安徽省优秀青年科技基金(2006JQ1196)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：王海侠郜尽李京敬俞雁谢超更多>>
- 相关机构：上海交通大学安徽科技学院更多>>
- 发文基金：安徽省优秀青年科技基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 酵母双杂交报告基因β-半乳糖苷酶活性测定方法的研究被引量：5
- 2009年
- 目的建立标准的酵母双杂交系统报告基因表达的β-半乳糖苷酶活性测定方法。方法采用o-硝基-β-D-半乳糖苷(ONPG)为底物,以液氮反复冻融破碎酵母细胞壁,通过比较不同测定时间、接种阳性克隆数目、转化方法以及酵母株对β-半乳糖苷酶酶活的影响,确定最佳酶活测定条件。结果相同条件下,单个克隆之间的酶活有差异,相对标准偏差(RSD)>8%;相同条件下,Y187酵母株比AH109酵母株酶活高18～20倍,并且本底水平很低甚至没有;双倍体酵母的酶活介于两个单倍体酵母之间,同预计一致;质粒顺序转化与共转化在AH109中差异有统计学意义(P<0.001),而在Y187中没有明显差异(P>0.05)。结论测定酵母双杂交报告基因β-半乳糖苷酶的活性宜采用Y187酵母株,酶活变化范围大,本底小,受转化方法影响小,测定时选取5个以上阳性克隆混合培养更有利于酶活的准确测定。
- 郜尽王海侠李京敬俞雁
- 关键词：酵母双杂交Β-半乳糖苷酶酶活测定
- 人类蛋白质相互作用组被引量：2
- 2012年
- 高通量酵母双杂交与免疫亲和纯化技术的快速发展和日臻成熟,使得在蛋白质组水平上大规模地研究蛋白质之间的相互作用成为可能。目前,人类蛋白质互作网络在细胞、组织、器官乃至整个个体水平的研究已经陆续展开。蛋白质互作网络中蛋白质数量也由少数几个向整个蛋白质组扩展。同时,功能、疾病、生态等相关的蛋白质互作网络研究也取得了一定的成果。然而,人类的蛋白质互作网络研究正面临着一些问题和挑战。本文综述了人类蛋白质互作网络的研究方法、研究进展以及面临的挑战,同时指出了人类蛋白质互作网络研究的方向和目标。
- 王海侠许传营谢超郜尽
- 关键词：酵母双杂交
