广东省自然科学基金(4020381)
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
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- 海水环境创伤弧菌感染的病理学研究被引量：8
- 2007年
- 目的观察总结海水环境中感染创伤弧菌（vibrio vulnificus，Vv）后局部组织和器官的病理学特点，为临床Vv感染的诊治提供一定的实验依据。方法128只SPF级昆明小鼠，随机分成4组，每组32只，分别为海水Vv菌液浸泡组（A组）、等渗盐水Vv菌液浸泡组（B组）、单纯无菌海水浸泡组（c组）以及单纯无菌致伤组（D组）。每组又随机分成0，6，12，24h4个不同时间组，每组8只。D组小鼠仅无菌致伤，A、B、C组小鼠在无菌致伤后按分组设计均浸泡于相应液体中45～60min。于不同时段对各组局部肌组织及主要脏器组织进行取材、制片、HE染色和观察；采鼠尾血进行Vv的分离培养。结果A组创伤组织的损伤最为严重：0h时，可见肌纤维变性、溶解和断裂，但炎症反应不明显；12h时肌组织溶解坏死更加明显，肌间隙增宽，渗出及出血明显，并伴有大量中性粒细胞浸润；24h时，肌组织大片溶解坏死，微脓肿形成。总体来讲，Vv感染的A、B两组要比未感染的c、D两组病变严重，而组织修复过程也要缓慢。海水菌液浸泡组脱离浸泡后24h时仍无好转趋势，并且该组部分小鼠Vv血培养结果为阳性。Vv血培养阳性的小鼠其主要脏器也出现不同程度的损伤，以肺和肾脏的广泛出血性损伤为主。结论在海水环境中Vv经由皮肤伤口侵入后，其伤口往往表现为感染早、发展快且病变严重的特点。感染组织病理学特点为组织大片的溶解坏死和大量中性粒细胞浸润并伴有脓腔形成；Vv可经伤口人血，引发败血症，并导致小鼠肺、肾等多脏器的损伤。
- 郑晶申洪陈清
- 关键词：弧菌感染病理学
- 创伤弧菌紫外线抗性观察
- 2009年
- 目的:观察创伤弧菌对紫外线(UV)的抵抗力,确定紫外线有效灭杀创伤弧菌的时间,为创伤弧菌消毒提供实验依据。方法:创伤弧菌ATCC27562、大肠杆菌ATCC25922悬液及平板在强度值达90μW/cm2的紫外线照射不同时间后,进行培养并定量测照射前后的活菌浓度,统计杀菌率,绘制照射前后灭活曲线(t-Δlg)。结果:创伤弧菌在强度值达90μW/cm2的紫外线照射下,15min后定性培养为阴性,定量检测1min平均灭活对数值LIV悬液法为4.37±0.13、平板法为5.10±0.19,平均杀菌率悬液法为(99.99±0.01)%、平板法为(99.99±0.05)%,照射15min后无菌存活。大肠杆菌在照射1min后达到消毒水平,10min后达到无菌状态。结论:创伤弧菌经强度值达90μW/cm2的紫外线照射1min达到消毒水平(LIV≥4.00),照射15min创伤弧菌能被迅速有效灭杀。
- 王贵明陈清申洪
- 关键词：创伤弧菌紫外线抗性
- 创伤弧菌对3种消毒剂抗性的观察被引量：4
- 2009年
- 目的观察创伤弧菌ATCC27562对常用消毒剂的抵抗力,为创伤弧菌消毒提供实验依据。方法采用DGHM试验测定戊二醛、过氧乙酸及乙醇对创伤弧菌的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),定性悬浮试验检测其对创伤弧菌的最快有效杀菌时间。结果戊二醛的MIC为0.31g/L、MBC为10.00g/L,过氧乙酸的MIC为0.04g/L、MBC为0.31g/L,乙醇的MIC为4.69%、MBC为37.50%;20g/L戊二醛作用10s杀灭创伤弧菌,5g/L过氧乙酸作用10s创伤弧菌被杀灭,75%(V/V)乙醇作用于创伤弧菌60s将其有效杀灭。结论创伤弧菌ATCC27562对常用消毒剂抗性较弱,常用浓度能将其迅速有效杀灭。
- 王贵明陈清申洪
- 关键词：创伤弧菌消毒剂最小抑菌浓度最小杀菌浓度
- 创伤弧菌攻击对人脐静脉内皮细胞系的影响被引量：2
- 2010年
- 背景:创伤弧菌感染后患者死亡率高达50%以上,且感染后大量创伤弧菌侵入血液之中,而血管内皮细胞是阻挡创伤弧菌进入血管的第一道屏障。目的:观察创伤弧菌对人脐静脉内皮细胞增殖能力和细胞形态的影响。方法:将对数生长期的人脐静脉内皮细胞消化后,调整细胞浓度至5×108cfu/L,依培养基中创伤弧菌细菌浓度不同分为5个组:104,105,106,107cfu/L创伤弧菌组和对照组。对照组不加创伤弧菌,仅用体积分数为10%胎牛血清DMEM培养基培养。锥虫蓝拒染法检测细胞存活率、MTT法观察创伤弧菌对人脐静脉内皮细胞增殖的影响,及光镜下观测细胞面积、周长、细胞核的面积、核浆比以及形状不规则指数。结果与结论:随着创伤弧菌作用浓度和时间的增加,人脐静脉内皮细胞的增殖能力逐渐减弱,攻击组细胞的面积和周长,细胞核的面积以及核浆比都比对照组明显增大,形状不规则指数比对照组更偏离。提示创伤弧菌对体外培养的人脐静脉内皮细胞系的增殖有明显的抑制作用,其抑制能力与创伤弧菌作用的浓度和时间有关。
- 李艳陈清申洪
- 关键词：人脐静脉内皮细胞创伤弧菌增殖体视学参数
- 创伤弧菌快速检测试纸条的研制被引量：15
- 2011年
- 目的研制一种敏感、特异、快速的免疫试纸条,用于创伤弧菌检测。方法用创伤弧菌（ATCC27562）菌体抗原免疫家兔,制备兔抗创伤弧菌多克隆抗体;采用柠檬酸盐还原法制备胶体金颗粒并标记多克隆抗体,纯化后滴加在玻璃纤维素膜上;在硝酸纤维素膜上包被兔抗创伤弧菌多克隆抗体和羊抗兔IgG,分别作为检测线和质控线;将处理后的硝酸纤维膜、玻璃纤维素膜与样品垫、吸水纸组装成试纸条,4℃保存并定期检测;设阳性及阴性对照,对本试纸条检测的灵敏度、特异性进行检测。结果将试纸条插入样品溶液中,20~30min内即可显示结果,其检测灵敏度为2×106CFU/ml;特异性检测显示本试纸条与溶血性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌等12种菌株均无交叉反应;稳定性检测表明该试纸条可4℃保存4个月。结论本研究构建出创伤弧菌多克隆检测试纸条,具有较高的灵敏度和较好的特异性,简便,20~30min即可获得检测结果,可用于创伤弧菌的快速检测。
- 严智敏郑晶陈清申洪
- 关键词：创伤弧菌胶体金免疫层析试纸条
