目的研究免疫共刺激分子OX40配体(OX40 ligand,OX40L)在小胶质细胞上的表达,探讨Nogo-66蛋白刺激小鼠视网膜小胶质细胞株N9表达细胞膜黏附分子OX40L的可能性。方法根据不同浓度(250μg·L-1、500μg·L-1、1000μg·L-1、2000μg·L-1)的Nogo-66蛋白细胞培养液将实验组分为1、2、3、4组。应用免疫细胞化学方法,鉴定小胶质细胞在不同浓度的Nogo-66蛋白细胞培养溶液(实验组)中的表达情况,并与无刺激因子的细胞培养液(对照组)中小胶质细胞OX40L表达对比,Image-Pro Plus Version6.0图像分析软件处理,比较激活后小胶质细胞OX40L表达差异。结果Nogo-66蛋白质作为刺激因子处理后的小胶质细胞表现激活状态下的典型形态,细胞突起减少,体积明显增大,相同倍率拍照后图像分析可知,对照组细胞相对平均体积为(93.0020±17.0101)pixel,实验1、2、3、4组相对平均体积分别为(134.2258±23.5828)pixel、(242.7430±72·9439)pixel、(228.1760±37.1582)pixel、(204.7210±43.4950)pixel,与对照组相比,差异均有显著统计学意义(P均<0.001),实验1组与2、3、4组相比差异亦有显著统计学意义(P均<0.01)。对照组OX40L表达的细胞体积比为0.12%,实验1、2、3、4组分别为34.30%、58.91%、60.25%、59.71%,与对照组相比,差异均有显著统计学意义(P均<0·01)。结论Nogo-66蛋白能够刺激小胶质细胞处于激活状态,表达OX40L,从而可能进一步影响中枢神经系统疾病治疗的临床前研究。
