国家自然科学基金(81170316)
- 作品数：17 被引量：54H指数：5
- 相关作者：潘兴华朱光旭周芳庞荣清白盈盈更多>>
- 相关机构：成都军区昆明总医院昆明医科大学第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划云南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- DNA甲基化检测在结直肠癌诊断中的应用被引量：6
- 2016年
- 结直肠癌（colorectal cancer，CRC）是全球男性第3、女性第2常见的恶性肿瘤，死亡率占全球癌症的第4位，每年约有69．4万人死于此病［1］。在中国，CRC的发病率呈现上升趋势，现已高居男女肿瘤发病率的第5位和第4位［2］。对于早期 CRC患者，多数可以治愈，5年生存率可达90％，而对于晚期患者则不足10％［3］，然而多数 CRC患者确诊时已到中晚期，早期 CRC 缺乏典型临床症状不易察觉，因此有效的早期诊断方法可以降低CRC的发病率和病死率以及提高患者生存率。目前，侵入性的结肠镜检查和粪便隐血试验（Fecal occult blood teats，FOBT）是CRC诊断的主要手段，但是 FOBT缺乏特异性，难以满足结直肠癌诊断的要求。结肠镜检查的特异性可达95％，但属于侵入性检查，并且有高风险的并发症，难以在人群中进行大规模的筛查［4］，因此急需方便、准确的生物标志物应用于CRC的诊断。研究发现，在肿瘤形成过程中，表观遗传学改变可能比经典遗传学改变更早发生［5］。DNA甲基化作为表观遗传修饰的重要方式，与CRC的发生发展关系密切，且在癌症的早期阶段就已发生，使其可能成为CRC早期诊断的新型生物标记物。
- 白盈盈朱光旭潘兴华
- 关键词：DNA甲基化结直肠癌甲基化检测结肠镜检查
- 骨髓源性内皮祖细胞与内皮细胞共培养促进其向成熟内皮细胞分化的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨共培养的内皮细胞对内皮祖细胞向成熟内皮细胞分化的影响。方法:分离1～2个月龄,SD大鼠股骨髓,个核细胞(MNCs),MNCs,Dil-ac-LDL与FITC-UEA-1荧光双染鉴定内皮细胞的特性。应用贴块法培养大鼠腹主动脉的内皮细胞,vWF免疫组化染色进行鉴定。采用Transwell培养板,上、下室分别加入内皮祖细胞和内皮细胞,15%胎牛血清的NO.2 DMEM/F12培养液培养14 d,倒置相差显微镜观察培养内皮祖细胞的形态。RT-PCR检测eNOS、vWF mRNA,流式细胞术检测CD31及KDR的表达。结果:荧光双染显示培养的单个核细胞具有内皮祖细胞特性;共培养的内皮祖细胞呈短梭型、铺路石状,培养至4 w时有复杂的网状结构形成。RT-PCR检测显示,eNOS及vWF mRNA表达均较对照组显著增加(P<0.05)。流式细胞术分析表明,共培养组的内皮祖细胞CD31及KDR的表达,也显著高于对照组(分别为P<0.05及P<0.01)。结论:与内皮细胞共培养可促进内皮祖细胞向成熟内皮细胞分化。
- 朱光旭宋明宝潘兴华黄岚吕燕波庞荣清康华利
- 关键词：内皮细胞内皮祖细胞骨髓细胞分化
- 人脐带间充质干细胞对胶质瘤细胞株U87上皮间质转化及皮下荷瘤能力的影响被引量：3
- 2016年
- 目的研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)体外模型中对胶质瘤细胞株U87荷瘤能力及其上皮间质转化(EMT)的影响及其可能机制。方法建立裸鼠皮下荷瘤模型,观察hUCMSCs与U87共培养组和U87单独荷瘤组皮下荷瘤能力的差别,免疫组化检测EMT相关基因组织表达水平,Western Blot检测EMT相关蛋白MMP2,MMP7,MMP9,E-cadherin(E-cad),N-cadherin(N-cad)和Vimentin(VIM)表达情况,q PCR检测EMT相关基因(mmp2,mmp7,mmp9,E-cad,N-cad和vimentin)转录水平。Transwell和Matrigel分别检测hUCMSCs对U87转移能力的影响,两组间比较拟采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果皮下荷瘤结果提示hUCMSCs与U87共培养组皮下荷瘤率高于U87单独荷瘤组,且肿瘤体积较大,RT-PCR结果提示:共培养组和单独培养组相比,E-cad水平下调,N-cad和VIM上调,且基质金属蛋白酶家族MMP2,MMP7,MMP9也有不同程度上调。Western blot结果提示:在蛋白水平共培养组和单独培养组相比,E-cad水平下调2.1倍,N-cad和VIM上调1.0倍,MMP9上调0.9倍;E-cad,N-cad,VIM以及MMP2变化结果与RT-PCR结果一致。免疫组化结果进一步验证hUCMSCs能促进U87表达Ki67,E-cad与N-cad低表达。Transwell和Matrigel实验结果提示hUCMSCs能够促进U87细胞的转移侵袭能力。结论 hUCMSCs能通过促进U87高表达EMT相关基因和增殖相关基因Ki67,从而促进胶质瘤细胞株U87皮下肿瘤形成并发生上皮间质转化,提示hUCMSCs临床应用中应该充分考略受试者是否是潜在胶质瘤患者。
