国家自然科学基金(31170602)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- 泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-1 ORF5编码蛋白的原核表达
- ＜正＞质粒（Plasmid）是能够稳定遗传的染色质外DNA元件,通常存在于细菌和真菌细胞中。典型的质粒由必要区及非必要区组成,必要区编码与质粒存活、独立复制和不相容性等相关的基因,具有高度特异性。非必要区主要编码影响宿主...
- 耿显胜林彩丽田国忠胡佳续宋传生
- 关键词：泡桐丛枝病植原体质粒原核表达
- 文献传递
- 泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶的原核表达、纯化及酶活性测定被引量：3
- 2014年
- 胸苷酸激酶是d TTP从头合成和补救途径的关键酶,催化d TMP形成d TDP,在DNA复制和生物的生存中发挥着必不可少的作用。本文在前期研究的基础上,对从泡桐丛枝(Pa WB)植原体中获得的的3个同源蛋白TMK-a-1、TMK-a-2及TMK-b与已报道的小麦蓝矮(WBD)、洋葱黄化(OY-W)植原体的TMK-a、TMK-b的氨基酸序列进行了比对和相似性分析,结果显示Pa WBPS TMK-b与WBD TMK-2和OY-W TMK-b之间的相似性分别为95.65%和99.03%;Pa WBPS TMK-a-1与Pa WBPS TMK-a-2的相似性为90.57%,且二者与WBD TMK-1和OY-W TMK-a之间的相似性为87.32%-94.26%;而Pa WBPS、WBD、OY-W三种植原体的TMK-a与TMK-b之间的相似性仅为22.22%-25.95%。构建了Pa WBPS TMK-b、TMK-a-1、TMK-a-2的p ET28a原核表达载体,对Pa WBPS TMK-b、TMK-a-1、TMK-a-2 3种蛋白进行了原核表达,经Ni-NTA柱纯化后,利用双酶法进行了胸苷酸激酶催化活性测定,结果表明,Pa WBPS TMK-b具有较高的胸苷酸激酶活性,为85.96±0.74 U·mg-1,而Pa WBPS TMK-a-1和TMK-a-2几乎没有胸苷酸激酶活性。本文为进一步研究胸苷酸激酶在植原体繁殖过程中的作用机理奠定了基础。
- 宋传生胡佳续林彩丽任争光耿显胜田国忠
- 关键词：原核表达酶活性
