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肉毒毒素A对慢性坐骨神经结扎大鼠机械痛敏和热痛敏的影响被引量：2: 2008年; 目的探讨肉毒毒素A(botulinum toxin type A,BoNT-A)后处理对神经病理性疼痛大鼠疼痛行为学的影响。方法建立SD大鼠右侧慢性坐骨神经结扎模型(chronic con-striction injury of sciatic nerve,CCI)。CCI术后d3始,CCI同侧肢体足底注射BoNT-A7.5、15、30U·kg-1或等容积生理盐水,或对侧肢体足底注射BoNT-A15或30U·kg-1。分别于术前、术后1、3、5、7、14d,测定大鼠的机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。结果CCI手术同侧足底皮下注射BoNT-A可以增加大鼠的MWT和TWL,对侧应用BoNT-A对MWT和TWL无影响。结论BoNT-A可以通过局部作用减轻CCI手术同侧肢体的机械痛敏和热痛敏。; 申文苏小虎张井浪唐元章; 关键词：肉毒毒素A 神经病理性疼痛机械痛敏热痛敏

脊髓胶质细胞在小鼠骨癌痛形成中的作用被引量：2: 2009年; 目的评价脊髓胶质细胞在小鼠骨癌痛形成中的作用。方法健康雄性C3H／He小鼠40只，周龄8～10周，体重18～22g，随机分为4组（n=10）：假手术组（S组）、骨癌痛组（B组）、PBS组（P组）和米诺环素组（M组）。S组跟骨骨髓腔内注射PBS10μl；余3组跟骨骨髓腔内注射含2×10^5个骨纤维肉瘤细胞的PBS10μl制备骨癌痛模型，于造模前即刻开始PBS组鞘内注射PBS5μl，M组鞘内注射米诺环素（用PBS溶解为0．2mmol／L）5μl，1次／d，连续11d。于造模前1d、造模后即刻、3、5、7、9、11d时测定机械痛阈；于造模后3、7、9、11d机械痛阚测定结束后测定冷痛阈。痛阈测定结束后处死小鼠，取脊髓组织，测定神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和CD11b的表达水平。结果与S组比较，B组和P组造模后3～11d时、M组造模后3、5d时机械痛阈升高，B组、P组和M组造模后7～11d时冷痛阈升高，脊髓CD11b和GFAP表达上调（P〈0．05）。与B组比较，M组造模后3～11d时机械痛阈降低，造模后7～11d时冷痛阂降低，脊髓CD11b和GFAP表达下调（P〈0．05）。结论脊髓胶质细胞（星形胶质细胞和小胶质细胞）的激活参与了小鼠骨癌痛的形成。; 申文唐元章刘苏孙玉娥张井浪苏小虎马正良; 关键词：骨肿瘤星形细胞小神经胶质细胞脊髓

鞘内注射氟代柠檬酸和／或米诺四环素对骨癌痛小鼠疼痛及肿瘤的影响被引量：3: 2010年; 目的研究鞘内注射星形胶质细胞抑制剂氟代柠檬酸（fluorocitrate，FC）和／或小胶质细胞特异性抑制剂米诺四环素（minocycline，MI）对C3H／He小鼠跟骨癌性疼痛及肿瘤的影响。方法将雄性C3H／He小鼠按配伍组设计随机法分为6组（n=20），包括：正常组、假手术组、癌痛＋人工脑脊液组（artificial cerebrospinal fluid，ACSF）、癌痛＋FC组、癌痛＋MI组、癌痛＋FC＋MI组。术后每天给药1次，持续21d，并于术前当天、术后3、5、7、10、14、21d采用机械性痛觉过敏行为学及冷痛敏测定小鼠行为学变化，天平秤称量小鼠体重变化及组织切片HE染色观察肿瘤骨的骨质破坏程度。结果术前当天各组小鼠的疼痛刺激缩足反应差异无统计学意义（P〉0．05）；与正常组及基础值相比，术后3d假手术组小鼠疼痛刺激缩足反应显著变化（P〉0．05）；而癌痛组小鼠疼痛刺激缩足反应显著增加（P〈0．05）。其中癌痛组内，与ACSF组相比，术后5dMI组小鼠疼痛刺激缩足反应显著降低（P〈0．05）；MI＋FC组小鼠刺激性缩足反应也显著降低（P〈0．01）；而FC组术后10d小鼠刺激性缩足反应显著降低（P〈0．05）。术前当天各组组间基础体重差异无统计学意义（P〉0．05）。与正常组相比，假手术组和癌痛组小鼠的体重在术后3d虽有所下降，但差异无统计学意义（P〉0．05）。与正常组相比，术后21d癌痛组小鼠体重显著降低（P〈0．05）；与ACSF组相比，MI组、FC组及MI＋FC组体重降低较少（P〈0．05）。同时间点内，癌痛各组间组织切片HE染色发现肿瘤的大小及骨的破坏程度差异无统计学意义。结论鞘内同时注射氟代柠檬酸和／或米诺四环素明显降低癌痛小鼠的缩足反应，抑制其痛觉过敏或痛觉超敏的产生，改善骨癌痛小鼠体重的变化，但对肿瘤本身的生长及组织的破坏程度无影响。; 孙玉娥申文唐元章苏小虎; 关键词：骨癌痛氟代柠檬酸行为学组织学

