河北省卫生厅医学科学研究重点课题(07063)
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
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- NF-κB decoy寡核苷酸转染对结肠癌细胞NF-κB DNA结合活性的影响
- 2012年
- 目的观察核转录子κB(NF-κB)decoy寡核苷酸(ODNs)转染对结肠癌细胞NF-κB DNA结合活性的影响。方法将体外培养的人结肠癌SW480细胞随机分为5组。对照组:不作处理;脂多糖(LPS)组:LPS刺激3 h;NODN组:LPS刺激3 h后转染NF-κB decoy ODNs 6 h;SODN组:LPS刺激3 h后转染Scrambled ODNs 6 h;Lipo-fectamine2000组:LPS刺激3 h后加入同等剂量Lipofectamine2000 6 h。之后提取各组细胞核蛋白,用Western blot法检测NF-κB p65,用TransAMTM法检测细胞核NF-κB p65的DNA结合活性(用吸光度值,即A值表示)。结果细胞核中NF-κB p65的相对含量在对照组为10.1%±3.2%、LPS组为91.3%±17.8%、NODN组为86.5%±13.4%、SODN组为90.2%±14.9%、Lipofectamine2000组为89.7%±15.1%;LPS组、NODN组、SODN组、Lipo-fectamine2000组与对照组相比,P均<0.01。细胞核NF-κB p65的DNA结合活性(A值)在对照组为0.124±0.210、LPS组为1.547±0.110、NODN组为0.327±0.053、SODN组为1.509±0.172、Lipofectamine2000组为1.497±0.167;LPS组、NODN组、SODN组、Lipofectamine2000组与对照组相比,P均<0.01;NODN组与LPS组、SODN组、Lipofectamine2000组相比,P均<0.01;SODN组与Lipofectamine2000组相比,P>0.05。结论用NF-κB decoy寡核苷酸干预,可以明显抑制结肠癌细胞NF-κB p65的DNA结合活性。
- 徐晓云李冬斌李彬
- 关键词：核转录因子ΚB寡核苷酸SW480细胞
- NF-κB“诱骗”寡核苷酸对LPS诱导的SW480细胞IL-1β表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨核转录因子-κB(NF-κB)"诱骗(decoy)"寡核苷酸(ODNs)对脂多糖(LPS)诱导的结肠癌SW480细胞IL-1β表达的影响。方法体外培养SW480细胞并随机分为5组,对照组、LPS组(以10μg/L的LPS刺激3h)、NODN组(以10μg/L的LPS刺激3h后转染1μmol/L的NF-κB decoy ODNs)、SODN组(以10μg/L的LPS刺激3h后转染1μmol/L的错译ODNs)、lipofectin2000组(以10μg/L的LPS刺激3h后加入同剂量的lipofectin2000),检测各组细胞培养液中LDH的水平,并应用RT-PCR技术检测各组细胞IL-113 RNA的表达。结果各组细胞培养液中LDH浓度差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,LPS组、NODN组、SODN组及lipofectin2000组IL-1 13 mRNA表达均升高,差异有统计学意义(P<0.01);与LPS组比较,NODN组IL-1βmRNA表达显著降低(P<0.01),而SODN组及lipofectin2000组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NF-κB decoy ODNs可有效下调SW480细胞IL-1βmRNA的表达,有望成为治疗炎性肠病的一种新型基因药品。
- 徐晓云李冬斌李彬
- 关键词：核转录因子-ΚB寡核苷酸SW480细胞白细胞介素-1Β
- NF-κB“诱骗”寡核苷酸对结肠癌SW480细胞IL-8表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨核转录因子κB(NF-κB)"诱骗(decoy)"寡核苷酸(ODNs)对结肠癌SW480细胞IL-8表达的影响。方法体外培养SW480细胞,LPS(10μg/L)刺激3h后,用脂质体lipofectin2000介导NF-κB decoy ODNs转染6h,ELISA法检测上清液中IL-8,RT-PCR检测细胞IL-8 mRNA,并设对照组、LPS组、SODN组、lipofec-tin2000组。结果转染NF-κB decoy ODNs细胞的IL-8 mRNA和IL-8的表达高于对照组(P<0.01),但明显低于其他组(P<0.01)。结论NF-κB decoy ODNs明显抑制SW480细胞IL-8的表达。
- 徐晓云李彬蔡建辉王凤安
- 关键词：核转录因子ΚB寡核苷酸SW480细胞白细胞介素-8
- NF-κB decoy寡核苷酸对结肠癌SW480细胞TLR4表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨核转录子κB(NF-κB)decoy寡核苷酸(ODNs)对结肠癌SW480细胞Toll样受体4(TLR)4表达的影响。方法体外培养SW480细胞,LPS(10μg/L)刺激3 h后,用脂质体Lipofectin2000介导NF-κB decoyODNs转染6 h,RT-PCR法检测细胞的TLR4 mRNA。设对照组、LPS组、SODN组、Lipofectin2000组。结果转染NF-κB decoy ODN的SW480细胞的TLR4 mRNA表达明显高于对照组(P<0.01),但明显低于其他组(P均<0.01)。结论NF-κB decoy ODNs明显抑制SW480细胞TLR4的表达。
- 徐晓云李彬蔡建辉王凤安
- 关键词：寡核苷酸结肠肿瘤SW480细胞
