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SP600125对周期牵张致A549细胞上调白细胞介素-8表达的影响被引量：1: 2006年; 目的探讨SP600125对周期牵张致A549细胞上调白细胞介素-8(IL-8)表达的影响。方法将A549细胞以密度为5×105种植于特制的硅胶树脂膜上,DMEM培养基培养48 h后,置于细胞牵张仪行周期性牵张。牵张组:牵张强度为细胞体积扩大15％,牵张周期:30个周期／min,牵张时间分别为0(未进行牵张)、15、30、60、120 min。预防处理组:将JNK抑制剂SP600125加入培养基,终浓度为50μmmol／L孵育30 min后再行上述处理,收集细胞和培养液,提取细胞中的总蛋白和RNA,用RT-PCR方法测定细胞IL-8 mRNA表达,用Western blot测定细胞JNK和磷酸化JNK(p-JNK)的水平,采用ELISA法测定细胞培养液中IL-8浓度。结果周期牵张30～120 min可导致牵张组A549细胞IL-8 mRNA、IL- 8浓度增加,且呈时间依赖性,周期牵张120 min时达高峰,p-JNK水平升高;SP600125可减弱周期牵张导致的上述改变(P<0．05)。结论周期牵张致A549细胞IL-8的上调与JNK的激活有关。; 王月兰刘玉华姚尚龙; 关键词：白细胞介素8 丝裂原激活蛋白激酶类

不同年龄大鼠呼吸机相关性肺炎肺组织β-防御素-2表达水平的实验研究: 2006年; 目的本研究观察老年和成年大鼠呼吸机相关性肺炎(VAP)模型中肺组织β-防御素-2(βD-2)的基因和蛋白质表达水平。方法58只健康清洁级雄性SD大鼠被随机分成老年组和成年组。每只大鼠机械通气24 h后,从气管导管中注入铜绿假单胞菌0.2 m l复制VAP模型。采用RT-RNA和W estern b lot技术测定实验βD-2 mRNA和蛋白质表达的变化。结果老年组重度肺组织病理变化明显高于成年组;老年组中βD-2基因和蛋白质的表达上调的水平在3 h后时段显著低于成年组(P<0.05)。结论老年较成年大鼠在VAP中β-防御素-2基因表达上调水平的下降更明显,可能是老年易发生VAP的重要因素之一。; 王立奎武庆平姚尚龙; 关键词：Β防御素

机械通气对大鼠肺组织早期生长因子-1、C-jun和白介素-1β表达的影响被引量：10: 2005年; 目的探讨机械通气对大鼠肺组织早期生长因子-1(Egr-1)、C-jun和白介素-1β表达的影响。方法清洁级雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组(A组)和机械通气30、60、90、120 min组 (B、C、D、E组),每组8只。腹腔注射3％戊巴比妥35 mg／kg麻醉后,行气管切开置管,B-E组采用小动物呼吸机行机械通气,潮气量42ml／kg,呼吸频率40次／min,吸呼比为1:2。吸入氧浓度为21％,A 组气管切开置管不做机械通气。分别以RT-PCR、免疫组化和HE染色方法测定肺组织Egr-1、C-jun和 IL-1β的mRNA和蛋白表达,并观察肺组织病理学变化,同时行动脉血气分析。结果与A组比较,C 组EgR-1、C-jun的mRNA和蛋白表达增加,D、E组Egr-1、C-jun、IL-1β的mRNA和蛋白表达均增加(P< 0．05)。与B、C组比较,D、E组上述三种mRNA及蛋白表达均增加(P<0．05或0．01),且E组上述三种蛋白表达高于D组(P<0．05)。光镜下A、B组肺泡结构未见异常,C组肺泡腔内略有渗出、血管周围有少量炎症细胞;D、E组上述病理改变加重且E组更严重。结论机械通气60 min可诱发肺组织 Egr-1、IL-1β和C-jun表达上调,且随通气时间的延长、肺病理性损伤的加重,其表达量也在增加。; 王月兰姚尚龙; 关键词：白细胞介素1

β-防御素-2在呼吸机相关性肺炎中的表达被引量：12: 2005年; 目的观察机械通气大鼠铜绿假单胞菌(PA)肺部感染前后肺组织β防御素2(BD2)基因和蛋白质表达的变化,探讨肺组织BD2在呼吸机相关性肺炎(VAP)发生机制中的作用。方法58只健康清洁级雄性成年SD大鼠随机分为对照组和机械通气组。机械通气组大鼠采用经口气管插管机械通气24h后,经气管内注入PA复制肺部感染模型。对照组中大鼠无需机械通气,直接气管内接种PA复制肺部感染模型。采用逆转录聚合酶链反应(RTP-CR)和蛋白免疫印迹(Westernblot)技术测定大鼠BD2基因和蛋白质表达的变化。结果机械通气组重度肺组织病理变化大鼠占47.6%,明显高于对照组的28.5%(P<0.05)。机械通气组中BD2基因和蛋白质表达水平的上调在3h后显著低于对照组(P均<0.05)。机械通气组接种PA6h后血培养阳性率为40.0%,显著性高于对照组的6.7%(P<0.05)。机械通气组支气管肺泡灌洗液中PA培养阳性率持续为100.0%,而对照组从3h的100.0%降至24h的33.3%(P<0.05)。对照组存活率为80.0%,机械通气组为40.0%,两组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论BD2基因和蛋白质表达上调水平的下降可能与VAP的发生和发展有关。; 武庆平姚尚龙方向明; 关键词：呼吸机相关性肺炎 Β-防御素-2 逆转录一聚合酶链反应肺组织病理变化成年SD大鼠气管内注入