BoNT-A对慢性坐骨神经结扎大鼠疼痛行为学及脊髓中Fos蛋白的影响被引量：1: 2010年; 目的探讨肉毒毒素A(BoNT-A)对神经病理性疼痛大鼠疼痛行为学及脊髓背角Fos蛋白表达的影响。方法建立雄性SD大鼠慢性坐骨神经结扎(CCI)疼痛模型,CCI术后第3天开始,同侧肢体足底皮下注射BoNT-A30U/kg和等容积生理盐水,给药前、给药后1、3、5、7、14d,采用von-Frey纤维细丝机械刺激法和热辐射刺激法评定大鼠机械刺激缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足反射潜伏期(TWL),观察大鼠疼痛行为学变化,根据变化结果,给药后第5天取相应脊髓节段标本,运用免疫组织化学法观察脊髓背角Fos蛋白表达。结果 CCI神经病理性疼痛模型大鼠建立后,CCI组同侧MWT和TWL均明显降低,且脊髓水平Fos蛋白表达明显增多;同侧足底注射BoNT-A30U/kg后,其MWT和TWL均显著增加,脊髓水平Fos蛋白表达明显减少。结论足底注射BoNT-A抑制脊髓水平Fos蛋白的表达,能减轻神经病理性疼痛模型大鼠的机械性触诱发痛和热痛觉过敏。; 苏小虎申文唐元章张井浪; 关键词：肉毒毒素A 神经病理性疼痛 FOS

抑制小胶质细胞激活对骨癌痛小鼠疼痛维持的影响被引量：10: 2009年; 目的研究鞘内注射小胶质细胞特异性抑制剂米诺环素(minocycline,MC)抑制脊髓小胶质细胞的激活对骨癌痛维持的影响。方法采用小鼠跟骨癌痛模型,♂C3H/He小鼠42只,随机分为3组(n=14),sarcoma+PBS(phosphatebuffered saline)组和sarcoma+MC组行小鼠跟骨癌痛模型制作,跟骨内注射肿瘤细胞;sham+PBS组行假手术,跟骨内注射PBS。造模后11天(post-implantation day11,PID11),每组随机取10只小鼠,sham+PBS组和sarcoma+PBS组单次鞘内注射MC溶媒(PBS 5μl),sarcoma+MC组单次鞘内注射MC(1 nmol,5μl)。各组分别在鞘内注射前、注射后0.5、1、2、4、8、24 h测定机械性痛觉超敏、冷痛觉过敏。各组剩余4只小鼠在PID12鞘内注射后1 h行非伤害性触摸右侧足底90min,分析脊髓背角c-fos蛋白的表达。结果骨癌痛导致小鼠机械性痛阈和冷痛阈降低,脊髓背角c-fos蛋白的表达上调;单次鞘内注射MC能暂时提高小鼠疼痛阈值,并抑制脊髓背角c-fos蛋白的表达。结论小胶质细胞的激活对骨癌痛的维持具有重要作用。; 唐元章申文刘苏马正良孙玉娥张井浪苏小虎朱姗姗宋学军; 关键词：米诺环素骨癌痛小胶质细胞鞘内注射小鼠

鞘内注射氟代柠檬酸和/或米诺四环素对骨癌痛小鼠脊髓胶质细胞增殖及活化的影响被引量：4: 2009年; [目的]研究鞘内注射星形胶质细胞抑制剂氟代柠檬酸(FC)和/或小胶质细胞特异性抑制剂米诺四环素(MI)对骨癌痛小鼠脊髓胶质细胞增殖及活化的影响。[方法]建立小鼠跟骨癌痛模型。将雄性C3H/He小鼠随机分为6组(n=10),包括:正常组、假手术组、癌痛+人工脑脊液组、癌痛+FC组、癌痛+MI组、癌痛+FC+MI组。术后每天给药1次,持续21d,并于手术当天、术后3、7、14、21d采用免疫荧光法观察各组小鼠脊髓背角小胶质细胞及星形胶质细胞的增殖及活化情况,免疫印迹半定量分析骨癌痛小鼠脊髓腰膨大段星形胶质细胞标志物GFAP及小胶质细胞标志物CD11b的蛋白含量。[结果]⑴免疫荧光法:与正常组相比,癌痛组术后3d脊髓背角小胶质细胞明显被激活,术后14d脊髓背角星形胶质细胞明显被激活。癌痛组内,与ACSF组相比,MI、MI+FC组小鼠脊髓背角术后3d小胶质细胞及MI、FC、MI+FC组术后14d星形胶质细胞的活化均明显被抑制;其中MI+FC组更为显著。⑵免疫印迹结果显示:与术前对照组比较,骨癌痛组术后3d脊髓L4～L5节段小胶质细胞标志物CD11b的蛋白含量明显增加(P<0.05),术后14d星形胶质细胞标志物GFAP的蛋白含量明显增加(P<0.05)。[结论]在本实验剂量下,鞘内注射氟代柠檬酸和/或米诺四环素,能明显抑制不同时期骨癌痛小鼠脊髓背角小胶质细胞及星形胶质细胞的增殖及活化;同时小胶质细胞抑制剂米诺四环素能很好地抑制星形胶质细胞的活化,小胶质细胞的功能状态影响星形胶质细胞增殖活化。; 申文孙玉娥苏小虎唐元章张井浪殷勤; 关键词：骨癌痛氟代柠檬酸胶质细胞

