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胆酸减轻鹅膏毒肽攻击人肝细胞损伤的作用及机制被引量：3: 2013年; 目的探讨不同胆酸减轻受鹅膏毒肽攻击人肝细胞（L．02）损伤的作用及机制。方法根据鹅膏毒肽的质量浓度将实验分为0．00g／L、0．26g/L、0．40g／L、1．40g／L、2．80g／L共5个剂量组，将培养至指数生长期的L-02铺于96孔板，每孔1×10^3细胞，24h加入上述浓度的鹅膏毒肽，每组设3个复孔，分别与药物作用24、48、72h采用四唑盐（MTT）比色法检测肝细胞活性，确定肝细胞生存的最小鹅膏菌毒素攻击剂量。实验分为空白对照组、损伤组和胆酸组，每个组均设3个时间点：攻击24、48、72h，在攻击24h后使用牛磺胆酸、鹅脱氧胆酸、甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸和牛磺鹅脱氧胆酸分别保护损伤肝细胞，在倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变，MTT法进行活细胞计数，生化法检测培养上清液中AST和ALT。结果肝细胞生存的鹅膏毒肽体外最小攻击剂量为1．40g／L。空白对照组、损伤组、牛磺胆酸组、鹅脱氧胆酸组、甘氨胆酸组、甘氨鹅脱氧胆酸组及牛磺鹅脱氧胆酸组在鹅膏毒肽攻击肝细胞72h时吸光度分别为0．812±0．035、0．345±0．021、0．363±0．018、0．387±0．027、0．431±0．018、0．465±0．015及0．452±0．030。胆酸各组较损伤组攻击72h时吸光度逐渐升高，其中鹅脱氧胆酸组、甘氨胆酸组、甘氨鹅脱氧胆酸组、牛磺鹅脱氧胆酸组与损伤组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。胆酸各组AST和ALT活性下降，其中甘氨鹅脱氧胆酸组AST和Au活性最低，与损伤组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论胆酸对鹅膏毒肽攻击L-02有保护作用，作用机制可能与鹅膏毒肽和胆酸同为钠离子-牛磺酸共同转运多肽和有机阴离子转运多肽底物有关。; 李梦妮付燕红龚小霞李运壁母发光廖静朱小石; 关键词：人肝细胞胆酸

环孢素联合胆酸减轻鹅膏毒肽攻击人肝细胞损伤的作用及机制被引量：1: 2016年; 目的探讨环孢素（CsA）与胆酸减轻受a-鹅膏毒肽（a—AMA）攻击人肝细胞损伤的作用及机制。方法根据本课题前期研究确定的人肝细胞生存的最小a-AMA攻击质量浓度（1．4g／L）将实验分为5组：空白对照组、损伤组、甘氨鹅脱氧胆酸组、CsA组、CsA联合胆酸组（CsA＋牛磺胆酸、CsA＋鹅脱氧胆酸、CsA＋甘氨胆酸、CsA＋甘氨鹅脱氧胆酸和CsA＋牛磺鹅脱氧胆酸），每个组均设立3个时间点：攻击24h、48h和72h，在攻击24h后采用CsA、甘氨鹅脱氧胆酸和CsA联合胆酸保护损伤肝细胞，在倒置相差显微镜下观察细胞的形态学改变，使用3-（4，5-二甲基噻唑-2）_2，5-二苯基四氮唑溴盐（M1T）法进行活细胞计数，生化法检测培养上清液中天冬氨酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平。结果与空白对照组比较，损伤组肝细胞生长明显受到抑制，细胞进行性凋亡，MTr法吸光度值明显下降（0．345±0．021）；AST、ALT活性逐渐升高，最高值在损伤72h[分别为（98．4±6．7）U／L和（116．2±9．5）U／L]。与损伤组比较，甘氨鹅脱氧胆酸组、CsA组和CsA联合胆酸组破碎细胞器明显减少，吸光度值增高，且CsA＋鹅脱氧胆酸组在各时间点吸光度值最高（0．656±0．014）（P〈0．05）；同时AST、ALT升高不明显，CsA＋鹅脱氧胆酸组在各时间点数值最低[（22．3±6．2）U／L和（20．2±5．4）U／L，P〈0．05]。结论CsA与胆酸一样对a-AMA攻击人肝细胞有保护作用，作用机制是CsA作为有机阴离子转运多肽（OATP1B1和OATP1B3）的抑制剂抑制a—AMA的吸收。CsA＋鹅脱氧胆酸的联合应用优于单一使用OATP的底物或抑制剂。; 李梦妮龚小霞付燕红李运壁母发光廖静来小石; 关键词：环孢素胆酸人肝细胞

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四川省卫生厅科研基金(070098)

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