国家自然科学基金(81100493)
- 作品数：8 被引量：33H指数：4
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- 脂肪源性干细胞移植对顺铂诱导的小鼠急性肾损伤的影响被引量：2
- 2012年
- 脂肪源性干细胞（ADSC）具有取材方便、对供体损伤小，以及少量组织即可获取大量干细胞等优点。我们的前期研究表明，ADSC可减轻肾小管上皮细胞结构的损伤，抑制细胞凋亡，而将低氧诱导因子（HIF—1α）转染ADSC后其作用更为明显。本研究观察ADSC移植对急性肾损伤小鼠模型肾功能、肾组织学等变化的影响。
- 王巍巍王葳姜燕张金元
- 关键词：脂肪源性干细胞急性肾损伤干细胞移植顺铂肾组织学
- 黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞对顺铂诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响被引量：7
- 2013年
- 目的观察黄芪甲苷（Ast）孵育后的脂肪源性干细胞（ADSC）对顺铂诱导的肾小管上皮细胞（HKC）损伤的影响。方法HKC被分为4组：（1）对照组；（2）顺铂组；（3）ADSC与损伤HKC共培养组（ADSC＋HKC组）；（4）Ast孵育ADSC后与损伤HKC共培养组（Ast＋ADSC＋HKC组）。分别用不同浓度的顺铂（2．5、5、10、20μmol／L）诱导HKC6、24h，建立肾小管细胞损伤模型。用Transwell小室与20mg／LAst孵育的ADSC间接共培养48h。流式细胞术（FCM）和原位末端转移酶标记法（TUNEL）检测HKC的细胞凋亡；以增殖细胞核抗原（PCNA）反映HKC增殖情况；ELISA法检测下室HKC培养液中白细胞介素6（IL－6）、T细胞表达和分泌因子（RANTES）、红细胞生成素（EPO）、类胰岛素一号增长因子（IGF－1）的表达；结晶紫染色观察上室膜下ADSC的迁移指数。结果FCM和TUNEL结果均显示，与顺铂组相比，ADSC＋HKC组和Ast＋ADSC＋HKC组细胞凋亡的比例和数量减少，差异有统计学意义（均P〈0．05）；PCNA染色结果显示ADSC＋HKC组和Ast＋ADSC＋HKC组的细胞增殖数量高于顺铂组，差异有统计学意义（P〈0．05）；与顺铂组相比，Ast＋ADSC＋HKC组IL－6、RANTES水平明显降低，EPO、IGF－1水平升高，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；结晶紫染色显示Ast＋ADSC＋HKC组ADSC的迁移指数高于其他3组（均P〈0．05）。结论黄芪甲苷可刺激ADSC的旁分泌效应，增强ADSC向受损部位定向迁移，从而减少HKC凋亡。
- 王葳姜燕王巍巍张金元
- 关键词：急性肾损伤黄芪甲苷顺铂
- 低氧诱导因子1α基因修饰脂肪干细胞修复小鼠急性肾损伤被引量：4
- 2012年
- 背景:干细胞移植为肾损伤的治疗提供了一个新的途径,治疗基因转染干细胞可增强对疾病的治疗效果。目的:探讨低氧诱导因子1α基因修饰的脂肪源性干细胞移植对急性肾损伤小鼠肾脏结构和功能的影响。方法:连续2d向BALB/C裸鼠腹腔注射10mg/kg顺铂诱导急性肾损伤小鼠模型。造模24h后经小鼠尾静脉注射含1×105个脂肪源性干细胞或转染低氧诱导因子1α的脂肪源性干细胞的细胞悬液,3d后留取小鼠血液及肾组织标本进行实验。以注射200μL生理盐水的急性肾损伤小鼠作为模型对照,以正常小鼠作为正常对照。结果与结论:脂肪源性干细胞干预后急性肾损伤小鼠血清肌酐、尿素氮水平降低,肾组织病理改变及肾小管上皮细胞的凋亡病变减轻,肾组织炎症因子RANTES、肿瘤坏死因子α表达降低,白细胞介素10表达升高;其中低氧诱导因子1α基因修饰的脂肪源性干细胞对肾组织细胞凋亡及炎症因子表达作用更明显。免疫荧光染色可见移植的脂肪源性干细胞的存活,但未见其向肾小管上皮细胞转化。结果表明脂肪源性干细胞移植可改善急性肾损伤小鼠的肾脏结构和功能,经低氧诱导因子1α基因修饰后的脂肪源性干细胞作用更显著。