- 刘高米洋和法莲陈慧芬陆容李自安何洁赵晶潘兴华
- 关键词：间质干细胞胶质瘤
- 长链非编码RNA对结直肠癌潜在诊断价值的研究进展被引量：11
- 2018年
- 结直肠癌是常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率均有上升趋势。有效的诊断方式是提高结直肠癌患者生存的关键,但是现有的检测方法,如结肠镜、粪便潜血试验等,在结直肠癌诊断中均有局限性。长链非编码RNA是近年来的研究热点,长链非编码RNA的异常表达与结直肠癌的发生、发展密切相关。该文就长链非编码RNA与结直肠癌的诊断进行一简要综述。
- 白盈盈朱光旭潘兴华
- 关键词：长链非编码RNA结直肠癌生物学标记物
- 半乳糖凝集素-3在2型糖尿病及其并发症中的诊断进展
- 2015年
- 半乳糖凝集素（galectins）是一个由进化保守的氨基酸序列构成的古老凝集素家族,可识别β-半乳糖苷结构,至今在哺乳动物中已发现14种类型,其均包含一个大约130个氨基酸的糖识别结合区域（CRD）,按照CRD的数目及结构不同可将其分为3个亚型,包括原型组、嵌合体组及串联重复组,而半乳糖凝集素-3（galectin-3）是脊椎动物中唯一的嵌合体型,既有凝集素区域又有非凝集素区域,
- 周芳朱光旭潘兴华
- 关键词：半乳糖凝集素32型糖尿病2型糖尿病并发症
- 血清半乳糖凝集素3在2型糖尿病并发冠状动脉疾病患者中的诊断价值被引量：5
- 2016年
- 目的探讨2型糖尿病(type 2diabetes mellitus,T2DM)并发冠状动脉疾病(coronary artery disease,CAD)患者血清中半乳糖凝集素(Galectin-3)的表达情况、与超敏C反应蛋白(hypersensitive C reactive protein,hs-CRP)的相关性及其诊断价值。方法采用病例对照研究,选择成都军区昆明总医院CAD患者(CAD组)100例、T2DM并发CAD患者(T2DM-CAD组)100例、T2DM患者(T2DM组)100例及健康对照者(Control组)100例,采集临床标本,分别应用酶联免疫法、免疫比浊法测定Galectin-3和hs-CRP的含量,同时采用酶法检测血糖(Glu)、尿素(BUN)、肌酐(CREA)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的浓度,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则运用直接法检测。统计学分析采用K-S检验,Levene方差齐性检验,Kruskal-Wallis方差分析,Nemenyi检验,χ2检验,Pearson相关分析及ROC曲线。结果 T2DM-CAD组Galectin-3和hs-CRP的水平分别为(10.523±4.552)mg/L和(9.60±3.75)mg/L,均明显高于CAD组的(7.417±1.797)mg/L、(5.57±2.21)mg/L和T2DM组的(6.515±1.499)mg/L、(5.23±2.51)mg/L,差异有统计学意义(P均<0.01);T2DM-CAD组的Galectin-3与hs-CRP呈正相关(r=0.724,P<0.001);在T2DM-CAD组/T2DM组,ROC曲线下面积Galectin-3检测为0.859,hs-CRP检测为0.842,差异无统计学意义(Z=0.245,P>0.05)。结论 Galectin-3对于T2DM是否并发CAD具有与hs-CRP相似效能的诊断价值,为临床诊断提供一种新的生物学标记。
- 周芳王金祥王珂朱向情庞荣清李雪梅朱光旭潘兴华
- 关键词：半乳糖凝集素3超敏C反应蛋白
- Notch1基因沉默抑制骨髓源性脂肪祖细胞向成熟脂肪细胞分化
- 2016年
