国家自然科学基金(30460019)
- 作品数：17 被引量：204H指数：8
- 相关作者：程在全黄兴奇白现广蔺忠龙吕广磊更多>>
- 相关机构：云南省农业科学院云南大学云南农业大学更多>>
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- 野生稻种子胚乳蛋白的提取及双向电泳条件的确立被引量：3
- 2008年
- 为揭示野生稻与栽培稻之间种子贮存的差异,建立了一套适合于水稻胚乳蛋白双向电泳分析的技术。探讨了种子胚乳蛋白的提取、纯化以及双向电泳的一些关键技术。结果表明,直接使用提取液(7M尿素,2M硫脲,4%3-[3-(胆酰氨丙基)二甲铵基]丙磺酸内盐,0.5%等电聚焦缓冲液3-10,40mM二硫苏糖醇)对单位米粉进行抽提后,直接离心上样,可以防止样品蛋白的丢失,保证样品蛋白的完整性,而在等电聚焦时,延长除盐时间,可以有效地减少凝胶中的横纹和竖纹,通过二向电泳分析结果,我们从合系41种子胚乳中得到蛋白斑点数约为310个,从滇超9号种子胚乳中得到蛋白点数约为327个,普通野生稻中得到蛋白点数约为331个,药用野生稻种子胚乳中得到蛋白点数约为346个,疣粒野生稻种子胚乳中得到蛋白点数约为278个。
- 孙一丁章成黄兴奇王玲仙程在全
- 关键词：野生稻胚乳蛋白
- 野生稻颖果总RNA提取方法研究被引量：1
- 2008年
- 目的：比较以确定适用于野生稻总RNA提取的方法。方法：用改良的异硫氰酸胍法、TR／ZOL法、SDS法和CTAB法分别提取云南3种野生稻和栽培稻滇超6号在灌浆期颖果的总RNA。结果：SDS法能够提取的普通野生稻和疣粒野生稻的总RNA的纯度高，其A260/A280介于1．9938～1．9267；而TRIZOL法只适用于栽培稻滇超6号，CTAB法对于疣粒野生稻和药用野生稻提取效果一般，电泳条带不很清晰，其A260/A280介于1．8243～1．6928；而新建立的改良的异硫氰酸胍法都能提取完整性好、高得率（浓度介于0．9358～1．2008μ/μl）和高纯度的RnA（A260/A280大于1．8），电泳28SrRNA和18SrRNA条带清晰，且该方法操作简单、耗时少、效率高。结论：改良的异硫氰酸胍法适合于野生稻颖果总RNA的提取，提取的总RNA完整性好、得率高。
- 彭波陈瑞黄兴奇刘小烛董转年程在全
- 关键词：野生稻颖果总RNA
- 疣粒野生稻胚性悬浮细胞系的建立及其原生质体的培养和植株再生被引量：7
- 2008年
- 云南疣粒野生稻的成熟种子经55℃温度处理3 d打破休眠后,在诱导培养基上诱导出愈伤组织。挑选胚性愈伤组织置于液体培养基中振荡培养,经3个月的继代培养,建立胚性细胞悬浮系。悬浮细胞经酶解、去壁后获得大量原生质体,固体包埋后添加液体培养基进行原生质体培养。在培养过程中调节培养体系的渗透压,获得小愈伤组织;经增殖后在分化培养基上诱导产生胚状体,成功得到疣粒野生稻的原生质体再生植株。
- 蔺忠龙白现广吕广磊李维薇殷富有黄兴奇程在全
- 关键词：疣粒野生稻原生质体植株再生
- 水稻优良性状控制基因的定位进展及其在染色体上的分布被引量：12
- 2007年
- 利用分子标记可以寻找并且定位目的基因,分子标记辅助育种技术则能够快速、高效地筛选出携带目的基因的优良品种。文章总结了近年来水稻中已被定位的优良性状控制基因及与其连锁的分子标记,其中包括抗病虫害、抗寒、抗旱、不育、育性恢复等194个基因,这些基因中已有14个被克隆测序。在此基础上探讨了这些基因在染色体上的分布趋势。
- 陈瑞程在全黄兴奇张伟
- 关键词：分子标记水稻基因
- 疣粒野生稻抗白叶枯病相关基因ME196半定量RT-PCR分析被引量：2
- 2009年
- 以从疣粒野生稻受白叶枯病菌诱导所建的差减文库中筛选出的一个具有丝氨酸一苏氨酸激酶抗病结构域的基因(克隆号为ME196),用半定量RT-PCR法,以肌动蛋白(-βactin)基因为内参,研究疣粒野生稻抗白叶枯病相关基因ME196基因mRNA的表达水平。通过ME196基因与-βactin基因PCR产物的灰度之比,确定ME196为诱导性表达,并进一步推测其为疣粒野生稻抗白叶枯病相关基因,甚至为抗病基因。
- 吕广磊刘芳芳蔺忠龙白现广付坚黄兴奇程在全
- 关键词：半定量RT-PCR疣粒野生稻
- 元江普通野生稻叶片cDNA文库的构建及部分基因片段分析被引量：8
- 2008年
- 首次利用SMARTTM技术构建了中国普通野生稻中最原始类型——元江普通野生稻生长旺盛时期叶片的cDNA文库。该cDNA文库未扩增和扩增后的滴度分别为1.1×106pfu/mL和3.98×107pfu/mL,重组率为91%,插入片段大小为500～2000bp。测定的部分cDNA序列进行BLAST比较,发现这些cDNA片段与日本晴栽培稻同源性很高,达到98%以上。本研究为进一步分析这些cDNA片段的结构、功能和探讨元江普通野生稻在栽培稻演化中的地位奠定了基础。
- 史冬燕杨明挚黄兴奇陈善娜程在全
- 关键词：CDNA文库滴度
- 云南疣粒野生稻细菌人工染色体(BAC)文库的构建与分析被引量：8
- 2005年
- 阿新祥程在全吴成军鄢波陈善娜杨明挚黄兴奇
- 关键词：疣粒野生稻细菌人工染色体文库核基因组
- 水稻遗传转化甘露糖安全筛选体系的建立
- 随着转基因植物种类和种植面积的迅猛增加,转基因植物中选择标记基因的生物安全性已成为人们普遍关注的问题之一。解决这一问题简单有效的途径就是利用生物安全标记基因。磷酸甘露糖异构酶基因 pmi 就是一种具有较高安全性的植物遗传...
- 付坚黄兴奇程在全孙一丁王玲仙白现广蔺忠龙张薇
- 关键词：水稻
- 云南三种野生稻不同外植体材料离体无性系的建立
- ＜正＞云南是稻种起源中心之一,我国只有云南和海南是三种野生稻的原生地,即疣粒野生稻（Oryza meyeriana）、普通野生稻（O．rufipogon）和药用野生稻（O．officinalis）。野生稻在长期进化过程中...
- 王玲仙殷富有丁玉梅程在全
- 文献传递
- 云南药用野生稻核基因组细菌人工染色体(BAC)文库的构建与分析被引量：10
- 2005年
- 通过云南药用野生稻核基因组BAC文库的构建,保存处于濒危状态的云南药用野生稻遗传资源。该文库包含27500个克隆,随机挑取80个克隆检测,插入片段平均大小为80kb,文库容量相当于水稻基因组大小的5.1倍。
- 阿新祥吴成军鄢波程在全姚春馨黄兴奇陈善娜
- 关键词：药用野生稻核基因组BAC文库库容量细菌人工染色体
