国家自然科学基金(81000348)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：曹新国郭锡熔张敏史春梅季晨博更多>>
- 相关机构：南京医科大学南京医科大学附属南京妇幼保健院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金南京市医学科技发展项目更多>>
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- LYRM1基因过表达对骨骼肌细胞活性氧的影响
- 2013年
- 目的探讨LYRM1基因过表达对骨骼肌细胞活性氧簇（ROS）生成的影响。方法培养大鼠骨骼肌细胞株（L6），分别以pcDNA3．1及LYRM1-pcDNA3．1转染IJ6，构建空载对照细胞株（空载对照组）及过表达LYRM1基因细胞株（LYRM1基因过表达组），筛选、验证细胞株LYRM1的表达。诱导M分化成熟后以H2-DCFDA探针孵育，荧光显微镜下观察ROS的荧光强度，流式细胞仪定量测定ROS的生成变化。结果LYRM1基因过表达组荧光强度明显强于空载对照组；LYRM1基因过表达组荧光值为24．8933±4．4574，空载对照组荧光值为13．1512±0．7347，2组比较差异有统计学意义（t=24．12，P=0．00）。结论LYRM1基因在骨骼肌细胞中过表达可显著增加其ROS的产生，提示LYRM1基因过表达可影响细胞线粒体功能，造成线粒体损伤。
- 张敏寇春兆张春梅朱冠中季晨博郭锡熔曹新国
- 关键词：肥胖骨骼肌细胞线粒体活性氧簇
- LYRM1基因沉默对成熟脂肪细胞线粒体形态及其相关基因的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨LYRM1基因沉默对成熟脂肪细胞线粒体形态及相关基因的影响。方法以3T3-L1前体脂肪细胞为工具细胞,建立LYRM1基因沉默细胞株,以转染空载质粒的3T3-L1脂肪细胞作为阴性对照,将前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,采用油红O染色观察脂肪细胞分化状态,采用透射电镜观察成熟脂肪细胞的线粒体形态,采用荧光定量PCR技术检测成熟脂肪细胞中线粒体融合基因(Mfn)1/2 mRNA、线粒体动态相关基因(Drp)1 mRNA、线粒体分裂基因(Fis)1 mRNA的表达水平。结果 1.油红O染色诱导分化第8天的脂肪细胞,发现85%以上脂肪细胞已分化为成熟脂肪细胞,细胞形态大而圆,胞质含大量被油红O染成亮红色的脂滴,比较发现2组细胞无论脂滴的大小、数量均无显著差异。2.透射电镜观察发现2组细胞的线粒体形态基本正常,线粒体无明显肿胀、皱缩,线粒体嵴清晰可见,2组细胞间线粒体数目无明显差异。3.LYRM1基因沉默成熟脂肪细胞的Mfn2 mRNA表达水平显著高于对照组成熟脂肪细胞。4.LYRM1基因沉默成熟脂肪细胞的Mfn1 mRNA、Drp1 mRNA和Fis1 mRNA表达水平与对照组成熟脂肪细胞的表达水平无明显差异。结论 LYRM1基因沉默能够引起成熟脂肪细胞Mfn2 mRNA表达水平升高,对线粒体形态结构并无显著影响,提示LYRM1基因沉默可部分影响成熟脂肪细胞线粒体形态相关基因。
- 朱冠忠朱金改史春梅张敏曹新国郭锡熔
- 关键词：线粒体3T3-L1脂肪细胞
- LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察LYRM1基因过表达对3T3-L1脂肪细胞线粒体代谢的影响。方法体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,分别构建LYRM1基因过表达细胞株(LYRM1-pcDNA3.1/myc-His B)和空载对照细胞株(pcDNA3.1/myc-His B);实时定量RT-PCR验证转染情况;RT-PCR检测诱导分化成熟后的线粒体代谢酶HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C基因表达水平。结果 RT-PCR结果证实LYRM1质粒转染成功;与空载对照组比较,LYRM1过表达组HKI,ACC,CS,CPT1和Cyc-C mRNA表达水平均显著降低(P均<0.05)。结论 LYRM1基因过表达下调了3T3-L1脂肪细胞中线粒体的代谢关键酶基因表达水平,可能参与调节脂肪细胞线粒体的代谢。
- 林宁梁松曹新国张敏史春梅季晨博郭锡熔
