国家科技重大专项(2009ZX09303-005)
- 作品数：13 被引量：40H指数：4
- 相关作者：王彬李芃陆宇郑梅琴尹跃平更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院中国医学科学院北京市结核病胸部肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项协和青年科研基金卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠皮下感染着色芽生菌病皮损中局部细胞免疫功能研究
- 2010年
- 目的 利用小鼠皮下着色芽生菌病模型,研究在不同的病程发展阶段其T细胞免疫功能的变化.方法 足垫局部皮下注射法建立小鼠的裴氏着色霉感染的着色芽生菌病模型,通过免疫组织化学技术,检测正常小鼠足垫皮肤皮损局部细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10、TNF-α的表达并作为对照组,观察免疫正常组和环磷酰胺免疫抑制处理的免疫抑制组小鼠分别在感染上述真菌后7 d、30 d时,皮损局部细胞因子水平变化,并与对照组比较.结果 在着色芽生菌病小鼠模型中,第7天时,免疫正常组IL-4、TNF-α和IL-10较正常对照组均出现了显著的升高（P＜0.01）,表现为Th1和Th2型细胞免疫均增强的模式,并以Th2型为主 30 d时IL-10表达显著下降（P＜0.01）,与同期正常对照组比较差异无统计学意义（P=0.52）,IFN-γ、TNF-α水平比7 d时显著升高（P＜0.01）,表现为Th2型细胞免疫减弱Th1型占主导的模式.免疫功能受损组第7天时IL-10、IL-4的水平升高与其他两组相比差异均有统计学意义（P＜0.01）,IFN-γ表达水平则明显下降（P＜0.01）,TNF-α的表达与正常对照组相比差异无统计学意义（P=0.39）,表现为Th2型细胞免疫增强Th1功能受抑模式 30 d时,IL-10表达水平较7 d时显著减少,但仍然高于同期的免疫正常组和正常对照组,IFN-γ、TNF-α水平显著升高（P＜0.01）,但却低于免疫正常组,表现为Th2型免疫模式渐弱Th1功能逐渐增强模式.结论 在不同免疫状态下小鼠着色芽生菌病感染的过程中,随着病情好转存在由Th2型细胞免疫为主导转化为Th1型细胞免疫功能占主导的过程,免疫抑制下主要表现为Th1反应受抑制,Th1型细胞因子在控制着色芽生菌病的发展过程中具有关键性的保护作用,Th2型细胞因子则可能与感染的发展进程相关.
- 王红魏欣净贾青沈永年吕桂霞刘维达
- 关键词：着色芽生菌病动物试验细胞因子
- 氯法齐明与其他抗结核药物联用对结核分枝杆菌的作用被引量：17
- 2010年
- 目的研究氯法齐明与其他抗结核药物联合应用对MTB的抗菌活性，为临床合理应用提供依据。方法应用微孔板指示剂法测定10种抗结核药物单独及与氯法齐明联合应用时MTB的最低抑菌浓度（MIC），计算其部分抑制浓度（FIC）并评价氯法齐明与其他抗结核药物之间是否存在协同作用。将90只BALB／C小鼠尾静脉注射感染耐药MTB临床株成为耐药结核病动物模型，分为空白对照组及13个治疗组，每组6只。单独应用氯法齐明、克拉霉素、莫西沙星、对氨基水杨酸钠（PAS）、乙胺丁醇、阿米卡星和卷曲霉素，并将氯法齐明与上述药物联合治疗小鼠，给药30d后解剖各组小鼠，计数肺、脾活菌数。采用单因素方差分析，比较各组药物的抗结核活性。结果氯法齐明与抗结核药物联合应用时，MIC降至应用单药的1／2～1／8，氯法齐明分别与PAS、丙硫异烟胺、克拉霉素和卷曲霉素联合应用时，FIC分别为0．31、0．185、0．31和0．28，具有协同作用。各治疗组小鼠的肺、脾活菌数均较空白对照组低，单药组中氯法齐明的作用最为明显，分别较空白对照组降低了1．82和2．32lg CFU，氯法齐明与克拉霉素联合应用的抗结核作用较单独应用氯法齐明更强，且较单用克拉霉素组的抗菌活性增加，活菌数分别降低1．30和1．91lg CFU，提示联合应用可增强药物的抗结核作用。结论体外及小鼠体内的实验结果均提示，氯法齐明与克拉霉素联合应用有协同抗结核作用。
- 陆宇王彬赵伟杰郑梅琴李芃付雷梁博文
- 关键词：氯法齐明
- 生殖器支原体在HIV高危人群中的流行进展
- 2010年
- 生殖器支原体（Mg）是性传播疾病的病原之一,可引起男性非淋球菌性尿道炎、女性宫颈炎、子宫内膜炎及盆腔炎.近年来发现泌尿生殖道Mg感染在HIV阳性及高危人群中的流行呈上升趋势,并且Mg感染可能促进HIV的感染与传播,提示应对HIV高危人群的Mg感染给予充分的重视.此文就Mg在HIV阳性及高危人群中的流行情况及治疗的研究进展进行了综述.
