“十一五”国家科技支撑计划(2006BAD08B02-1)
- 作品数:2 被引量:18H指数:2
- 相关作者:张晓琳罗莉斯李丽郁建平李能威更多>>
- 相关机构:国家粮食局科学研究院贵州大学天津科技大学更多>>
- 发文基金:“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 刺糖多孢菌电转化条件研究被引量:2
- 2011年
- 以经理化诱变选育的多杀菌素高产菌株刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)CB11为受体菌,将具有安普霉素(apramycin)抗性标记的整合型载体pSET152作为质粒供体,研究了制备刺糖多孢菌感受态细胞时菌体的生长阶段、质粒DNA浓度、电场强度等因素对电转化效率的影响,结果表明,在菌体培养48h至对数中期制备感受态,电场强度为12kV/cm,最小DNA浓度为0.1μg时可获得最高的转化效率,转化子的安普霉素抗性基因的PCR扩增及抗性稳定性实验从分子水平及细胞水平验证了pSET152质粒能整合在刺糖多孢菌的基因组中并能稳定遗传,所有结果表明所建立的刺糖多孢菌电转化体系是行之有效的。
- 张求学兰周汪洋王昌禄宋渊张晓琳
- 关键词:刺糖多孢菌电转化质粒
- 96孔板高通量筛选多杀菌素高产菌株的研究被引量:17
- 2010年
- 考察了刺糖多孢菌在96孔板固体培养基和液体培养基中的生长情况,建立了96孔板高通量筛选多杀菌素高产菌株的方法。结果表明:96孔板三明治盖能同时满足过滤杂菌和刺糖多孢菌生长耗氧所需,刺糖多孢菌在96孔板固体培养基中的生长情况与传统斜面培养相当,种子培养最适种龄为60h,每孔发酵培养基装液量为0.4mL。与传统摇瓶发酵筛选平台相比,该方法能显著提高多杀菌素高产菌株的筛选效率。
- 罗莉斯李能威李丽郭伟群郁建平张晓琳
- 关键词:刺糖多孢菌多杀菌素高通量筛选