上海市高等学校科学技术发展基金(02BK04)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：罗敏刘海燕刘嫣赵平千陈艳更多>>
- 相关机构：上海第二医科大学附属第九人民医院上海交通大学更多>>
- 发文基金：上海市高等学校科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 酶-机械分离-酶消化法分离培养兔眼虹膜色素上皮细胞被引量：1
- 2004年
- 目的 建立兔眼虹膜色素上皮细胞体外培养体系。方法 采用酶 机械分离 酶消化法分离兔眼IPE细胞 ,台盼蓝染色法测定细胞活力 ,在体外对其进行原代及传代培养扩增 ,倒置相差显微镜观察IPE细胞的生长情况。取第 2次传代的IPE细胞行AE1/AE3及S 10 0抗体细胞免疫组化染色对其进行鉴定。结果 酶 机械分离 酶消化法分离得到IPE细胞的活力为 70 %～ 85 % .原代细胞 16～ 4 8h贴壁 ,72h后开始生长 ,细胞大多呈多角形或方形 ,少数为梭形 ,12～ 16d生长融合为单层细胞。第 1次传代的IPE细胞 6～ 12h贴壁 ,5～ 7d生长融合为细胞单层。IPE细胞在体外培养可传 5～ 6代。免疫组化染色显示 ,几乎所有细胞胞浆呈现棕黄色阳性反应 ,对照组胞浆不染色。结论 酶 机械分离 酶消化法分离培养兔眼IPE细胞易于操作 ,联合应用细胞角蛋白、S 10 0蛋白单克隆抗体的免疫组化技术可用来鉴定IPE细胞。
- 赵平千罗敏刘海燕刘嫣
- 关键词：虹膜色素上皮细胞培养
- 兔眼虹膜色素上皮细胞自体视网膜下移植的研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨兔眼虹膜色素上皮(IPE)细胞的自体移植技术并进行术后移植区的细胞形态学观察。方法通过虹膜全切法获取10只新西兰白兔的虹膜,采用酶-机械分离-酶消化的方法分离IPE细胞,用5溴脱氧尿嘧啶(5-Brdu)标记原代或一代的细胞。将标记过的IPE细胞悬液通过内路法分别植入对侧眼的视网膜下腔。术后2、4、6周摘除眼球对移植区进行光镜、电镜检查。结果经免疫学鉴定纯化培养了兔眼IPE细胞。术后光镜显示移植的IPE细胞成单层贴附在原始的视网膜色素上皮(RPE)细胞上。电镜结果证实移植的IPE细胞尖端微绒毛与光感受器外节连接,邻近的光感受器细胞显示正常结构。结论采用内路法可成功地将细胞悬液植入家兔视网膜下腔。6周内移植的自体IPE细胞在视网膜下腔存活,与原先的RPE细胞生长状态类似,邻近的光感受器细胞无形态改变。
- 陈艳罗敏张健
- 关键词：虹膜色素上皮自体移植
- 兔眼虹膜色素上皮细胞体外生物学特性研究
- 2006年
- 目的观察体外培养兔眼虹膜色素上皮(irispigmentepithelium,IPE)细胞的生物学特性,为IPE移植治疗老年性黄斑变性等疾病打下基础。方法应用扫描电镜、透射电镜对所培养IPE细胞的超微结构进行观察,并通过细胞的贴壁率、伸展率、倍增时间、总分裂次数的测定以及生长曲线的绘制对其在体外生长的生物学特性进行研究。结果体外培养的IPE细胞呈多角形,细胞内有色素颗粒和丰富的细胞器,细胞表面有长短粗细不等的微绒毛,生长成为具有尖基底极性的细胞单层。IPE细胞伸展率为81.5%±3.7%;原代IPE细胞的贴壁率为32.18%±3.18%;传代培养的IPE细胞的贴壁率为86.20%±2.84%;细胞倍增时间为2～7d,平均为(3.46±2.10)d;细胞总分裂次数为6～10代。结论体外培养IPE细胞与体内生长IPE细胞有着相似的生物学特性,通过对IPE细胞体外生物学特性的研究,为进一步探索其功能和自体移植提供了必要的实验基础。
- 赵平千罗敏刘海燕刘嫣
- 关键词：虹膜色素上皮生物学特性