- 向志施美琴尹跃平
- 关键词：HIV
- 抗HIV-1活性化合物作用靶点的快速判断方法被引量：1
- 2011年
- 目前，艾滋病的防治工作主要依靠抗HIV-1药物，临床使用的抗HIV药物主要是逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、融合抑制剂和整合酶抑制剂。逆转录酶抑制剂包括核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI），如Zidovudine（AZT）、Lamivudine（3TC）、Emtricitabine（FrC）等，非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI），如Efavirenz（EFV）、Nevirapine（NVP）、Delavirdine（DLV）等。蛋白酶抑制剂主要有Ritanovir（RTV）、Saquinavir（SQV）、Indinavir（IDV）等。
- 马铃张全殷霄李晓宇赵立勋岑山
- 关键词：抗HIV-1非核苷类逆转录酶抑制剂作用靶点抗HIV药物整合酶抑制剂融合抑制剂
- 抗结核药物筛选模型荧光素酶报告系统的建立
- 2012年
- 目的:以ESX-1分泌系统为靶点,建立能够寻找既能抑制该系统发挥功能、降低结核菌毒力和细胞内生存力,又不抑制分枝杆菌生长、减少耐药性产生可能性的抗结核药物。方法:通过PCR的方法扩增得到Luciferase(LUC)、CFP-10及其突变体ΔCFP-10,应用搭桥的方法将二者融合,电击转化入海分枝杆菌,测定海分枝杆菌上清中LUC活性。结果:表达LUC-CFP-10的融合蛋白重组海分枝杆菌上清中荧光素酶的活性是表达末端缺失7个氨基酸的LUC-ΔCFP-10融合蛋白的10倍左右。结论:可以通过检测LUC-CFP-10蛋白的分泌,即通过测定海分枝杆菌上清中荧光素酶活性来反映ESX-1分泌系统的活性,而该分析方法可以发展成为寻找ESX-1抑制剂的高通量筛选方法。
- 贾平平张义彭世泽岑山
- 关键词：抗结核耐药抑制剂荧光素酶
- 利福平类抗结核药物机制排重系统的建立被引量：1
- 2012年
- 目的:以抗结核一线药物利福平耐药为研究目标,探索快速评价抗利福平耐药结核分枝杆菌活性的方法。方法:利用PCR技术扩增与利福平耐药相关的rpoB及其突变体,插入载体pMV261构建重组质粒,电击转化入耻垢分枝杆菌进行药物敏感性测定。结果:在利福平浓度为4μg/mL时,表达rpoB-AM和rpoB-GM突变体的重组菌耐药性明显高于未突变组,其MIC提高了4倍以上,而与野生株相比,MIC提高了8倍以上;以ATG为起始密码子表达蛋白组的耐药性都强于以GTG为起始密码组。结论:本研究建立的利福平类药物作用机制的排重系统,可以用于排除某种或某些作用机制相同或类似的活性化合物,避免重复筛选,提高筛选效率,对于抗利福平耐药株的抗结核药物的筛选有着重要意义。
- 贾平平张义彭世泽岑山
- 关键词：利福平RPOB
- 须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型的构建
- 2016年
- 目的 体外构建须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型。 方法 用牛Ⅰ型胶原溶液复合原代成纤维细胞培养3 d后，在其表面利用气液界面培养原代角质形成细胞和黑素细胞12 d得到组织工程皮肤，取新鲜的须癣毛癣菌悬液5 μl对其进行感染，分别在12、24、48、72 h进行HE染色和PAS染色观察。 结果 成纤维细胞复合胶原构建结构致密均匀的组织工程真皮，其上角质形成细胞和黑素细胞形成了层次清晰、结构良好的组织工程表皮。须癣毛癣菌感染该组织工程皮肤后，随时间延长，HE染色和PAS染色显示须癣毛癣菌对组织工程皮肤结构的破坏逐渐加重，至48 h，表皮破坏最明显，至72 h，组织工程皮肤的整体结构被菌丝和孢子所替代。 结论 初步建立了须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型。