- 王巍巍姜燕王葳程劲张金元
- 关键词：干细胞脂肪间充质干细胞低氧诱导因子1Α基因修饰急性肾损伤细胞移植干细胞移植
- 干细胞移植在急性肾损伤中的应用及研究进展被引量：1
- 2012年
- 背景:干细胞移植治疗急性肾损伤是近年来研究的热点,不同来源的干细胞在治疗急性肾损伤方面都取得了很大的进展。目的:对干细胞生物学特性、干细胞的临床研究、不同来源的干细胞治疗急性肾损伤的实验性研究、存在问题及前景进行综述。方法:应用计算机检索中国学术期刊全文数据库(CNKI)和Pubmed数据库2001-01/2012-02关于干细胞移植治疗急性肾损伤的文章,检索主题词"干细胞,移植,肾脏疾病,急性肾损伤"或"stem cell,transplantation,kidney disease,acute kidney injury"。初检索到205篇文献,据纳入标准保留41篇进行分析、综述。结果与结论:干细胞移植是一种尝试用于急性肾损伤治疗的新方法,可以改善肾功能的损伤,加快肾脏修复。虽然仍存在不少有待解决的问题,但干细胞移植仍以其传统方法无法比拟的优势在急性肾损伤领域展现了诱人的应用前景。
- 王葳王巍巍张金元
- 关键词：急性肾损伤干细胞移植胚胎干细胞成体干细胞诱导性多能干细胞
- 黄芪甲苷孵育的脂肪源性干细胞对顺铂诱导的急性肾损伤小鼠的保护作用被引量：10
- 2014年
- 目的:建立顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)小鼠模型,尾静脉输注人脂肪源性干细胞(hADSC)及黄芪甲苷孵育的人脂肪源性干细胞(Ast-hADSC),探讨其对AKI小鼠肾损伤的修复作用。方法:应用PKH26标记hADSC及Ast-hADSC;雄性BALB/C裸鼠随机分为4组(normal组、model组、hADSC及Ast-hADSC干预组),干预组及模型组腹腔注射顺铂建立AKI模型,于建模后24 h尾静脉输注100μl hADSC及Ast-hADSC悬液,模型组给予等量生理盐水。分别留取建模后24 h及静脉输注后1 d、3 d、7 d、14 d小鼠血清及肾组织标本,检测血Scr、BUN水平,HE染色观察肾组织病理变化,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,激光共聚焦观察hADSC及Ast-hADSC在小鼠肾组织的分布。结果:模型组小鼠Scr、BUN、肾组织病理改变及细胞凋亡区域均显著高于正常组及细胞干预组,其中Scr、BUN分别在第3天、第7天达到最高值,肾小管损伤严重;相同时间点Ast-hADSC组肾组织病理改变及细胞凋亡区域较hADSC组明显降低,至14 d可基本恢复至正常水平;激光共聚焦显示PKH26标记的hADSC及Ast-hADSC于14 d在小鼠肾组织有少量表达,其中少量红色荧光与肾小管上皮细胞呈融合状态。结论:hADSC移植可减轻AKI小鼠肾脏结构和功能的损伤;经Ast孵育后,可在一定程度上提高hADSC对受损肾组织的修复作用。
- 姜燕王葳李泽争程劲王巍巍张金元
- 关键词：急性肾损伤顺铂黄芪甲苷脂肪源性干细胞ASTRAGALOSIDE
- 黄芪甲苷孵育的脂肪源性干细胞对急性肾损伤小鼠的影响及其机制
- 2014年
- 急性肾损伤（AKI）是临床上常见的一种综合征,随着干细胞技术在肾脏疾病领域的应用,其减轻肾损伤、有利于肾功能恢复的作用已被多项研究证实.我们课题组前期将黄芪甲苷孵育（Ast）的人脂肪源性干细胞（hADSC）与顺铂诱导的肾小管上皮细胞（HKC）共培养发现,Ast可增强hADSC的旁分泌效应,促进hADSC向受损部位定向迁移,从而减少HKC凋亡[1].本研究采用hADSC及Ast-hADSC体内移植,观察其对顺铂诱导的AKI模型小鼠肾功能、肾组织病理学及肾组织中细胞因子和凋亡相关蛋白的影响,分析和探讨其可能作用机制.