脊髓IL-1β和TNF-α在胶质细胞活化诱发小鼠骨癌痛中的作用被引量：5: 2010年; 目的评价脊髓IL-1β和TNF-α在胶质细胞活化诱发小鼠骨癌痛中的作用.方法雄性C3H/He小鼠360只,8～10周,体重18～22 g,随机分为6组（n=60）：对照组（C组）、假手术组（S组）、骨癌痛＋5μl人工脑脊液组（BCP组）、骨癌痛＋0.5 nmol氟代柠檬酸组（FC组）、骨癌痛＋16μg米诺四环素组（MI组）和骨癌痛＋0.25 nmol FC＋8 μg MI组（FC＋MI组）.S组左侧跟骨骨髓腔内仅注入10 μl α-MEN;BCP组、FC组、MI组和FC＋MI组注入含有2×105个肿瘤细胞的10 μl α-MEN制备小鼠骨癌痛模型,各组于注射肿瘤细胞前即刻及注射后分别每天定时鞘内注射人工脑脊液、氟代柠檬酸、米诺四环素、氟代柠檬酸＋米诺四环素1次,连续21 d.分别于注射肿瘤细胞前0.5 h（T0）、注射后3、5、7、10、14、21 d（T1-6）时采用von Frey细丝刺激足底测定机械痛阈,于T0,1,3,5,6时各组随机取12只小鼠处死取脊髓,采用ELISA法检测IL-1β和TNF-α的含量.结果与T0时和C组比较,BCP组、FC组、MI组和Fc＋MI组L1-6时机械痛阈降低,T1,3,5,6时IL-1β、T5,6时,TNF-α含量升高（P〈0.05）;与BCP组比较,MI组和FC＋MI组T1-6时、FC组T4-6时机械痛阈升高,MI组和FC＋MI组T1,3,5,6时、FC组T5,6时IL-1β含量降低,FC组、MI组和FC＋MI组T5,6时TNF-α含量降低（P〈0.05）.结论脊髓IL-lβ和TNF-α参与了胶质细胞活化诱发小鼠骨癌痛的过程.; 孙玉娥申文唐元章苏小虎马正良; 关键词：白细胞介素1Β 神经胶质骨肿瘤

腹腔注射肉毒毒素A抑制CCI模型大鼠机械性触诱发痛和热痛觉过敏的形成: 2008年; 目的研究肉毒毒素A（Btx-A）对神经病理性疼痛模型大鼠的镇痛作用,并探讨其可能机制。方法采用大鼠坐骨神经结扎（CCI）模型,雄性SD大鼠50只随机分为5组（n=10）：①sham＋saline组,行假手术,腹腔内注射生理盐水;②sham＋Btx-A组,行假手术,腹腔内注射Btx-A（30 U/kg）;③CCI＋saline组;④CCI＋Btx-A（15 U/kg）组;⑤CCI＋Btx-A（30 U/kg）组;其中③~⑤组制作CCI模型。各组皆于术后即刻腹腔给药,于术前和术后1、3、5、7、14天观察机械缩足反射阈值和热刺激反射潜伏期的变化。结果神经病理性疼痛模型组大鼠术后第4天形成稳定的机械性触诱发痛和热痛觉过敏,腹腔给予肉毒毒素A大鼠机械缩足反射阈值和热刺激反射潜伏期与sham＋saline组相比无显著性差异。结论腹腔给予肉毒毒素A能抑制神经病理性疼痛大鼠机械性触诱发痛和热痛觉过敏的形成。; 张井浪申文苏小虎唐元章; 关键词：肉毒毒素A 热痛觉过敏腹腔注射神经病理性疼痛

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江苏省科技厅社会发展基金(BS2006016)

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