- 曹玉萍沈永年吕桂霞王乐曾荣李玲珺马鹏程刘维达
- 关键词：皮肤动物替代试验须癣毛癣菌
- 氯法齐明与其他抗结核药物联用对结核分枝杆菌的作用研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究氯法齐明（Clofazimine，Cfz）与其它抗结核药物联合应用对结核分枝杆菌的体内外抗菌活性，为临床合理应用提供依据。方法应用微孔板指示剂法测定10种抗结核药物单独及与氯法齐明联合时对标准结核分枝杆菌的最低抑菌浓度（MIC），按照部分抑制浓度（Fractional Inhibitory Concentrations FIC）公式计算，评价Cfz是否与其他抗结核药物之间存在协同作用。BALB／c小鼠尾静脉注射法感染耐药结核分枝杆菌临床株，形成耐药结核病动物模型。分别应用克拉霉素（clarithromycin，Clr）、莫西沙星（Moxifloxacin，Mfx）、对氨基水杨酸（P-aminosalicylic acid，PAS）、乙胺丁醇（Ethambutol，E）、丁胺卡那霉素（Amikacin，Am）、卷曲霉素（Capreomycin，Cm）单药及与氯法齐明联合应用治疗，给药30d后，解剖各组小鼠，进行肺、脾活菌计数，应用单因素方差分析，比较各给药组小鼠体内的抗结核活性。结果Cfz与10种抗结核药物的组合测定，联合应用时MIC较单药降低2～8倍，Cfz与PAS、Pto、Clr、Cm组合，FIC分别为0．31}0．185；0．31和0．28，具有协同作用。在小鼠耐药结核病治疗模型中：各单药组肺及脾组织中的活菌数均较空白对照组低，其中Cfz的作用最明显，分别降低了1．82和2．32log10CFU；Clr、Mfx、PAS、Am、E、Cm与Cfz联合应用后，均较其单独应用的抗结核作用强；其中Clr与Cfz联合应用较Cfz单药作用更强，提示两者联合应用可以增强活性。结论体外及小鼠体内结核病模型提示Clr与Cfz具有抗结核活性的协同作用，值得进一步研究。
- 陆宇王彬赵伟杰郑梅琴李芃付雷梁博文
- 关键词：分枝杆菌结核氯法齐明
- 异烟肼耐药耻垢分枝杆菌的建立及药物敏感性的测定被引量：3
- 2011年
- 耐药结核病的涌现,使发展新型抗耐药结核药物变得尤为迫切。本研究选择生长快且无致病性的耻垢分枝杆菌为研究对象,探索快速评价药物抗异烟肼耐药结核分枝杆菌的能力。inhA是异烟肼的作用靶点,由于inhA的突变或者过表达可以引起结核分枝杆菌对异烟肼耐药性的产生。通过将inhA克隆入pMV261中,构建过表达inhA的耻垢分枝杆菌。结果显示,过量表达inhA的耻垢分枝杆菌对异烟肼的敏感性下降了100倍以上。建立了利用刃天青为指示剂的抗异烟肼耐药株的快速药效评价方法,可快速对药物的活性进行定性或定量评价,为进行新型抗结核药物的高通量筛选和药效评价奠定基础。
- 贾平平赵莉莉李晓宇张全刘振龙王鑫余利岩赵立勋岑山
- 关键词：耻垢分枝杆菌异烟肼耐药
- 五种新型唑类抗真菌药物被引量：4
- 2011年
- 唑类药物是目前治疗浅部和深部真菌感染的一线用药。按照其结构的不同，该药可以分为咪唑类和三唑类。3种咪唑类新药卢立康唑、拉诺康唑和氟曲马唑已在国外上市，外用治疗皮肤癣菌等浅部真菌病疗效明显且局部无明显不良反应。2种三唑类新药普拉康唑和雷夫康唑则仍在临床试验阶段，但从目前研究来看，两者用于治疗浅部和深部真菌感染亦较安全有效，有望作为新型抗真菌药应用于临床。
- 王乐刘维达
- 关键词：咪唑类三唑类
