浙江省自然科学基金(Y2100535)
- 作品数：9 被引量：40H指数：4
- 相关作者：郭航远池菊芳季政彭放翟小亚更多>>
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- 瑞舒伐他汀对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶2表达和细胞迁移的影响被引量：8
- 2011年
- 目的观察瑞舒伐他汀对同型半胱氨酸（Hcy）诱导大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶2（MMP2）表达以及对血管平滑肌迁移的影响，探讨Hey致动脉粥样硬化以及他汀药物逆转的可能机制。方法体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞，加入不同浓度的Hcy分别作用24h、48h和72h，在1000μmol／LHey浓度下分别加入不同浓度的瑞舒伐他汀干预，采用免疫印迹法和明胶酶谱法检测细胞培养上清液中MMP2的表达及酶的活性。在Transwell小室外室中加入1000μmol／L浓度的Hcy，内室加入定量的大鼠平滑肌细胞悬液，培养48h，观察Hcy对平滑肌细胞迁移侵袭力的影响；同时加入不同浓度瑞舒伐他汀溶液，分别培养24h、48h和72h，观察瑞舒伐他汀对Hcy诱导平滑肌细胞迁移侵袭力的影响。结果Hcy浓度在50～5000μmol／L时促进血管平滑肌细胞MMP2蛋白的表达，Hey浓度在50～1000μmol／L时增强血管平滑肌细胞MMP2的酶活性，浓度在5000μmol／L时抑制MMP2的活性（F值分别为9．31、6．44、5．97，均P〈O．05）；瑞舒伐他汀浓度在10^-9～10^-5mol／L时，能抑制Hcy对血管平滑肌MMP2表达和酶活性的增强作用（F值分别为3．92、4．78、2．14，均P％0．05）。Hcy在50～5000μmol／L浓度下能刺激血管平滑肌细胞迁移，Hcy浓度为0、50、100、500、1000、5000μmol／L时平滑肌细胞迁移分别为（18．32±2．17）个、（32．68±4．34）个、（44．75±4．08）个、（61．39±5．21）个、（79．74±5．54）个和（90．78±5．83）个（F=5．31，P〈0．05）；而瑞舒伐他汀可以抑制Hcy对血管平滑肌细胞迁移的刺激作用，在瑞舒伐他汀浓度为10^-9、10、10^-8、10^-7、10^-5mol／L时平滑肌细胞迁移分别为（79．74±5．54）个、（62．53±6．41）个、（48．37±5．66）个、（31。41±4．79）个、（19．27±3．62）个和（11．17±2．33）个（F=4．99，P〈0．05）。结论Hcy能影响血
- 邢杨波郭航远史亚飞杨芳芳裘宇芳杨彪彭放
- 关键词：半胱氨酸基质金属蛋白酶2细胞运动
- 同型半胱氨酸对大鼠血管平滑肌细胞MMP-2表达、细胞迁移的影响及瑞舒伐他汀的逆转作用被引量：2
- 2011年
- 目的 观察瑞舒伐他汀对同型半胱氨酸（Hcy）诱导大鼠血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达以及对血管平滑肌细胞迁移的影响,探讨Hcy致动脉粥样硬化以及他汀药物逆转的可能机制.方法 体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞,加入不同浓度的Hcy分别作用 24、48和72h;在1 000μmol/L Hcy浓度下分别加入不同浓度的瑞舒伐他汀干预,采用免疫印迹法和明胶酶谱法检测细胞培养上清液中MMP-2的表达及酶的活性.在Transwell小室外室中加入1 000μmol/L浓度的Hcy,内室加入定量的大鼠平滑肌细胞悬液,培养48h,观察Hcy对平滑肌细胞迁移侵袭力的影响;同时加入不同浓度瑞舒伐他汀溶液,48h,观察瑞舒伐他汀对Hcy诱导平滑肌细胞迁移侵袭力的影响.结果 Hcy浓度在50～5 000μmol/L时促进血管平滑肌细胞MMP-2蛋白的表达（P＜0.05）;Hcy浓度在50～1 000μmol/L时增强血管平滑肌细胞MMP-2的酶活性（P＜0.05）,浓度在5 000μmol/L时抑制血管平滑肌细胞MMP-2的活性（P＜0.05）.瑞舒伐他汀浓度在10-9～10-5mol/L时,能抑制Hcy对血管平滑肌MMP-2表达和酶活性的增强作用（P＜0.05）.Hcy在50～1 000μmol/L浓度下能刺激血管平滑肌细胞迁移（P＜0.05）;瑞舒伐他汀可以抑制Hcy对血管平滑肌细胞迁移的刺激作用（P＜0.05）.结论 Hcy能影响血管平滑肌细胞MMP-2蛋白的表达,瑞舒伐他汀能抑制Hcy对血管平滑肌细胞MMP-2的表达和酶的活性增强作用,并能抑制Hcy对血管平滑肌细胞迁移的刺激作用,这可能是瑞舒伐他汀抗动脉粥样硬化的作用之一.
