国家自然科学基金(30470739)
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
- 相关作者：朱平张英杨英杜金伟祝毓琳更多>>
- 相关机构：北京大学第一医院廊坊市中医院北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 常见白血病融合基因筛查在白血病诊断与分型中的意义被引量：12
- 2005年
- 目的: 分析病人白血病细胞染色体畸变涉及的86种融合基因和临床白血病类型的相关性,探讨常见融合基因筛查法在临床诊断和分型中的应用价值。方法: 收集161例初发或者复发的白血病患者及8例骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓细胞,提取RNA,用32条特异性引物逆转录为cDNA,利用白血病29种染色体畸变形成的融合基因的86种mRNA剪接变异体引物,分8管进行多重RT PCR,筛查白血病融合基因。结合临床状态和形态学观察了解融合基因与白血病类型的关系。结果: 白血病中115例(71% )分别检测出10种白血病常见融合基因,包括AML1 /ETO、PML/RARα、PLZF/RARα、dupMLL、MLL/AF6、MLL/AF10、CBFβ/MYH11、BCR/ABL、Hox11、Evi1。其中52例慢性粒细胞白血病(CML)100%检出BCR/ABL; 25例急性早幼粒细胞白血病(APL)中88%检出融合基因,其中21例APL检测出PML/RARα, 1例APL检测出PLZF/RARα; AML1 /ETO阳性的17例急性白血病(AL)16例为FAB M2亚型, 1例为混合型白血病; CBFβ/MYH11阳性的4例AL3例为FAB分型的M4, 1例为M5,属于向粒单细胞系统分化的白血病。16例AL检测出MLL基因异常,其中MLL/AF6白血病均为FAB分型的M5,具有典型的原始单核细胞白血病的特征。17例急性淋巴细胞白血病(ALL) 5例检测出BCR/ABL。8例MDS病人中2例检测出融?
- 祝毓琳张英朱平杨英杜金伟刘静
- 关键词：白血病诊断PML/RARΑ融合基因单核细胞白血病FAB分型PLZF
- 淋巴瘤相关抗原肽刺激所获细胞毒性T细胞克隆的特征被引量：3
- 2005年
- 目的研究抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞(CTL)克隆识别靶细胞的肽特异性和人类白细胞抗原(HLA)限制性,以及其赖以识别抗原肽的T细胞受体(TCR)基因表达序列的分子特征。方法利用体外CTL刺激扩增体系,应用免疫球蛋白重链可变区(IgHV)框架区上的B淋巴瘤相关抗原九肽(IgHV1QLVQSGAEV和IgHV3SLYLQMNSL)负荷的抗原递呈细胞(APC),刺激正常HLAA0201供者的外周血单个核细胞(PBMC),每周1次共4次,用流式细胞仪检测体外培养细胞的免疫表型的变化,并用肽/主要组织相容性基因复合体(MHC)四聚体方法检测肽特异性的CTL增殖情况。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测CTL与不同的靶细胞共同孵育时释放干扰素γ(IFNγ)的能力。应用逆转录多聚酶链反应(RTPCR)和T细胞受体(TCR)基因指纹谱型图方法检测培养前后的淋巴细胞的克隆变化,并用直接测序的方法得到CTL克隆的TCR基因序列。结果B淋巴瘤相关抗原肽4次刺激体外培养的PBMC后CD8+CTL大量增殖,CD4/CD8明显下降(0.10vs1.43,P<0.05)。IgHV1QLVQSGAEV/HLAA0201四聚体和CD8双阳性的肽特异性CTL数量(49.38%)比刺激前(0.04%)明显上升。ELISA检测IFNγ的分泌表明其识别靶细胞是肽特异性和HLA限制性的。TCR基因指纹谱型图显示抗原肽反复刺激获得的CTL的TCR表达集中于个别基因家族,呈克隆性增殖。结论应用IgHV基因框架区来源的B淋巴瘤相关抗原九肽可以使特异性CTL克隆增殖,这些克隆以肽特异性和HLA限制性的方式识别靶细胞。了解这些CTL的作用和TCR识别相关抗原肽的分子结构,将有助于确定体内T细胞和B细胞相互调节的机制。
- 郭晓玲朱平朱霞刘静欧媛杜金伟
- 关键词：抗原肽T细胞克隆免疫球蛋白重链可变区逆转录-多聚酶链反应主要组织相容性
- 混合系白血病基因相关白血病骨髓细胞形态学特征被引量：3
- 2005年
- 目的通过观察混合系白血病(Mixed lineage leukemia, MLL)基因相关白血病患者骨髓细胞形态学特征,了解MLL基因重排特征与FAB形态学分型的关系.方法用多重巢式RT-PCR方法检测214例白血病和淋巴瘤的常见白血病相关融合基因,选择有MLL基因异常的白血病患者骨髓细胞涂片做光镜下的形态学观察,比较具有不同MLL基因异常的白血病细胞的形态学差异.结果患者中发现MLL基因异常者14例,其中有 MLL/AF6融合基因者5例,骨髓细胞形态学均为FAB-M5型,具有典型的原始单核细胞白血病的特征:在光镜下均表现为细胞体积大,染色质疏松,细胞核折叠,有1～2个大而清晰的核仁,胞质嗜碱性呈毛玻璃样.多数细胞核旁淡染区明显,胞浆内可见细长型奥氏小体,染色体纤细.过氧化物酶染色阴性,非特异脂酶染色阳性,可被氟化钠抑制.其他MLL基因异常7例,包括MLL部分串联重复(PTD),MLL/AF10融合基因,MLL/AF4阳性者,分别属于M1,M4型,MDS和幼稚淋细胞白血病.结论 MLL基因异常主要见于与单核细胞相关的白血病,MLL/AF6重排可能是急性原始单核细胞型白血病一种独立亚型的重要标志,该融合基因可能与单核细胞分化有更密切的关系.
