山西省自然科学基金(2011011033-1)
- 作品数：7 被引量：24H指数：3
- 相关作者：马恩波张建珍郭亚平张育平杨慧敏更多>>
- 相关机构：山西大学太原师范学院山西省农业科学院农业环境与资源研究所更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程农业科学生物学更多>>
- 飞蝗羧酸酯酶基因LmCarE25的体外重组表达
- 2013年
- 羧酸酯酶(Carboxylesterase,CarE)是一类在生物中广泛分布的多功能家族酶系,在昆虫抗药性形成机制中发挥重要作用。为探讨飞蝗Locusta migratoria(Meyen)羧酸酯酶基因LmCarE25的生物学功能,本文采用荧光实时定量PCR技术进行研究,发现其在飞蝗成虫各组织部位均有表达,其中胃盲囊、翅和肌肉中表达量较低,中肠、马氏管和脂肪体表达量较高。本文尝试在大肠杆菌和昆虫细胞体外重组表达该酶,构建重组表达载体pET32a-LmCarE25,SDS-PAGE结果显示,LmCarE25可在大肠杆菌BL21(DE3)和JM109中表达,蛋白分子量约为60 ku,但为包涵体;将LmCarE25基因插入真核表达载体pFastBacHTA中,借助Bac-to-Bac体系获得重组Bacmid,以sf9细胞系作为宿主细胞表达目的蛋白,Western-Blot检测结果显示,LmCarE25获得可溶性表达。上述结果为进一步深入研究飞蝗羧酸酯酶家族功能提供了基础资料。
- 王建新张学尧张建琴张建珍郭亚平马恩波
- 关键词：飞蝗羧酸酯酶原核表达真核表达
- 亚致死剂量马拉硫磷和西维因对飞蝗P450基因表达研究被引量：4
- 2012年
- 采用实时定量PCR技术检测飞蝗Locusta migratoria细胞色素P450基因CYP4G62、CYP6EL1和CYP9AQ1经马拉硫磷和西维因不同亚致死剂量和不同时间处理后mRNA的表达水平。结果表明,经马拉硫磷不同亚致死剂量LD10、LD30和LD50处理后,飞蝗CYP4G62和CYP6EL1均在高剂量LD50被显著诱导,分别为对照的3.03和2.0倍,而在低剂量LD10无显著性差异。CYP9AQ1在3个亚致死剂量下表达量均显著提高,且增量随处理浓度增加而降低。经西维因3个亚致死剂量处理后,除在LD30这一浓度下引起CYP4G62表达提高外,其它的P450基因均无显著性差异。选择2种农药的LD15对飞蝗进行点滴处理,分别检测6、12、24和48 h基因的相对表达。经马拉硫磷LD15处理后,除CYP6EL1在12 h和CYP9AQ1在24 h表达量显著降低外,其它各时间点基因表达均无显著差异。经西维因处理不同时间后,3个P450基因的相对表达量均无显著性差异。综合上述结果说明马拉硫磷对3个细胞色素P450基因有一定的诱导作用,而西维因对其无诱导作用。
- 于荣荣郭艳琼张建珍马恩波郭亚平
- 关键词：细胞色素P450马拉硫磷西维因亚致死剂量
- 镉急性染毒对中华稻蝗羧酸酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响被引量：3
- 2012年
- 为深入探讨重金属镉(cadmium,Cd)的毒性效应,采用不同浓度氯化镉溶液对中华稻蝗Oxya chinensis Thunberg 4龄若虫进行急性染毒,对处理后24、48、72和96 h虫体内羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性进行测定。结果表明,随着处理时间的延长,对照组和处理组CarE和GST活性均表现为先升后降的趋势。与对照组相比,以α-NA为底物时高浓度处理组(80 mg.L-1)CarE活性在处理后48 h被激活;以β-NA为底物时中浓度处理组(40 mg.L-1)CarE活性在72 h达到最高;以CDNB为底物时,低浓度处理组(20 mg.L-1)GST活性在24 h被激活达到最大值,之后降低。结果显示,中华稻蝗4龄若虫在Cd胁迫下,体内CarE和GST活性发生了变化,以此来抵御机体所受到的重金属毒害。