- 邢杨波郭航远史亚飞杨芳芳裘宇芳杨彪彭放
- 关键词：同型半胱氨酸瑞舒伐他汀细胞迁移
- 黄酒对同型半胱氨酸诱导的大鼠血管内皮细胞基质金属蛋白酶2表达的影响被引量：4
- 2013年
- 目的:观察黄酒和红葡萄酒是否能抑制同型半胱氨酸(Hcy)诱导的大鼠血管内皮细胞(VECs)中基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达。方法:大鼠原代主动脉VECs经分离培养及纯化鉴定后,取第3～4代细胞用于实验。将Hcy(0、50、100、500、1 000μmol/L)与VECs共同孵育48 h及100μmol/L Hcy与VECs共同培养24、48、72 h,分别用免疫印迹和明胶酶谱法检测Hcy对MMP-2蛋白表达和活性的影响,确定Hcy最佳干预的浓度和时间。每种酒(1.0%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%、2.0%)与100μmol/L Hcy共同孵育VECs 48 h,MTT法检测酒类对细胞活性的影响,确定最佳干预浓度后处理分control组、Hcy组、Hcy+黄酒组、Hcy+红酒组和Hcy+酒精组5组。培养48 h后收集样品,免疫印迹法检测VECs中MMP-2的表达量,明胶酶谱法测定VECs上清液中MMP-2的活性。结果:Hcy在50～500μmol/L呈浓度依赖性地促进MMP-2蛋白表达和活性的增强(P<0.05或P<0.01),Hcy在100μmol/L时干预24、48、72 h MMP-2蛋白表达和活性的增强呈时间依赖性,48 h时最明显(P<0.01)。与Hcy组相比,黄酒组和红酒组VECs MMP-2蛋白表达及上清液中MMP-2活性显著下降(P<0.05),酒精组MMP-2蛋白表达及上清液中MMP-2活性下降,但差异均无统计学意义(P>0.05)。与酒精组相比,黄酒组和红酒组VECs MMP-2表达及上清液中MMP-2活性的差异有统计学意义(P<0.05),黄酒组和红酒组之间无显著差异(P>0.05)。结论:Hcy能增强血管内皮细胞MMP-2蛋白表达及酶的活性,小剂量的黄酒和红葡萄酒均能抑制Hcy诱导的MMP-2表达及活化。
- 季政郭航远池菊芳翟小亚刘龙斌孙荷彭放
- 关键词：黄酒内皮细胞基质金属蛋白酶2同型半胱氨酸
- 家庭血压监测——高血压治疗和管理的新希望被引量：6
- 2012年
- 高血压在世界各地呈日益扩张的趋势，如何有效地治疗高血压已成为预防心血管疾病最首要的事情之一。2010版的中国高血压防治指南指出：我围高血压患病率仍呈增长趋势，每10例成年人中就有2例高血压患者；估计目前全困高血压患者至少2亿；但高血压知晓率、治疗率和控制率较低，分别低于50％、40％和10％[1]。
- 季政郭航远池菊芳
- 关键词：家庭血压监测高血压疾病管理
- 高同型半胱氨酸血症致LDLr^(-/-)小鼠动脉粥样硬化形成和加重的研究被引量：2
- 2017年
- 目的探讨高同型半胱氨酸血症对低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLr^(-/-))小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法48只7周龄LDLr^(-/-)小鼠分为高蛋氨酸组、高脂组、高蛋氨酸高脂组和对照组,分别喂食高蛋氨酸饲料、高脂饲料、高蛋氨酸高脂饲料和标准饲料。在小鼠第19、23和27周龄时,每组分别处死4只小鼠并进行检测血样中的TC、TG、LDL-C和同型半胱氨酸(Hcy)水平,并测定主动脉窦部及内膜面粥样硬化面积。结果在小鼠第19、23和27周龄时,高蛋氨酸组和高蛋氨酸高脂组小鼠血清中Hcy水平较高脂组和对照组水平高(均P<0.01),高脂组和高蛋氨酸高脂组小鼠血清TC、TG和LDL-C水平较高蛋氨酸组和对照组水平高(均P<0.01);相比对照组小鼠在第27周龄时于主动脉窦部及内膜面形成动脉粥样硬化,其它3组小鼠第19周龄时即有动脉粥样硬化形成,其中高蛋氨酸组动脉粥样硬化程度较高脂组轻,而高蛋氨酸高脂组最重(P<0.05)。结论高Hcy血症可导致LDLr^(-/-)小鼠动脉粥样硬化形成和加重。
