吉林省科技发展计划基金(20080104) 作品数:9 被引量:45 H指数:4 相关作者: 杨桂连 王春凤 杨文涛 刘琼 秦守涛 更多>> 相关机构: 吉林农业大学 吉林工程技术师范学院 长春理工大学 更多>> 发文基金: 吉林省科技发展计划基金 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
嗜酸乳杆菌S-层蛋白表面展示系统的构建及酶切位点分析 被引量:2 2011年 [目的]克隆和表达嗜酸乳杆菌S-层蛋白基因,用其构建能承载外源抗原表位的乳酸菌细胞表面展示系统。[方法]以染色体DNA为模板克隆S-层蛋白基因SlpA,通过酶切、连接将其插入大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pW425et,构建表面展示系统pW425et-S,并对酶切位点进行分析。[结果]将pW425et-S转化入thyA基因缺陷型E.coli X13感受态细胞,SDS-PAGE、Western-blotting、全细胞ELISA检测表明,在重组菌表面表达出S-层蛋白,构建出表面展示系统,确定BstEⅡ作为融合外源保护性抗原基因的酶切位点。[结论]克隆出嗜酸乳杆菌S-层蛋白基因,成功构建表面展示系统pW425et-S,为开发乳酸菌活载体口服活菌疫苗提供了可行性操作平台。 刘琼 王春凤 杨桂连 秦守涛 刘曼关键词:嗜酸乳杆菌 S-层蛋白 乳酸菌胞外蛋白水解酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:4 2010年 目的:构建连接乳酸菌胞外蛋白水解酶基因的非抗性重组质粒。方法:以瑞士乳杆菌基因组DNA为模板,克隆胞外蛋白水解酶基因,连接到以thyA为选择压力的非抗性穿梭表达载体pW425et上,构建重组质粒pW425et-R,转化入thyA基因缺陷型E.coliX13感受态细胞,SDS-PAGE电泳检测显示该水解酶得到了表达。结果:成功构建了重组质粒pW425et-R,胞外蛋白水解酶基因在E.coliX13中得到正确表达。结论:成功地表达了乳酸菌胞外蛋白水解酶基因,可为进一步制备具降血压功能基因工程乳酸菌提供参考。 杨桂连 秦守涛 刘琼 王春凤关键词:乳酸菌 降血压肽 克隆 猪RAG2蛋白的基因克隆及原核表达 RAG-1和RAG-2基因是未成熟B细胞和T细胞分化所必须的,且只在初级淋巴器官中表达,而不在成熟细胞中表达,这个特征使RAG-1或RAG-2成为研究这些器官发育的一个实用的指标。然而,目前市场上人和兔的RAG蛋白的特异... 晋玉北 杨文涛 黄科谚 刘晶 陈宏亮 刘琼 姜延龙 杨桂连 王春凤关键词:克隆 原核表达 文献传递 乳酸菌在疾病预防中的应用 被引量:1 2011年 乳酸菌作为机体内必不可少的正常生理菌群对机体有特殊的生理作用,文章综述了乳酸菌在预防癌症、心血管疾病、肾结石、炎症性肠病和过敏性疾病等方面的研究进展,为乳酸菌在疾病预防领域的开发利用提供借鉴。 杜芳 杨金生 杨桂连 王春凤关键词:乳酸菌 疾病预防 猪囊尾蚴重组诊断抗原的研究进展 被引量:2 2010年 猪囊虫病是一种重要的人畜共患寄生虫病,严重危害了人类的健康,对囊虫病的有效诊断成为控制该病的关键。目前,囊虫病的诊断主要依靠免疫学检测,所用抗原多由虫体制备,存在虫源短缺而不易大量获得的问题。利用基因重组技术可以解决以上问题。本文拟对猪囊尾蚴重组诊断抗原的研究进展做一综述。 王丹 杨桂连 李显鹏 赵权 何振艳关键词:猪囊尾蚴 重组抗原 乳酸菌免疫调节功能研究进展 被引量:8 2011年 本文综述了乳酸菌对免疫系统功能的调节作用,对乳酸菌在免疫方面的应用作了展望。 刘琼 王春凤关键词:乳酸菌 寄生虫半胱氨酸蛋白酶生物学功能研究进展 被引量:3 2010年 半胱氨酸蛋白酶(CP)是广泛存在于动物和植物以及寄生虫中的一类含有半胱氨酸残基的蛋白水解酶,是蛋白酶家族中最重要的成员之一。目前,对人CP的研究主要集中在凋亡和肿瘤两个方面,而对寄生虫CP的研究则相对比较广泛。 杨桂连 吕良贵 王丹 赵权关键词:半胱氨酸蛋白酶 寄生虫 生物学功能 半胱氨酸残基 蛋白水解酶 CP 旋毛虫对宿主免疫应答调节机制的研究进展 被引量:12 2013年 旋毛虫病是由旋毛虫(Trichinella spiralis)引起的一种呈世界性分布的人兽共患寄生虫病,严重影响畜牧业发展和食品安全,从而威胁人类健康。旋毛虫具有逃避宿主免疫应答进而在宿主体内形成长期感染的能力。研究认为,旋毛虫改变宿主免疫状态是其逃避免疫应答的重要原因,其中细胞因子、树突状细胞和调节性T细胞在其调节宿主免疫过程中发挥着重要作用。 赵葛 杨文涛 王春凤 杨桂连关键词:旋毛虫 TH1 树突状细胞 调节性T细胞 H9N2亚型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重组乳杆菌的构建及免疫原性分析 被引量:3 2014年 为了构建HA-DCpep融合基因重组乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,以pSIP409-HA质粒为模板,采用PCR方法将HA基因和DCpep基因融合。将目的基因克隆至pGEM-T载体中,进行测序。再将阳性基因亚克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8中,经SppIP诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep的裂解物中出现大小约为64ku的反应条带,大小与预期结果相符,表明重组融合蛋白具有良好的反应原性。重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep口服免疫SPF雏鸡后,在免疫后第14天可被检出特异性HI抗体,28d后达到高峰。结果表明,应用重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep免疫雏鸡能刺激机体产生特异性体液免疫应答反应,这为研制预防禽流感的重组乳杆菌口服制剂奠定了基础。 石少华 杨文涛 叶丽萍 黄海斌 蔡若鹏 李雨宸 闫晓月 王春凤 杨桂连关键词:禽流感病毒 免疫原性 乳酸菌抗肿瘤作用的研究进展 被引量:10 2011年 乳酸菌是人体消化道内正常菌群之一,已在世界范围内被认为是"GRAS(generally regarded as safe)"等级的食品微生物。乳酸菌通过阻止有害菌的定植与侵袭、激活机体抗肿瘤免疫系统、干扰肿瘤细胞代谢促进其凋亡等多种功能对多种肿瘤有预防与治疗作用。研究乳酸菌的抗肿瘤作用对肿瘤生物防治技术的进步和加快抗肿瘤药物的升级换代具有重要意义。 袁起伟 郝凤奇 杨文涛 杨桂连 王春凤关键词:乳酸菌 抗肿瘤 抗肿瘤药物