机械通气下Ly294002对大鼠不同组织肿瘤坏死因子-α和巨噬细胞炎性蛋白-2的影响被引量：1: 2005年; 有研究表明,磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)可以通过不同途径影响中性粒细胞的呼吸爆发、酪氨酸激酶激活、NF-кB,参与肺损伤的发生与发展[1-4].但其对机械通气以及合并内毒素(LPS)致肺损伤的作用机制尚未明确.本研究拟通过观察PI3K抑制剂(Ly294002)对机械通气及气管内注入LPS时大鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)、血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)水平的影响,探讨PI3K在机械通气中的作用及机械通气致肺损伤(VILI)的可能机制,为临床提供参考.; 姚尚龙王月兰; 关键词：巨噬细胞炎性蛋白-2 大鼠肺组织机械通气 LY294002 磷脂酰肌醇3激酶

呼吸机相关性肺炎动物模型的建立被引量：9: 2005年; 武庆平姚尚龙袁世荧; 关键词：铜绿假单胞菌呼吸机相关性肺炎气管插管机械通气

通气时间对呼吸机相关肺炎中β-防御素-2表达的影响: 2005年; 目的本研究观察大鼠肺组织β-防御素-2(BD-2)的基因和蛋白质在24h和48 h两种机械通气时间的呼吸机相关肺炎(VAP)模型中表达水平.方法健康清洁级雄性成年SD大鼠随机分成24h通气组(n=29)和48 h通气组(n=29).两组大鼠分别在机械通气24h和48h后,从气管导管中注入1 moL/L浓度的铜绿假单胞菌0.2 mL复制VAP模型.采用RT-PCR和Western blot技术测定实验大鼠BD-2 mRNA和蛋白质表达的水平变化.结果 48h组重度肺组织病理变化为66.7%,显著性高于24h组的28.6%(x2=6.11,P=0.013).48 h组细菌血培养阳性率为62.5%,明显高于24h组的33.3%(x2=4.09,P=0.043).24h组5 d存活率为60%,48h组为0(x2=4.29,P=0.038).两组接种细菌3 h内BD-2 mRNA表达差异无显著性意义,24h组6 h后表达上调水平显著高于48h组,并于12～24h时BD-2基因表达水平达峰值.结论随着机械通气时间延长,VAP大鼠中BD-2基因和蛋白质表达上调水平的明显下降,可能是更长时间机械通气易发生VAP的重要因素之一.; 武庆平姚尚龙; 关键词：肺炎人工通气 Β-防御素-2

磷脂酰肌醇-3-激酶参与过度机械通气诱导的核因子-κB激活被引量：5: 2005年; 目的通过观察磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂(ly294002)对不同潮气量机械通气中NF-κB活性的影响,探讨机械通气肺损伤发生机制。方法40只SD大鼠随机分为对照组(A组)、正常通气组(B组)、过度通气组(C组)、正常通气+ly294002组(D组)、过度通气+ly294002(E组),每组8只。分别采用Western blot测定磷酸化蛋白激酶B(Akt)的活性、免疫组化观察I-κBβ、NF-κB在肺细胞中的分布及表达;电泳迁移率测定NF-κB的DNA结合活性。结果C组大鼠肺组织中Akt的磷酸化水平较其他各组增加(P<0.05),NF-κB的DNA结合活性较A、D、E组显著提高(P<0.01),肺组织中I-κBβ表达显著降低,NF-κB表达增加,且主要表达于肺内巨噬细胞和肺上皮细胞。ly294002可明显抑制Akt磷酸化,降低NF-κB的活性及在肺组织中的表达。结论PI3K参与了过度机械通气导致的NF-κB激活。; 王月兰姚尚龙; 关键词：机械通气磷脂酰肌醇-3-激酶核因子-ΚB 磷脂酰肌醇-3-激酶 NF-ΚB激活机械通气核因子-ΚB DNA结合活性

β-防御素-2在机械通气相关性肺炎发病机制中的作用被引量：7: 2005年; 目的观察铜绿假单胞菌(PA)机械通气相关性肺炎(VAP)前后肺组织β-防御素-2(BD-2)基因和蛋白质表达的变化,探讨肺组织的BD-2在机械通气相关性肺炎发病机制中的作用。方法90只健康清洁级雄性成年SD大鼠随机分成对照组、机械通气组(MV)和高盐抑制组(HS)。MV组中大鼠机械通气24 h后气管内注入PA复制肺部感染模型。分别于接种细菌后8个时间点取3只大鼠处死,取肺组织进行病理学检测和测定大鼠肺组织中BD-2基因和蛋白质表达的变化。结果MV组中BD-2基因和蛋白质的表达水平的上调在3 h后各时段均显著低于对照组(均P<0.05)。MV组支气管肺泡灌洗液(BALF)、血细菌培养阳性率和重度肺部感染率均高于对照组(均P<0.05)。HS组PA血细菌培养阳性率为76.2%,明显高于对照组和MV组(均P<0.05)。对照组5 d存活率为100%,MV组为50%,HS组为0。结论BD-2在机体呼吸系统中发挥重要抗感染作用,机械通气引起BD-2基因表达上调水平的下降可能与VAP的发生和发展有关。; 武庆平刘萍姚尚龙; 关键词：Β-防御素-2 基因表达肺炎机械通气

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国家教育部博士点基金(20020487063)

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