- 许富康刘龙斌吕海涛季政唐伟良翟小亚孟立平池菊芳王平孙爱静邢杨波彭放郭航远
- 关键词：动脉粥样硬化同型半胱氨酸
- 黄酒多酚对LDLR^(-/-)小鼠MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达和动脉粥样硬化斑块的影响被引量：11
- 2013年
- 目的观察黄酒是否可以通过黄酒多酚发挥对动脉粥样硬化斑块的抑制作用并探讨其可能机制。方法40只6周龄雄性低密度脂蛋白受体敲除(LDLR-/-)小鼠,高脂饲料喂养诱导形成动脉粥样硬化模型,随机分为高脂对照组、瑞舒伐他汀组、黄酒多酚10 mg/(kg·d)组、黄酒多酚30 mg/(kg·d)组和黄酒多酚50 mg/(kg·d)组,每组8只,分别予以无菌水、10 mg/(kg·d)瑞舒伐他汀和10、30、50 mg/(kg·d)黄酒多酚干预。16周后处死小鼠,检测血脂,观察胸腹主动脉粥样硬化情况,Western blot测定胸主动脉组织内基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)的表达,明胶酶谱法测定主动脉弓动脉粥样硬化处MMP-2和MMP-9的活性。结果与高脂对照组相比,总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)在黄酒多酚组和瑞舒伐他汀组明显下降(P<0.01),甘油三酯(TG)在瑞舒伐他汀组明显下降(P<0.01),在黄酒多酚组差异不明显(P>0.05),在黄酒多酚组与瑞舒伐他汀组差异明显(P<0.05);5组间高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平差异无统计学意义(P>0.05)。与高脂对照组相比,主动脉粥样硬化面积在瑞舒伐他汀组和黄酒多酚10、30、50 mg/(kg·d)组分别减少74.14%、18.51%、40.09%、38.42%(P<0.01),不同浓度黄酒多酚组主动脉粥样硬化面积与瑞舒伐他汀组比较差异显著(P<0.01)。黄酒多酚和瑞舒伐他汀均能明显抑制MMP-2、MMP-9的表达和活性(P<0.01),增强TIMP-1、TIMP-2的表达(P<0.01)。结论黄酒多酚具有类似瑞舒伐他汀的作用,能够调节血脂,在抑制MMP-2、MMP-9表达和活性的同时增强TIMP-1、TIMP-2的表达,减轻动脉粥样硬化斑块的形成,这可能是黄酒对心血管系统的保护机制之一。
- 翟小亚郭航远池菊芳季政唐伟良赵飞蒋承建
- 关键词：动脉粥样硬化基质金属蛋白酶2
- 同型半胱氨酸对大鼠血管内皮细胞MMP-2表达的影响和黄酒、红葡萄酒的逆转效应及其机制被引量：3
- 2013年
- 目的观察黄酒能否抑制同型半胱氨酸(Hcy)诱导的大鼠血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)表达及探讨其可能机制。方法大鼠原代主动脉VECs经分离培养及纯化鉴定后,取第3～4代细胞用于实验。将Hcy(0、50、100、500、1 000μmol/L)与VECs共同孵育48h及100μmol/L Hcy与VECs共同培养24、48、72h,分别用荧光定量PCR(FQ-PCR)和免疫印迹法检测Hcy对VECs中MMP-2mRNA和蛋白表达的影响,确定Hcy最佳的刺激浓度和时间。每种酒(10、12、14、16、18、20mL/L)与100μmol/L Hcy共同孵育VECs 48h,MTT法检测酒类对细胞活性的影响,确定最佳干预浓度后处理分为正常组、Hcy组、Hcy+黄酒组、Hcy+红葡萄酒组、Hcy+酒精组5组。培养48h后收集样品,FQ-PCR检测VECs中MMP-2mRNA水平,免疫印迹法测定VECs中MMP-2的表达量。