国家教育部博士点基金(2000030716)
- 作品数：4 被引量：41H指数：4
- 相关作者：曹少先杨利国茆达干张文伟舒邓群更多>>
- 相关机构：南京农业大学江苏省农业科学院华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 卵泡抑制素与GFP融合基因疫苗pEGISI的构建及表达被引量：5
- 2007年
- 为构建卵泡抑制素与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因疫苗pEGISI,将pcISI中的乙肝表面抗原(HBsAg)S基因及插入S基因中的抑制素(INH)基因片段酶切回收;PCR扩增pcISI中INH基因片段,调整阅读框,一起融合到pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,构建ISI-EGFP融合表达质粒pEGISI。酶切和测序鉴定表明,重组质粒pEGISI构建成功。将pEGISI转染293T细胞,16h后检测到绿色荧光,48h检测到强烈荧光,说明融合基因在293T细胞获得高表达;ELISA检测证实,表达产物ISI-EGFP融合蛋白具有INH的抗原抗体反应原性。质粒pEGISI的成功构建及表达为抑制素基因免疫的机理及安全性研究奠定了基础。
- 曹少先茆达干舒邓群程宝王进荣刘铁铮杨利国
- 关键词：卵泡抑制素EGFP基因克隆基因表达
- 双拷贝抑制素基因疫苗pcISI的构建和表达及免疫被引量：9
- 2008年
- 为构建高免疫原性的卵泡抑制素（Inhibin,INH）DNA疫苗,将INH基因片段α1-32插入到pcIS中乙肝表面抗原（HBsAg）S基因第112-113氨基酸残基密码子之间,构建含2拷贝INH的融合表达质粒pcISI。酶切和测序鉴定表明,重组质粒pcISI构建成功。脂质体包裹法将pcISI转染HeLa细胞,ELISA检测表达产物的INH免疫反应原性。结果表明,融合目的基因在HeLa细胞获得表达,ISI融合蛋白具有比IS融合蛋白更强的INH抗原抗体反应性。将pcISI免疫6只大鼠后,5/6的大鼠产生了抗INH抗体,抗体P/N值在免疫后第2-6周高于pcIS免疫组。这些结果表明,所构建的质粒pcISI可以表达抑制素,表达产物具有较强的免疫原性。
- 曹少先邢朝芳张德坤舒邓群杨利国
- 关键词：抑制素基因克隆基因表达基因免疫
- 生长抑素基因疫苗质粒pEGS/2SS的构建及表达被引量：7
- 2005年
- 将pcS/2SS中的乙肝表面抗原(HB sA g)S基因及插入S基因中的生长抑素(som atostatin,SS)基因亚克隆到pUC 19中,构建成pU SS/S质粒;PCR扩增pcS/SS中SS基因,调整阅读框,融合到pU SS/S质粒S基因后,构建成pU S/2SSG质粒;最后将S/2SSG融合基因克隆到pEGFPN 1中EGFP基因的5′端,构建S/2SS-EGFP融合表达质粒pEG S/2SS。酶切、测序鉴定后脂质体包裹法将pEG S/2SS转染H eL a细胞,荧光显微镜下检测荧光,EL ISA检测表达产物的SS免疫反应原性。酶切和测序鉴定表明,重组质粒pEG S/2SS构建成功。pEG S/2SS转染24 h后的H eL a细胞检测到绿色荧光,72 h检测到强烈荧光,表明融合基因在H eL a细胞获得高表达;EL ISA证实融合蛋白具有SS的抗原抗体反应原性。质粒pEG S/2SS的成功构建及表达为生长抑素基因免疫的机理及安全性研究奠定了基础。
- 曹少先杨利国张文伟茆达干何晓红
- 关键词：生长抑素EGFP基因克隆基因表达
