广东省医学科学技术研究基金(A2004454)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 针对人蛋白激酶CK2α亚基的shRNA表达质粒的构建与鉴定
- 2006年
- 目的:构建针对人蛋白激酶CK 2α亚基的shRNA表达质粒。方法:以mU 6pro为载体,化学合成shRNA表达模板,并定向克隆到载体的U 6启动子下游,琼脂糖凝胶电泳法筛选阳性克隆,基因测序法检测插入模板序列的正确性。结果:获得了正确的重组质粒,插入的转录模板序列完全正确。结论:成功构建了针对人蛋白激酶CK 2α亚基的RNA i体系。
- 朱汝森刘新光梁念慈
- 关键词：蛋白激酶CK2RNA干扰(RNAI)基因测序转染
- 非小细胞肺癌组织中蛋白激酶CK2的表达及其意义被引量：3
- 2008年
- 目的:酪蛋白激酶Ⅱ(casein kinase Ⅱ,CK Ⅱ)也被称为蛋白激酶CK2。本研究探讨了蛋白激酶CK2的蛋白和基因的表达以及活性与非小细胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)临床病理之间的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测35例石蜡包埋的NSCLC组织及其癌旁"正常"组织和7例非肿瘤性肺组织标本中CK2催化亚基α、α’和调节亚基β蛋白的表达。应用RT-PCR检测10例新鲜肺癌灶组织及其癌旁"正常"组织和4例非肿瘤性肺组织标本中CK2各亚基mRNA的表达。应用同位素参入法测定细胞内CK2的活性。结果:免疫组织化学检测结果显示,CK2α和β亚基在NSCLC组织中的阳性率分别为62.9%和57.1%,高于癌旁"正常"组织的11.4%和25.7%(P<0.05),也高于非肿瘤性肺组织的28.6%和42.9%,但P>0.05。CK2α’亚基在NSCLC组织中的阳性率为65.7%,高于癌旁"正常"组织和非肿瘤性肺组织(42.9%和42.9%,但P>0.05);CK2各亚基的表达与患者的年龄、性别和肿瘤临床分期无关(P>0.05)。CK2α’的表达与细胞的分化程度和组织学分型无关;CK2α的表达与细胞的分化程度相关(r=0.388,P<0.05),与组织分型无关。低分化组的CK2α的表达高于中、高分化组(P<0.05)。CK2β在肺鳞癌中的表达高于腺癌(P<0.05),且与细胞的分化程度无关。在NSCLC组织中,无论是CK2α还是CK2α’,均与CK2β的表达呈正相关(r=0.439,P<0.05;r=0.45,P<0.05)。CK2各亚基mRNA的表达水平均高于其癌旁"正常"组织和非肿瘤良性病变组织。肺癌组织CK2的活性约为其癌旁"正常"组织的5.4倍,是非肿瘤良性病变组织的3.6倍。结论:蛋白激酶CK2在NSCLC组织中有较高表达,其高表达与NSCLC的发生和发展有关。与CK2α’亚基相比,CK2α或β亚基可能是更为理想的生物学标志物。
- 阮杰刘新光
- 关键词：免疫组织化学