- 姜燕王葳李泽争程劲王巍巍张金元
- 关键词：脂肪源性干细胞急性肾损伤黄芪甲苷孵育凋亡相关蛋白肾小管上皮细胞
- 黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞对顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响被引量：6
- 2014年
- 背景:干细胞移植用于治疗急性肾损伤的有效性已经被多个研究证实,但其对肾小管上皮细胞损伤的修复机制尚不明确。目的:观察黄芪甲苷孵育后的脂肪源性干细胞对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及机制。方法:实验分为4组。2.5μmol/L顺铂诱导肾小管上皮细胞24 h,建立肾小管细胞损伤模型(顺铂损伤组);将脂肪源性干细胞与损伤肾小管上皮细胞共培养(脂肪源性干细胞+损伤肾小管上皮细胞组);利用Transwell小室将20 mg/L黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞48 h后与损伤肾小管上皮细胞共培养(黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞+损伤肾小管上皮细胞组);以正常肾小管上皮细胞做对照(正常对照组)。结果与结论:与肾小管上皮细胞损伤组相比,AV/PI和TUNEL结果均显示脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组和20 mg/L黄芪甲苷脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组肾小管上皮细胞发生凋亡的比例和数量明显减少;ELISA结果表明20 mg/L黄芪甲苷脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组胰岛素样生长因子1分泌显著提高(P<0.05);Western blot进一步显示20 mg/L黄芪甲苷脂肪源性干细胞+肾小管上皮细胞组caspase-3蛋白水平明显下降,而Bcl-2的表达量明显增加(P<0.05)。表明黄芪甲苷孵育的人脂肪源性干细胞对顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡具有抑制作用,从而有利于肾小管损伤的早期恢复,其保护机制可能与增加胰岛素样生长因子1分泌,抑制caspase-3表达、上调Bcl-2水平有关。
- 王葳姜燕王巍巍张金元
- 关键词：干细胞脂肪干细胞黄芪甲苷肾小管上皮细胞顺铂
- 黄芪甲苷对脂肪源性干细胞体外生物学行为的影响被引量：11
- 2013年
- 目的探讨黄芪甲苷(Astragaloside IV,Ast)对体外培养人脂肪源性间充质干细胞(human adipose-derived mesen-chymal stem cells,hADSCs)生物学行为的影响。方法应用CCK8和PCNA法检测不同浓度和时间Ast孵育对hADSCs增殖情况的影响,选取出Ast最适干预条件并对hADSCs进行培养,观察药物干预后细胞形态、表面标志物、成骨及成脂分化潜能。结果 CCK8和PCNA结果均显示,Ast 20 mg.L-1干预48 h后细胞增殖最为明显,进一步选取Ast20 mg.L-1干预hADSCs 48 h,与对照组相比,两组细胞CD29、CD44、CD105的阳性率均为96%-99%;两组细胞成骨诱导与成脂诱导结果也无差异。结论 Ast可促进ADSCs增殖,以20 mg.L-1、孵育48 h为最适干预条件,且该条件干预后并不影响hADSCs细胞形态,表面标志物水平及多向分化能力。
- 王葳姜燕王巍巍张金元
- 关键词：黄芪甲苷脂肪源性干细胞细胞表面标志成骨分化成脂分化
