养特性以及异种病毒抗血清阻断法分离病毒 .该病毒简称为 CPV- XN1 株 .并对犬细小病毒疫苗的免疫性和动物安全性进行了研究 .结果 病毒分离后其血凝效价(HA)值为 1∶ 10 2 4～ 1∶ 40 96或 10 7.0 TCID5 0 ;在电镜下可见较典型的犬细小病毒形态结构特征 ;免疫电镜下见到抗体分子已被吸附在病毒颗粒表面 ;病毒接种到健康幼犬后 15 d内未发现仔犬死亡 ;实验组犬均未出现临床症状 ;疫苗保存 6mo,其效价只降低一个滴度 .
- 李六金金昌德李秦押宗保施新猷张海张志培
- 关键词：犬细小病毒疫苗弱毒株
- 四种动物传代细胞染色体遗传变异率分析被引量：2
- 2000年
- 目的 分析制苗用传代细胞染色体的变异稳定性 ,以判定其质量 .方法 采用直接法制取传代细胞染色体标本 ,用常规 Giemsa染色 ,10 0 0倍光学显微镜下计数中期分裂相染色体数目 ,求出染色体变异率 (% ) ,并进行核型分析 .结果 F81为亚二倍体细胞系 ,染色体众数为 30 ;Vero是超二倍体细胞系 ,染色体众数为 73～ 75 ;MDCK属于亚四倍体细胞系 ,染色体众数为 12 5～ 135 .BHK2 1 为亚二倍体或亚四倍体细胞系 ,亚二倍体众数为 42 ,亚四倍体细胞众数为 72～ 74.四种细胞系的染色体畸变率为 0 %～ 6 % ,均较低 .结论 四种传代细胞遗传学特性相对稳定 ,各代次间无本质差异 。
- 李六金李秦施新猷张海赵世君师长宏金昌德胡春雷
- 关键词：传代细胞染色体动物
- 四种传代细胞株软琼脂抛锚能力观察被引量：1
- 2000年
- 目的 观察传代细胞在软琼脂中生长情况 .方法 将4种细胞与软琼脂混合均匀 ,铺于平皿中 ,置 37℃ ,5 0～ 10 0m L·L- 1 CO2 环境中培养 .观察细胞集落形成情况 .结果 本实验室的五株非洲绿猴肾细胞 Vero- XAYU ,Vero- XAYE,Vero- XAH,Vero- XAJN和 Vero- XAM,三株猫肾细胞 F81 -XAJU,F81 - XAM和 F81 - XAK不呈现致瘤性独立抛锚生长 ;犬肾细胞 MDCK- XAYE,MDCK- XAYU,MDCK- XAJN,MD-CK- XAJA和 MDCK- XAM五株则呈现较低的致瘤性独立抛锚生长 ;两株金黄地鼠肾细胞 BHK2 1 - XAYU和 BHK2 1 - XAM及两株非洲绿猴肾细胞 Vero- XAYU和 Vero-
- 李六金李秦施新猷张海张志培师长宏赵世君押宗保
- 关键词：克隆致瘤性
- 五种动物传代细胞系对裸鼠的致瘤性被引量：10
- 2000年
- 目的 观察 5种动物传代细胞系对裸鼠是否具有致瘤性 .方法 犬肾细胞系 (MDCK)、非洲绿猴肾传代细胞系(Vero)、猫肾细胞系 (F81 )、地鼠肾传代细胞系 (BHK2 1 )和恒河猴肾细胞系 (MA- 10 4)分别培养后 ,选择对数生长期的细胞进行消化、离心、计数后 ,制备细胞悬液 ,接种裸鼠 ,定期观察 ,通过病理组织形态学观察判定结节是否具有肿瘤的特性 .结果 Vero、F81 、MA- 10 4接种裸鼠后全部有肿块形成 ,经病理形态学检查 ,均为炎性组织 ,其致瘤率为零 .MDCK在 30代以内 ,致瘤率为零 ,第 30～ 6 6代致瘤率为 10 %～ 40 % ,BHK2 1 致瘤率为 10 0 % .结论 F81 ,Vero和 MA- 10 4属非致瘤性细胞系 ,MDCK属低致瘤性细胞系 ,但经冻融或超声波裂解后对裸鼠无致瘤性 ,BHK2 1 属致瘤性细胞系 ,其正常细胞经裂解后仍具有致瘤性 。
- 李六金李秦施新猷赵世君张海师长宏
- 关键词：致瘤性裸鼠动物
- 四种动物传代细胞染色体遗传变异率分析被引量：1
- 2000年
- 本文的目的分析制苗用传代细胞染色体的变异稳定性 ,以判定其质量。方法采用直接法制取传代细胞染色体标本 ,用常规Giemsa染色 ,10 0 0倍光学显微镜下计数中期分裂相染色体数目 ,求出染色体变异率( %) ,并进行核型分析。结果 F81为亚二倍体细胞系 ,染色体众数为 30 ;Vero是超二倍体细胞系 ,染色体众数为 73～ 75 ;MDCK属于亚四倍体细胞系 ,染色体众数为 12 5～135。BHK2 1为亚二倍体或亚四倍体细胞系 ,亚二倍体众数为 42 ,亚四倍体细胞众数为 72～ 74。四种细胞系的染色体畸变率为 0 %～6 %,均较低。结论是四种传代细胞遗传学特性相对稳定 ,各代次之间无本质差异 。
- 李六金李秦施新猷张海赵世君师长宏金昌德胡春雷
- 关键词：传代细胞染色体疫苗核型分析
- 自然冷资源在湿冷系统中的应用研究被引量：2
- 2007年
- 果蔬贮藏保鲜是保持其品质和商品价值的一种重要方法,而低温和高湿是果蔬贮藏保鲜的环境保障。我国北方冬季寒冷且漫长,具有丰富的自然冷资源,将冷资源按一定方式引入湿冷系统中,利用冬季的寒冷来维持冷库的低温条件,这将减少制冷机制冷所消耗的电能,提高经济效益。为此,对把自然冷量引入湿冷系统中结冰蓄冷进行了研究,并建立了实用的计算结冰厚度的数学模型。
- 葛克山王群
- 关键词：农业工程湿冷系统蓄冷数学模型
