国家自然科学基金(31170067)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：龙敏南刘健龙传南成奕瑾邬小兵更多>>
- 相关机构：厦门大学福建省农业科学院福建生物工程职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程动力工程及工程热物理更多>>
- HPLC结合MALDI-TOF-MS分析木聚糖水解产物被引量：2
- 2015年
- 利用HPLC结合MALDI-TOF-MS对1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后山毛榉木聚糖水解产物进行分析,检测到了难以获得标准品对照的木聚糖水解产物。结果表明,稀硫酸水解山毛榉木聚糖的主要水解产物有木糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木糖(B2),以及少量4-O-甲基葡萄糖醛酸(B1)。内切重组木聚糖酶An Xyn10C水解山毛榉木聚糖产生木糖、木二糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木三糖(B3),而内切重组木聚糖酶Ho Xyn11A水解山毛榉木聚糖主要产生木糖、木二糖、木三糖、4-O-甲基葡萄糖醛酸-木四糖(B4)和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木五糖(B5)。基于PMP柱前衍生化的HPLC结合MALDI-TOF-MS方法能高效地分析复杂的木聚糖水解产物。
- 黎海龙李成国秦光辉刘健甘礼惠谢茹胜龙敏南
- 关键词：低聚木糖MALDI-TOF-MSHPLC
- 东方肉座菌EU7-22纤维素酶基因的克隆及序列分析被引量：4
- 2012年
- 东方肉座菌EU7-22与XC-9、里氏木霉、康宁木霉、黑曲霉、斜卧青霉进行产纤维素酶比较,结果表明菌株EU7-22具有较高的产纤维素酶能力及完整的纤维素酶系。根据里氏木霉和绿色木霉的外切葡聚糖酶,内切葡聚糖酶及β-葡萄糖苷酶相关基因序列,设计引物PCR扩增出菌株EU7-22 cbhⅠ、cbhⅡ、egⅠ、egⅡ及bglⅠ。基因序列经NCBI Blast分析表明,cbhⅠ与绿色木霉cbh1基因(FJ871063)同源性最高达99%;cbhⅡ与康宁木霉cbh2基因(DQ504304)同源性最高达99%;egⅠ与长枝木霉eg1基因(GU144298)同源性最高达99%;egⅡ与绿色木霉eg2基因(EF602036)同源性最高达99%;bglⅠ与菌株Trichodermasp.SSLbgl基因(FJ040193)同源性最高达100%。5种纤维素酶基因编码的相应氨基酸序列与其他木霉纤维素酶的氨基酸序列相似性也非常高。对上述纤维素酶基因编码的相应蛋白的分子量、等电点、N-糖基化位点、信号肽序列进行分析;对纤维素结合区及糖基水解酶家族特征结构区进行了定位;用SWISS-Model模拟了酶蛋白的三级结构。
- 龙传南成奕瑾邬小兵刘健龙敏南
- 关键词：纤维素酶基因同源性
- β-葡萄糖苷酶的异源表达及与纤维素酶协同酶解竹纤维被引量：4
- 2013年
- 在毕赤酵母GSll5中表达东方肉座菌EU7．22的B．葡萄糖苷酶基因（bglI），获得基因工程菌株BPl7。优化BPl7发酵产酶条件后，重组β－1葡萄糖苷酶活力达121IU／mL。酶学性质研究表明，该酶最适反应温度为70℃。在60％以下有较好的热稳定性；最适催化pH为5．0，在pH3．0～8．0之间有较好的稳定性。将异源表达的B．葡萄糖苷酶添加到东方肉座菌的纤维素酶液中协同降解经过预处理的竹纤维，当纤维素酶添加量为FPA20IU／g底物，β一葡萄糖苷酶添加量为BG6IU／g底物时，纤维二糖浓度显著下降，酶解得率达到83．03％，表明重组β－葡萄糖苷酶的加入更有利于纤维素的酶解糖化。
- 成奕瑾张婷黎海龙龙传南刘健龙敏南
- 关键词：纤维素酶Β-葡萄糖苷酶毕赤酵母异源表达
- 东方肉座菌EU7-22木聚糖酶和木糖苷酶基因克隆及生物信息学研究被引量：2
- 2013年
- 东方肉座菌EU7-22具有高产半纤维素酶的能力。根据已报道的同属里氏木霉及绿色木霉木聚糖酶,木糖苷酶相关基因序列,设计PCR引物扩增出东方肉座菌内切木聚糖酶(XYNⅠ,XYNⅡ)及β-木糖苷酶(β-BXL)基因。序列经NCBIBlast分析:东方肉座菌xynⅠ基因与里氏木霉xyn1基因(X69573.1)的同源性最高达到91%;xynⅡ基因与绿色木霉xyn2基因(EF079061)同源性最高达到93%;β-bxl基因与里氏木霉β-bxl1基因(Z69257.1)的同源性最高达到94%。生物信息学分析表明内切木聚糖酶Ⅰ和Ⅱ均属于糖基水解酶家族11,N末端前19个氨基酸均为信号肽。内切木聚糖酶Ⅰ分子量为24.13kD,等电点为7.87,含有3个糖基化位点;内切木聚糖酶Ⅱ分子量为24.44kD,等电点为4.86,含有1个糖基化位点;β-木糖苷酶属于糖基水解酶家族3,分子量为87.27kD,等电点为5.49,N末端前20个氨基酸为信号肽,含有8个糖基化位点。利用SWISS-Model对木聚糖酶,木糖苷酶蛋白质三级结构进行了预测和模拟。对木聚糖酶和木糖苷酶基因及其编码蛋白质的生物信息学分析,为进一步研究这些基因的表达与调控、构建高效利用纤维素组份的工程菌株奠定基础。
- 龙传南蒋凤姣邬小兵刘健龙敏南
- 关键词：木聚糖酶基因克隆生物信息学
- 利用能源植物斑茅纤维固态发酵产纤维素酶及其糖化的研究被引量：6
- 2011年
- 以能源植物斑茅(Erianthus arundinaceus)为材料,对其纤维成分、产酶条件和糖化条件进行了分析。结果表明:斑茅含有纤维素43.77%、半纤维素28.57%、木质素11.01%;对斑茅进行预处理后,纤维中纤维素的含量提高至72.54%,半纤维素含量降低至13.02%,木质素的含量降低至3.34%。利用预处理的斑茅纤维进行固态发酵产酶,其最佳的产酶条件为:茅麸比1∶3,固液比1∶2,氮源(脲)0.75%,初始pH 5.0,32℃发酵培养72 h;相对于利用未经预处理的斑茅纤维为原料,其FPA酶活提高210.9%,达到20.74 U/g,CMC酶活提高239.1%,达到218.26 U/g。以纤维素酶对斑茅纤维进行糖化,糖化率达到40.60%。
- 张树河谢志君林一心龙敏南
- 关键词：能源植物斑茅纤维素酶固态发酵糖化