- 杨英朱平张英曹香红朱强
- 关键词：MLL基因骨髓细胞形态学细胞体积核仁
- 伊玛替尼治疗变异型BCR／ABL融合基因阳性的急性混合细胞白血病被引量：1
- 2009年
- 目的鉴定1例Ph染色体阳性的急性混合细胞白血病（AMLL）患者携带的变异型BCR／ABL融合基因，观察伊玛替尼治疗的疗效。方法联合使用形态学、免疫分型、细胞遗传学和基因分析确定患者的变异型BCR／ABL融合基因，使用伊玛替尼治疗并定量检测该融合基因。结果患者人院时检查Ph染色体阳性，荧光定量PCR未见BCR／ABL融合基因。形态学检查原始粒细胞比例0．66，免疫分型发现髓系和B系两群幼稚细胞。患者经化疗和骨髓移植疗效不佳，进一步检测发现新的变异型BCR／ABL融合基因（GenBank：EF423615），该融合蛋白较常见的BCR—ABL b2a2型缺失10个氨基酸并伴H893Q变异。遂用伊玛替尼治疗并迅速获得缓解，变异型融合基因表达量逐渐降低，5个月后转阴性。治疗中患者曾停药，变异型融合基因转为阳性，再次用药后又转为阴性。现患者已持续缓解12个月，生存状况良好。结论变异型BCR／ABL融合基因可能和患者的特殊临床表现有关，使用伊玛替尼治疗获得了很好的疗效。
- 刘红星曹星玉童春容吴彤王彤范桥珍伍平张弦蔡鹏朱平
- 关键词：融合蛋白质类
- 干扰素α-2b治疗慢性粒细胞性白血病的前瞻性随机对照研究被引量：7
- 2005年
- 目的比较高、低剂量干扰素(IFN)α2b治疗慢性粒细胞性白血病(CML)的效果。方法建立检测融合基因bcr abl的荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(RQ PCR)方法,观察治疗后融合基因表达水平的变化。选择30例临床初诊的CML患者随机分为两组,先服用羟基脲控制外周血白细胞达20×109/L以下,然后分别给予IFNα2b300万IU隔日皮下注射(3MIU组)和500万IU每周6次(5MIU组)皮下注射,治疗3～6个月,每月抽取骨髓标本,检测融合基因bcr abl的表达情况。结果RQ PCR的灵敏度达50拷贝bcr abl;分别取1×103拷贝/μl和1×107拷贝/μlbcr abl质粒,以及1例CML患者的cDNA同时作8管平行扩增bcr abl融合基因,批内变异系数分别为2.35%、1.48%和1.17%,不同批次之间以K562细胞cDNA作重复性分析,批间变异系数为5.13%;CML初诊患者bcr abl/GAPDH水平介于0.010～5.799,中位值为0.098;治疗3个月后3MIU组和5MIU组患者骨髓bcr abl水平平均下降19%和24%,两组比较差异无统计学意义(P=0.398),但是3MIU组副作用相对较小。结论RQ PCR监测融合基因bcr abl表达可以有效观察CML患者使用IFN的治疗效果;不同CML患者白血病细胞的bcr abl表达水平有较大差异;隔日3MIUIFN皮下注射治疗即可有效抑制CML白血病细胞的增殖,且副作用较小。
- 杜金伟朱平田丁董作仁杨淑莲李松波唐亚辉刘辉岑溪南张英朱强祝毓琳杨英王东侠王昭崔华马一盖陈文明刘复强马键王景文沈悌达万明
- 关键词：干扰素Α-2B慢性粒细胞性白血病前瞻性随机对照研究