结果在50～1 000μmol/L浓度范围内与对照组相比Hcy能明显地增强MMP-2 mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),至500μmol/L时开始达到最高。Hcy(100μmol/L)刺激24、48、72h后MMP-2mRNA和蛋白表达较对照组有明显的增强(均P<0.01),48h后开始达到最大值。实验组与Hcy组相比,黄酒组和红酒组MMP-2mRNA和蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(均P<0.01)。酒精组MMP-2mRNA和蛋白表达下降,差异均无统计学意义(P>0.05)。与酒精组相比,黄酒组和红酒组VECs中MMP-2mRNA和蛋白表达均明显下降,差异有统计学意义(均P<0.01),黄酒组和红酒组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Hcy能增强VECs中MMP-2mRNA和蛋白的表达,这可能在动脉粥样硬化的发病机制中发挥重要作用。黄酒和红葡萄酒能抑制Hcy对MMP-2mRNA和蛋白表达的增强,这可能是它们抗动脉粥样硬化和心血管保护作用的机制之一。
- 季政郭航远池菊芳刘龙斌唐伟良许富康翟小亚孙荷茹翱
- 关键词：黄酒红葡萄酒内皮细胞同型半胱氨酸
- 一种大鼠主动脉内皮细胞分离培养的改良方法被引量：4
- 2012年
- 目的探索一套原代培养大鼠主动脉内皮细胞(RAEC)简单实用的方法体系。方法 SD大鼠两只,无菌环境下分离胸腹主动脉,清除脂肪、结缔组织。显微剪剪开主动脉,内膜面向下贴附于少量Ⅰ型胶原酶上消化60min。离心收集内皮细胞置于1%明胶包被的六孔板,加入20%胎牛血清的M199中培养。3～4天后换液更换内皮细胞培养基(ECM)培养。当细胞长满约90%底面积时,玻璃探针机械剔除成纤维样细胞后传代。倒置显微镜和抗Ⅷ因子抗体对细胞分别做形态学和免疫细胞化学鉴定。结果原代培养3～4天时,少量细胞开始贴壁并分裂生长。更换ECM后细胞增殖迅速,培养8～10天时可见细胞长满90%左右的底面积,呈典型的"铺路石"或"鹅卵石"征。免疫细胞化学鉴定表明在分离培养的内皮细胞中有特定Ⅷ因子表达。原代周期8～10天,传代周期3～4天,经纯化传代后纯度接近100%。传至第6代仍未见细胞分裂增殖活性下降。结论本实验体系培养RAEC简单有效,重复性良好。获得细胞数量多、纯度高,有利于实验人员掌握。
- 季政郭航远池菊芳刘龙斌彭放
- 关键词：主动脉内皮细胞原代培养
- 依普利酮对高糖和IL-1β诱导的心脏成纤维细胞MMP-2表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨依普利酮干预对高糖和白介素1β(IL-1β)诱导的人心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响。方法将人心脏成纤维细胞分别培养在正常葡萄糖浓度(正常对照组)、高浓度葡萄糖(高糖组)和等渗甘露醇(高渗对照组)的培养液中,分别添加IL-1β和(或)盐皮质激素受体阻断剂依普利酮进行干预。明胶酶法测定细胞培养上清液中MMP-2的活性,RT-PCR测定成纤维细胞MMP-2和组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)mRNA的表达。结果与正常对照组比较,高糖组MMP-2活性和mRNA的表达显著增高(P<0.01),高渗对照组MMP-2活性和mRNA表达也增高但低于高糖组(P<0.05)。与高糖组比较,高糖+IL-1β组MMP-2活性和mRNA的表达呈现叠加现象,高糖+依普利酮组和正常对照+IL-1β+依普利酮组MMP-2活性和mRNA的表达分别显著低于高糖组和正常对照+IL-1β组(P<0.05)。结论高糖可通过高渗外的作用诱导人心脏成纤维细胞MMP-2活性增强和mRNA表达增加,IL-1β对该诱导作用具有促进作用,而依普利酮则呈现抑制效应。
- 池菊芳郭航远唐伟良吕海涛周妍Hiroyasu UZUI
- 关键词：高糖白介素1Β基质金属蛋白酶2