- 目的探讨Notch1对骨髓源性脂肪祖细胞（BMAPCs）向脂肪细胞分化的影响。方法无菌取sD大鼠股、胫骨骨髓制作细胞悬液，差速贴壁法培养，流式分析检测细胞表面标志表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（real-timeqPCR）检测脂肪相关基因和Notch信号分子表达。Notch1基因沉默实验分为空载体组和Notch1小RNA干扰组。Westernblotting检测干扰效率；STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit行细胞成脂诱导。结果BMAPCs表达CD34、CD44、CD45及CD90，且表达6种脂肪相关基因及Notch信号分子；成脂诱导促进Notch1mRNA表达（P〈0．01）；Notch1小RNA干扰抑制Notch1蛋白表达（P〈0．05）。Notch1小RNA干扰组的Cebpa、Lpl和Ppqγ、Slc2a4与Fabp4 mRNA表达均较对照显著降低，而pread1mRNA表达显著增加（P〈0．05-P〈0．01）；Notch小RNA干扰显著抑制脂肪细胞百分率（P〈0．05）。结论Notch1基因沉默抑制BMAPCs向成熟脂肪细胞分化。
- 王金祥王小华白盈盈周芳蔡学敏刘菊芬李自安余争平朱光旭潘兴华
- 骨髓单个核细胞体外培养诱导分化为脂肪细胞
- 2016年
- 目的体外培养骨髓单个核细胞（BMNCs），并观察其成脂肪细胞分化能力。方法无菌取SD大鼠骨髓制作细胞悬液，差速贴壁法培养第三次贴壁细胞，传代扩增，取3-5代细胞用于实验。流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45、CD90、CD144（VE—cadherin）和血管内皮细胞生长因子受体．2（KDR）表达；STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力。结果通过差速贴壁法可获得相对单一的BMNCs，流式细胞分析表明培养的BMNCs细胞表达CD34、CD44、CD45及CD90等表面标志，但不表达CDl44和KDR；在未经诱导的情况下，培养的BMNCs能自发分化为脂肪细胞；培养BMNCs成脂肪细胞诱导后在第3、5、7d，成脂率分别为（22．4±3．8）％、（55．6±11．4）％以及（82．4±17．7）％，显著高于诱导培养第1d[（1．3±1．1）％，P〈0．011。结论骨髓单个核细胞体外培养后可以诱导分化为脂肪细胞。
- 周芳王金祥李自安刘菊芬白盈盈杨建勇朱光旭潘兴华
- 关键词：骨髓单个核细胞间充质干细胞脂肪细胞分化
- 骨髓源性脂肪祖细胞培养及生物学特性研究
- 2016年
- 目的体外培养骨髓脂肪祖细胞（BMAPs），比较其与骨髓间充质干细胞（BMSCs）在形态、表型特征、成脂肪分化能力以及脂肪分化相关基因表达方面的差异。方法无菌取1-2月龄雄性SD大鼠的股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液，EBM-2（含20％FBS、15μg／ml ECGs）培养基差速贴壁法培养第3次贴壁细胞，取传代至第3-5代细胞用于实验。流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45及CD90表达；STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力；实时荧光定量聚合酶链式反应（real-timeq PCR）检测过氧化物酶体增殖激活受体γ（Ppaγ）、脂肪酸结合蛋白4（Fabp4）、脂蛋白脂肪酶（Lpl）、CCAAT／增强子结合蛋白α（cebpa）、葡萄糖转运蛋白4（Slc2a4）及前脂肪细胞因子1（preadl）mRNA表达水平。结果传代接种培养24h后，BMSCs形态上呈宽大、扁平状，而BMAPs大部呈长三角状；接种48h后，BMSCs排列更为有序，而BMAPs多交织成网状。BMAP表达CD34、CD44、CD45及CD90，BMSC表达CD44及CD90，未检测到CD34和CD45表达。诱导培养后第4d，BMAPs成脂率显著高于BMSCs（P〈0．01）；到第8d。BMAPs成脂率为（87．2±1L67）％，BMSCs成脂率为（18．5±10．2）％，差异具有统计学意义（P〈0．01）。诱导分化后第4、8d，Cebpa、Fabp4、Lp1、Ppaγ和Slc2a4mRNA在BMAPs表达水平均显著高于BMSCs（P〈0．01）。结论本实验获得了1种具有干细胞的生物学特性，高表达脂肪分化相关的特异性基因，可高效均质性地分化为脂肪细胞的BMAPs。
- 朱光旭王金祥周芳李自安刘菊芬阮光萍白盈盈潘兴华
- 关键词：骨髓脂肪细胞
- 骨髓源性脂肪祖细胞培养及生物学特征研究
- 目的体外培养骨髓脂肪祖细胞(BMAPs),比较其与骨髓间充质干细胞(BMSCs)在形态、表型特征、成脂肪分化能力以及脂肪分化相关基因表达方面的差别。方法确无菌取1~2月龄雄性SD大鼠的股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液,EBM-...
- 朱光旭王金祥周芳李自安刘菊芬阮光萍白盈盈潘兴华
- 关键词：骨髓脂肪细胞分化