- 杨慧敏张育平李丽君马恩波郭亚平
- 关键词：中华稻蝗镉羧酸酯酶谷胱甘肽S-转移酶
- 溴氰菊酯对飞蝗羧酸酯酶基因表达的影响被引量：6
- 2014年
- 【目的】研究溴氰菊酯作用下飞蝗羧酸酯酶基因的mRNA表达特性,为溴氰菊酯的代谢解毒及飞蝗Locusta migratoria防治中抗性风险的评估提供基础资料。【方法】本文采用不同剂量溴氰菊酯处理3龄飞蝗,提取总RNA,体外反转录合成cDNA模板,采用Real-time PCR技术分析飞蝗羧酸酯酶基因在溴氰菊酯不同浓度和不同时间处理后的表达模式。【结果】飞蝗经不同浓度溴氰菊酯处理12 h后,LmCesA3和LmCesE1表现为诱导效应;除LmCesA2外,其余羧酸酯酶基因经溴氰菊酯LD30剂量处理后分别在不同的时间点表现为诱导效应。【结论】5个羧酸酯酶基因LmCesA1、LmCesA3、LmCesD1、LmCesE1和LmCesI1可以被溴氰菊酯诱导,表明其可能参与飞蝗对溴氰菊酯的代谢解毒及抗性产生。
- 张建琴王燕李大琪杨美玲张建珍马恩波
- 关键词：飞蝗溴氰菊酯羧酸酯酶基因表达REAL-TIMEPCR
- 镉和铬急性染毒对中华稻蝗解毒酶及多酚氧化酶的影响被引量：10
- 2013年
- 为了解重金属对生物体营养物质的消化、吸收、代谢以及对昆虫的毒性效应,研究了重金属镉和铬急性染毒对中华稻蝗5龄若虫几种代谢解毒酶及多酚氧化酶活性的影响。研究结果显示:高浓度镉和铬分别在48h和72h激活CarE活性;当镉处理中华稻蝗96h后,体内ACP活性下降;铬染毒72h后,AKP活性升高,而铬作用24h和48h后,ACP活性表现为在低浓度处理组中被激活,高浓度处理组中被抑制;镉处理48h后,GST活性升高,铬处理72h和96h,GST有升高的趋势;镉处理24h和铬处理96h后PPO活性降低。这些结果表明,镉和铬染毒后,中华稻蝗体内代谢解毒酶及多酚氧化酶活性发生变化,这种变化与重金属的浓度及作用时间密切相关。
- 刘耀明杨慧敏张育平吴海花张建珍马恩波郭亚平
- 关键词：镉铬多酚氧化酶中华稻蝗
- 镉锌处理麦苗对中华稻蝗(Oxya chinensis)体内锌、镉水平及生化指标的影响被引量：2
- 2013年
- 为了研究Cd、Zn污染对中华稻蝗生理生化的影响,选用不同浓度Cd、Zn溶液(Cd0+Zn0,Cd20+Zn0,Cd20+Zn50,Cd20+Zn100,Cd20+Zn200)mg·L-1培养麦苗饲喂中华稻蝗(Oxya chinensis)进行慢性染毒,测定麦苗和虫体(4龄若虫)中Cd与Zn蓄积量、虫体中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性和总抗氧化能力(T-Aoc)。研究结果显示,在Cd浓度恒定的情况下,随Zn处理浓度的增大,麦苗和虫体中Zn含量显著上升,(Cd20+Zn200)mg·L-1处理组麦苗和虫体Zn含量分别为对照组的2.03和1.63倍;Cd含量呈先升高后降低趋势,在(Cd20+Zn100)mg·L-1处理组达到最高值,分别为10.40、4.35μg·g-1,(Cd20+Zn200)mg·L-1处理组下降到7.36、3.35μg·g-1。在Cd和Zn联合作用下,随着Zn浓度的增加,中华稻蝗体内的MDA含量升高。SOD表现出先升高、后降低的趋势。与对照组相比,Cd单一处理组GPx活性增加,随着Zn的加入,其GPx活性降低。T-Aoc在(Cd20+Zn100)mg·L-1处理组活性最高。研究结果表明,低浓度Zn的加入可以增加中华稻蝗对Cd的富集,Cd和Zn的联合作用能够引起中华稻蝗脂质过氧化损伤。
- 朴君张育平杨慧敏吴海花张建珍马恩波李丽君郭亚平
- 关键词：中华稻蝗镉锌相互作用生化指标
